Vista previa parcial del texto
¡Descarga USP AA IR y Fluorescencia y más Apuntes en PDF de Análisis Químico e Instrumental solo en Docsity!
USP 39 Pruebas Físicas | (857) Espectroscopía UV-Vis 779 (857) ESPECTROSCOPÍA ULTRAVIOLETA-VISIBLE INTRODUCCIÓN Los espectros en el ultravioleta-visible (UV-Vis) se obtienen cuando la interacción entre la radiación incidente y la nube de electrones en un croméforo resulta en una transición de electrones, la cual implica la promoción de uno o más de los electro- nes de la capa externa o de unión de un estado fundamental a un estado de energía más elevado. Las bandas de los espectros UV y visibles de las sustancias por lo general son amplias y sin un alto grado de especificidad para identificación de compues- tos. Sin embargo, son adecuados para valoraciones cuantitativas y, en el caso de muchas sustancias, son útiles como formas adicionales de identificación. En la ley de Lambert-Beer, la absorbancia (A,) de una solución a una longitud de onda dada, 2, se define como el logaritmo en base 10 de la inversa de la transmitancia (7): - 1 E 1, = intensidad de la radiación transmitida a la misma longitud de onda 4 L,¿ = intensidad de la radiación incidente a la longitud de onda 2 Ante la ausencia de cualquier otro factor físico o químico, A, es proporcional a la longitud del paso o camino óptico, b, a través del cual pasa la radiación, y a la concentración, c, de la sustancia en la solución de acuerdo con lo siguiente: cb e, = absortividad molar € = concentración de soluto (mol/L) b = longitud de paso (cm) Sí la concentración, c, se expresa en g/L, la constante «; se vuelve a,, la cual se denomina absortividad, La expresión 8] ES E E o a Ar hc que representa la absorbancia específica de uma sustancia disuelta, se refiere a la absorbancia de una solución de 10 g/L (al 1% m/v) en una celda de 1 cm medida a una longitud de onda definida, de modo que: Al, =100,=100,1M M= concentración molar de la solución Cuando se miden soluciones en celdas de 1 cm, las concentraciones de aproximadamente 10 ug de la muestra por mL a menudo producen absorbancias de 0,2-0,8 en la región UY o visible, Para obtener información sobre teoría y principios de mediciones, ver el capítulo de información general Espectroscopía Ul- travioleta-Visible—Teoría y Práctica (1857), el cual no es un recurso obligatorio. CALIFICACIÓN DE ESPECTROFOTÓMETROS UV-VIS La aptitud de un instrumento específico para un procedimiento dado se asegura usando una evaluación paso a paso del ciclo de vida para la aplicación deseada desde la selección hasta el retiro del instrumento: calificación del diseño (DQ, por sus siglas en inglés); calificación de la instalación (1Q, por sus siglas en inglés); una calificación inicial del desempeño con respecto a la especificación, también conocida como calificación operativa (OQ, por sus siglas en inglés); y una calificación continua del desempeño (PQ, por sus siglas en inglés), Para más detalles, ver el capítulo Calificación de instrumentos Analíticos (1058). El propósito de este capítulo es proveer métodos de prueba y criterios de aceptación para asegurar que el instrumento es adecuado para su uso previsto (calificación operativa) y que continuará funcionando adecuadamente durante periodos exten- sos como parte de la calificación del desempeño. Al igual que con cualquier dispositivo espectrométrico, se debe calificar la exactitud y precisión de la longitud de onda (eje x) y fotométrica (eje y o eje de señal) de un espectrofotómetro UY-Vis, ade- más de que se deben establecer los parámetros fundamentales de luz espuria y de resolución. La calificación operativa debe abarcar los intervalos operativos requeridos en el laboratorio para las escalas de absorbancia y de longitud de onda. Calificación de la Instalación Los requisitos de calificación de la instalación proveen evidencia de que el hardware y el software se han instalado adecuada- mente en el lugar deseado. 
