Descripción de agares, Diapositivas de Microbiología

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AGAR XLD

X I L O S A L I S I N A D E S O X I C O L A T O

L A U R A V A L E N T I N A G U T I É R R E Z P I N I L L A

¿QUÉ ES?

• Es un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial para el aislamiento de enteropatógenos. COMPOSICIÓN
• Peptona pancreática de carne 5,00 g
• Extracto de carne 5,00 g
• Sales biliares 8,50 g
• Citrato sódico 10,00 g
• Tiosulfato sódico 8,50 g
• Citrato férrico amoniacal 1,00 g
• Lactosa 10,00 g
• Rojo neutro 25,00 mg
• Verde brillante 0,33 mg
• Agar-agar 15,00 g

- Colonias de Salmonella: El género Salmonella también fermenta la xilosa, generando inicialmente colonias amarillas. Sin embargo, tras agotar al carbohidrato xilosa, ataca a la lisina por su enzima lisina descarboxilasa. La descarboxilación de la lisina genera álcalis que hacen virar el color de la colonia y al medio circundante a rojo original. ➢ Producción de H2S - Permite detectar a las especies de Salmonella productoras de H2S; para ello cuenta con la fuente de sulfuro representado por el tiosulfato de sodio y un revelador de la reacción que es el citrato férrico de amonio. ➢ Cloruro de sodio, agar y rojo de fenol

• El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico
• El agar es el agente solidificante
• El rojo de fenol detecta los cambios de pH Salmonella

PREPARACIÓN

1. Disolver 63 g de medio en 1 litro de agua destilada.
2. Calentar agitando hasta ebullición para su disolución.
3. Mantener la ebullición durante 2 minutos.
4. Autoclavar 116 ºC durante 5 minutos.
5. El color final del medio es rojo-naranja.

USOS

• Se usa para la recuperación de enteropatógenos, principalmente del género Shigella y secundariamente del género Salmonella. TIPOS DE MUESTRAS ➢ Heces: Las muestras de heces se pueden sembrar de forma directa en el agar XLD, realizando una buena distribución del material para obtener colonias aisladas. ➢ Alimentos: En el caso de alimentos se pueden usar caldos de enriquecimiento para Salmonella y para Shigella. Para Salmonella se puede utilizar caldo selenito cistina, caldo tetrationato verde brillante, entre otros. ➢ Agua: Técnica de filtración con membrana y el uso de agar XLD, entre otros.

Manitol

salado

• La salinidad actúa como sustancia inhibitoria y evita el crecimiento de bacterias Gram negativas.
• Es diferencial debido a la presencia del carbohidrato manitol y al indicador de pH rojo de fenol.
• Las colonias que no fermentan el manitol crecen en el medio tomando los nutrientes que les proporciona los extractos y peptonas de carne y la tripteína.
• Las colonias en este caso pueden ser rosadas débil o fuertes, y el medio se queda del mismo color o cambia a fucsia.

FUNDAMENTO

1. Suspender 111 g de medio deshidratado en un litro de agua destilada.
2. Mezclar vigorosamente.
3. Calentar agitando frecuentemente y dejar hervir durante 1 minuto para disolver completamente los ingredientes.
4. Esterilizar a 121°C durante 15 minutos.
5. Dejar enfriar hasta una temperatura entre 40- 45ºC y verte en placas estériles.
6. Dejar solidificar a temperatura ambiente antes de su utilización.
7. El color del medio deshidratado es beige claro y el color del medio preparado es rojo naranja.

PREPARACIÓN

El pH final del medio preparado debe quedar en 7,4 ± 0,

• Este medio es ideal para sembrar muestras con flora mixta en la que se quiere buscar la presencia de Staphylococus aureus
• Uno de sus usos más frecuentes es en el análisis microbiológico de muestras de exudados faríngeos y secreción nasal
• También puede incluirse en la siembra de infecciones de heridas, hemocultivos, LCR, lavado bronco alveolar, entre otras.
• El agar manitol salado es útil para reaislar colonias de urocultivos provenientes de agar CLED o agar sangre
• También es válido en el análisis microbiológico de alimentos, agua potable, suelos, entre otras aplicaciones.

USOS

CONSIDERACIONES

• Obtener un crecimiento de colonias amarillas no indica que sea Staphylococcus aureus.
• Por otra parte, hay que considerar que otras especies de Staphylococcus diferentes al aureus también son capaces de fermentar el manitol.
• No se recomienda tomar colonias de forma directa del agar manitol para realizar la prueba de la coagulasa, ya que la alta concentración de sal del medio puede interferir en el resultado.
• Finalmente se recomienda incubar las placas sembradas de manitol salado hasta durante 48 horas, debido a que algunas cepas de S. aureus pueden fermentar lentamente el manitol