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ejercicios enzimas, Ejercicios de Bioquímica

Asignatura: bioquimica, Profesor: , Carrera: Farmacia, Universidad: US

Tipo: Ejercicios

2013/2014

Subido el 26/06/2014

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Serie IV
PROBLEMAS CINÉTICA ENZIMÁTICA
Bioquímica y Biol. Mol. I (Curso 2013/2014)
1. Una enzima con una Km de 2.6 10-3 M se ensayó con una concentración
inicial de sustrato de 0,3 M. La velocidad observada fue de 5.9 10-5 M min-1. Si
la concentración inicial de sustrato fuera 2 10-5 M, ¿Cuál será la concentración
de producto tras 5 y 10 minutos?
Sol: 2.25x10-6 M; 4.5 x10-6 M
2. Una enzima cuya Km es 2.4 10-4 M se ensaya con las siguientes
concentraciones de sustrato: a) 2 10-7 M, b) 6.3 10-5 M; c) 10-4 M; d) 5 10-2 M.
La velocidad medida en la reacción con 5 10-2 M de sustrato fue de 0.128
mmoles/min. Calcular las velocidades iniciales en los demás casos.
Sol: 0.106 μmoles/min; 26.6 μmoles/min; 37.7 μmoles/min
3. Una enzima cataliza una reacción a una velocidad de 35 µmoles/min cuando
la concentración de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M.
¿Cuál será la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato: a) 3,5 x 10-3
M; b) 2 x 10-4 M; c) 2 x 10-6 M
Sol.: a) 34,8 µmoles/min; b) 31,8 µmoles/min; c) 3,18 µmoles/min;
4. ¿Qué información puede obtenerse a partir de una representación de
Lineweaver-Burk cuando la recta obtenida, convenientemente extrapolada,
corta al eje de abscisas en -40 mol/litro?
Sol.: Km= 25 mM
5. Calcular la Ki de un inhibidor no competitivo si 2 10-4 M del Inhibidor da lugar
a un 75% de inhibición de una reacción enzimática
Sol: Ki = 6.66 10-5 M
6. Al representar por el método de los dobles inversos la cinética de la enzima
fosfatasa alcalina (en una suspensión de 8 µg/ml) y en presencia de p-
nitrofenil fosfato, se obtiene una recta que corta al eje de ordenadas en 1/300
min/µM, y una pendiente de 0.05 min.
Calcular: a) Vmax; b) Km; c) Número de recambio (PM 80000 D).
- Al ensayar en presencia de 60 µM de glicerol fosfato, y haciendo la misma
representación gráfica, el punto de corte con el eje de ordenadas es el mismo,
mientras que la pendiente es de 0.1 min,
d) ¿De qué tipo de inhibidor se trata? e) Calcular Km´, Vmax´ y Ki; f)
Determinar el grado de inhibición en estas circunstancias si estamos en
presencia de 45 µM de p-nitrofenil fosfato.
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Serie IV

PROBLEMAS CINÉTICA ENZIMÁTICA

Bioquímica y Biol. Mol. I (Curso 2013/2014)

1. Una enzima con una Km de 2.6 10-3 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 0,3 M. La velocidad observada fue de 5.9 10-5 M min-1. Si la concentración inicial de sustrato fuera 2 10-5 M, ¿Cuál será la concentración de producto tras 5 y 10 minutos?

Sol: 2.25x10-6^ M; 4.5 x10-6^ M

2. Una enzima cuya Km es 2.4 10-4 M se ensaya con las siguientes concentraciones de sustrato: a) 2 10-7 M, b) 6.3 10-5 M; c) 10-4 M; d) 5 10-2 M. La velocidad medida en la reacción con 5 10-2 M de sustrato fue de 0. mmoles/min. Calcular las velocidades iniciales en los demás casos.

Sol: 0.106 μ moles/min; 26.6 μ moles/min; 37.7 μ moles/min

  1. Una enzima cataliza una reacción a una velocidad de 35 μmoles/min cuando

la concentración de sustrato es 0,01 M. La Km para el sustrato es 2 x 10-5 M.

