Técnicas Histológicas: Un Manual Completo para el Estudio de Tejidos, Diapositivas de Histología

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TÉCNICA HISTOLÓGICA

DCB Marcela A. Segoviano Mendoza

Técnicas Histológicas

Es el conjunto de procedimientos y

técnicas de laboratorio aplicados a

un tejido (animal o vegetal) con la

finalidad de prepararlo y conferirle

las condiciones optimas para poder

Observar

Examinar

Analizar

sus componentes morfológicos a

través de los diferentes tipos de

microscopios

Técnica

histológica

Se elige de

acuerdo a las

características

de los tejidos a

observar

Existe una gran

variedad

• Histoquímica y citoquímica
• Inmunohistoquímica y técnicas de hibridación
• Radioautografía
• Cultivo de tejidos y órganos
• Separación de células y orgánulos por centrifugación diferencial
• Microscopia y técnicas microscópicas especializadas

Inmediatos o vitales

• Administración de colorantes vitales a través de las vías digestiva o intratraqueal; mediante inyecciones sanguíneas, linfáticas, subcutánea, o intraperitoneal.
• Tinta china, carmín de litio, azul tripan
  • Se emplean colorantes que se aplican a células o tejidos provenientes de organismos vivos
  • Mitocondrias con el verde de jano , los gránulos de las células cebadas con el rojo neutro
  • Microscopio de fluorescencia
• Observación al estado fresco
• Uso de colorantes inocuos para la vida de las células
• Se utiliza microscopia de campo oscuro o contraste de fases
• Protozoarios, células sanguíneas, cultivo de tejidos

Coloración supravital

Coloración intravital

⚫ La calidad y la fidelidad con que una célula o un tejido se

observe al microscopio , dependen de la prontitud y

cuidado con la que se obtenga y procese la muestra.

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA

Biopsia

⚫ (Del griego bios = vida y opsis = visión),

⚫ Consiste en la toma de un fragmento de tejido u órgano de un ser vivo. Realiza a través de una operación quirúrgica

⚫ Se dispondrá de recipientes de diferentes tamaños, plásticos con tapa hermética y fijador

⚫ Cuando la pieza quirúrgica requiere de fotografías, esta debe preservarse en refrigeración a 4 grados C, para evitar de esta manera los cambios histológicos y no alterar los tejidos.

⚫ El recipiente con la muestra debe estar debidamente rotulado con el nombre del paciente, con letra legible, sitio de origen de la muestra y fecha.

⚫ Se le asigna un numero de identificación para los bloques de parafina,

laminillas, informes, fotografías, archivo y almacenamiento de datos para

todos los exámenes.

⚫ Para el caso de pruebas especiales se podrán anteponer las siguientes siglas:

⚫ H Histoquímica ⚫ IQ Inmunohistoquímica ⚫ ICQ Inmunocitoquímica ⚫ IF Inmunofluorescencia ⚫ ME Microscopía Electrónica o las ⚫ siglas propias del laboratorio.

Necropsia

⚫ Del griego : Nekrós que

significa muerte y opsis :

significa mirar

⚫ las muestras se obtienen de

seres muertos: En este caso es

recomendable que los tejidos y

órganos se obtengan

inmediatamente después de

producida la muerte.

Citología exfoliativa

⚫ El estudio de células de superficies epiteliales de

renovación constante (mucosas bucal, gástrica, vaginal,

uretral)

Improntas

⚫ a) Por raspado. se emplea el borde de un portaobjeto u hoja de bisturí y se extiende el material colectado

⚫ b) Por aplastamiento. técnica muy útil para fragmentos de tejido pequeño y blando, como el proveniente de tumores cerebrales

⚫ c y d) Por contacto: la muestra se obtiene por aposición de la superficie del tejido contra el portaobjeto

Se realiza en órganos donde las células tienen escasos nexos de unión entre sí y

con las restantes estructuras tisulares

Técnica por congelación

⚫ Se utiliza cuando se necesita valorar de

inmediata de la muestra

⚫ Se congelan muestras de tejido de

tamaño pequeño mediante el uso de

dióxido de carbono sólido o mediante

inmersión en un líquido frío

( isopentano ) a una temperatura de –

°C.

⚫ La congelación endurece el tejido y

permite el corte con un micrótomo.

⚫ Espécimen

representativo

⚫ Adecuada cantidad

de tejido para

diagnostico

⚫ Se obtiene mediante el empleo de sustancias químicas

individuales o mezcla de estas

⚫ Conserva la estructura del tejido en forma permanente

para permitir el Tx ulterior

⚫ Las piezas deben sumergirse en el fijador inmediatamente

después de extraerse del organismo

Fijación