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Asignatura: bioquimica, Profesor: , Carrera: Farmacia, Universidad: US
Tipo: Ejercicios
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Serie IV
Bioquímica y Biol. Mol. I (Curso 2013/2014)
1. Una enzima con una Km de 2.6 10-3 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 0,3 M. La velocidad observada fue de 5.9 10-5 M min-1. Si la concentración inicial de sustrato fuera 2 10-5 M, ¿Cuál será la concentración de producto tras 5 y 10 minutos?
Sol: 2.25x10-6^ M; 4.5 x10-6^ M
2. Una enzima cuya Km es 2.4 10-4 M se ensaya con las siguientes concentraciones de sustrato: a) 2 10-7 M, b) 6.3 10-5 M; c) 10-4 M; d) 5 10-2 M. La velocidad medida en la reacción con 5 10-2 M de sustrato fue de 0. mmoles/min. Calcular las velocidades iniciales en los demás casos.
Sol: 0.106 μ moles/min; 26.6 μ moles/min; 37.7 μ moles/min
la concentración de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M.
¿Cuál será la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato: a) 3,5 x 10-
M; b) 2 x 10-4 M; c) 2 x 10-6 M Sol.: a) 34,8 μmoles/min; b) 31,8 μmoles/min; c) 3,18 μmoles/min;
4. ¿Qué información puede obtenerse a partir de una representación de Lineweaver-Burk cuando la recta obtenida, convenientemente extrapolada, corta al eje de abscisas en -40 mol/litro? Sol.: Km= 25 mM
5. Calcular la Ki de un inhibidor no competitivo si 2 10-4^ M del Inhibidor da lugar a un 75% de inhibición de una reacción enzimática Sol: Ki = 6.66 10-5^ M
6. Al representar por el método de los dobles inversos la cinética de la enzima fosfatasa alcalina (en una suspensión de 8 μg/ml) y en presencia de p- nitrofenil fosfato, se obtiene una recta que corta al eje de ordenadas en 1/ min/μM, y una pendiente de 0.05 min. Calcular: a) Vmax; b) Km; c) Número de recambio (PM 80000 D).
d) ¿De qué tipo de inhibidor se trata? e) Calcular Km´, Vmax´ y Ki; f) Determinar el grado de inhibición en estas circunstancias si estamos en presencia de 45 μM de p-nitrofenil fosfato.
7. Al ensayar una enzima en presencia y ausencia de un inhibidor se btuvieron los siguientes datos:
v ( μ moles/min)
[S] (M) [I]=0 [I]=1mM
1 x 10 -3^250
0.5 x 10 -3^200
0.33 x 10 -3^166
0.25 x 10 -3^143
0.20 x 10 -3^125
¿Qué tipo de inhibidor es? Calcular los parámetros cinéticos.
Sol: Vmax = 0.33 10^3 mmol/min; Km = 0.33 10-3^ M; Km´ = 0.66 10-3^ M; Ki=1mM
8. Al representar por el método de Lineweaver-Burk datos obtenidos en diferentes condiciones para una reacción enzimática se observan 3 rectas que cortan a los ejes X,Y en los siguientes puntos:
Sin I I 1 (1 mM) I 2 (1.5 mM)
Corte ordenadas (mmol/min) -1^ 0.3 0.3 0.
Corte abcisas mM-1^ -3 -1.5 -
Calcular las constantes cinéticas y Ki de cada inhibidor
9 .- A partir de los siguientes valores determinar gráficamente Km y Vmáx para una reacción enzimática: [S] (M) vi (μmoles P/2 min) 5,000 x 10-3^ 0, 2,000 x 10-3^ 0, 1,420 x 10-3^ 0, 1,052 x 10-3^ 0, 0,500 x 10-3^ 0,
Sol.: Km= 1 mM; Vmáx= 0,48 μmoles/2 min
13. ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para conseguir una inhibición de 15% de una reacción enzimática, si la concentración de sustrato es 1,7 mM, la Km para el sustrato es 0,24 mM y la Ki para el inhibidor 2,3 x 10-5^ M?
Sol: [ I ]=0.032mM
14. La actividad de una lipasa es inhibida por ácido. Los resultados de velocidades para diferentes concentraciones de sustrato en ausencia y presencia de ácido son:
v ( μ moles/2 min)
[S] (mM) [I]=0 [I]=1mM
_________________________________________________
6.25 0.625 0.
0.862 0.455 0.
0.424 0.340 0.
¿Qué tipo de inhibidor es? Calcular los parámetros cinéticos
16 .- Se ensaya una enzima con su sustrato específico en presencia de un inhibidor competitivo. Si la velocidad máxima de la reacción no inhibida es de 55 μmoles/min, calcular la velocidad inicial de la reacción inhibida y el grado de
inhibición, sabiendo que: [S]= Km= 2 x 10-4 M y que [I]= Ki= 2,5 x 10-3 M.
Sol.: v'= 18,33 μmoles/min; grado de inhibición 33,35%