¿Cuál será la velocidad inicial a las concentraciones de sustrato: a) 3,5 x 10-

M; b) 2 x 10-4 M; c) 2 x 10-6 M Sol.: a) 34,8 μmoles/min; b) 31,8 μmoles/min; c) 3,18 μmoles/min;

4. ¿Qué información puede obtenerse a partir de una representación de Lineweaver-Burk cuando la recta obtenida, convenientemente extrapolada, corta al eje de abscisas en -40 mol/litro? Sol.: Km= 25 mM

5. Calcular la Ki de un inhibidor no competitivo si 2 10-4^ M del Inhibidor da lugar a un 75% de inhibición de una reacción enzimática Sol: Ki = 6.66 10-5^ M

6. Al representar por el método de los dobles inversos la cinética de la enzima fosfatasa alcalina (en una suspensión de 8 μg/ml) y en presencia de p- nitrofenil fosfato, se obtiene una recta que corta al eje de ordenadas en 1/ min/μM, y una pendiente de 0.05 min. Calcular: a) Vmax; b) Km; c) Número de recambio (PM 80000 D).

  • Al ensayar en presencia de 60 μM de glicerol fosfato , y haciendo la misma representación gráfica, el punto de corte con el eje de ordenadas es el mismo, mientras que la pendiente es de 0.1 min,

d) ¿De qué tipo de inhibidor se trata? e) Calcular Km´, Vmax´ y Ki; f) Determinar el grado de inhibición en estas circunstancias si estamos en presencia de 45 μM de p-nitrofenil fosfato.

7. Al ensayar una enzima en presencia y ausencia de un inhibidor se btuvieron los siguientes datos:

v ( μ moles/min)

[S] (M) [I]=0 [I]=1mM


1 x 10 -3^250

0.5 x 10 -3^200

0.33 x 10 -3^166

0.25 x 10 -3^143

0.20 x 10 -3^125

¿Qué tipo de inhibidor es? Calcular los parámetros cinéticos.

Sol: Vmax = 0.33 10^3 mmol/min; Km = 0.33 10-3^ M; Km´ = 0.66 10-3^ M; Ki=1mM

8. Al representar por el método de Lineweaver-Burk datos obtenidos en diferentes condiciones para una reacción enzimática se observan 3 rectas que cortan a los ejes X,Y en los siguientes puntos:

Sin I I 1 (1 mM) I 2 (1.5 mM)

Corte ordenadas (mmol/min) -1^ 0.3 0.3 0.

Corte abcisas mM-1^ -3 -1.5 -

Calcular las constantes cinéticas y Ki de cada inhibidor

9 .- A partir de los siguientes valores determinar gráficamente Km y Vmáx para una reacción enzimática: [S] (M) vi (μmoles P/2 min) 5,000 x 10-3^ 0, 2,000 x 10-3^ 0, 1,420 x 10-3^ 0, 1,052 x 10-3^ 0, 0,500 x 10-3^ 0,

Sol.: Km= 1 mM; Vmáx= 0,48 μmoles/2 min

13. ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para conseguir una inhibición de 15% de una reacción enzimática, si la concentración de sustrato es 1,7 mM, la Km para el sustrato es 0,24 mM y la Ki para el inhibidor 2,3 x 10-5^ M?

Sol: [ I ]=0.032mM

14. La actividad de una lipasa es inhibida por ácido. Los resultados de velocidades para diferentes concentraciones de sustrato en ausencia y presencia de ácido son:

v ( μ moles/2 min)

[S] (mM) [I]=0 [I]=1mM

_________________________________________________

6.25 0.625 0.

0.862 0.455 0.

0.424 0.340 0.

¿Qué tipo de inhibidor es? Calcular los parámetros cinéticos

16 .- Se ensaya una enzima con su sustrato específico en presencia de un inhibidor competitivo. Si la velocidad máxima de la reacción no inhibida es de 55 μmoles/min, calcular la velocidad inicial de la reacción inhibida y el grado de

inhibición, sabiendo que: [S]= Km= 2 x 10-4 M y que [I]= Ki= 2,5 x 10-3 M.

Sol.: v'= 18,33 μmoles/min; grado de inhibición 33,35%