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Asignatura: Fisiología vegetal, Profesor: Javier Sampedro, Carrera: Biología, Universidad: USC
Tipo: Apuntes
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Se obtuvieron espectros de preparaciones de cloroplasto enriquecidas en Fotosistema I y se obtuvo el espectro de absorción bajo iluminación intensa y bajo casi oscuridad. En la gráfica se representa el valor la absorbancia en luz menos la absorbancia en oscuridad. Explica el resultado.
Una suspensión de la cianobacteria Anacystis se irradia con luz verde, absorbida preferentemente por el fotosistema II (2) o con luz rojo lejano absorbida preferentemente por el fotosistema I (1) Los signos + y – indican encendido y apagado de luces. A lo largo del experimento se mide la fluorescencia a 689 nm. Explica los resultados y dibuja la gráfica de la liberación
de O 2 a lo largo del experimento.
DCMU y fluorescencia
En este experimento iluminamos cloroplastos adaptados a la oscuridad con un número variable de flashes muy breves e intensos de luz. Inmediatamente añadimos DCMU y medimos la fluorescencia producida cuando volvemos a iluminar las plantas con flashes de luz tenue. Explica los resultados
Se estudia el efecto de la luz que activa preferentemente el fotosistema II y la que activa el fotosistema I sobre el estado redox del citocromo f en el alga roja Porphyridium cruentum. Los cambios en el estado redox del citocromo f se detectan por el cambio de absorción a 420 nm. Explica los resultados. ¿Qué forma del citocromo f absorbe más a 420 nm?¿Cuál es el efecto del DCMU.
Un trabajo de 2002 sugirió que el citocromo c 6 presente en los cloroplastos podría ser un transportador de electrones alternativo a la plastocianina, como ocurre en cianobacterias y algunas algas. Para examinar la validez de dicha hipótesis se aislaron y caracterizaron mutantes de Arabidopsis en los genes PetE1 y PetE2 que son los únicos que codifican plastocianinas. La figura 1 muestra mediante inmunodetección los niveles de la subunidad grande de la rubisco (RbcL), plastocianina (PC) y citocromo c 6 (Cytc 6 ) en plantas silvestres WT y en el doble mutantes pete1 / pete2. La figura 2 corresponde a la morfología de plantas de 8 semanas silvestres (WT), mutante pete1 (pete1-1.1), mutante pete2 (pete2-1.1). El doble mutante no sobrevive en estas condiciones y por ello no se muestra. Sin embargo, cuando el doble mutante se crece en condiciones de baja iluminación y en un medio suplementado con sacarosa se logra un mínimo desarrollo (Fig. 3). Finalmente se estudia la fluorescencia de los cloroplastos (Fig. 4) de plantas silvestres (WT), plantas silvestres incubadas con DCMU (WT DCMU) y el doble mutante ( pete1 / pete2 ) en condiciones de iluminación continua y de intensidad moderada. En base a estos resultados, discuta la hipótesis planteada. Cuando se sobreexpresó el gen del citocromo c 6 en el doble mutante no se observó nigún cambio respecto al doble mutante.