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Química Biológica
Seminario Espectrofotometría
Algunos conceptos previos ….
- (^) Una radiación electromagnética tiene una naturaleza dual
Espectrofotometría
Es un conjunto de técnicas analíticas cuali y cuantitativas Se basa en la interacción de las moléculas y las radiaciones electromagnéticas. La cantidad de luz absorbida por una sustancia a distintas es como una huella digital y se llama espectro de absorción
Espectrofotometría
Cualitativa Cuantitativa
Espectro de absorción La cantidad de radiación absorbida depende de la concentración
Transmitancia y absorbancia I o = I a
- I t
Puedo cuantificar
la luz transmitida
(transmitancia) o
la absorbida
(absorbancia)
Transmitancia y absorbancia
T = ( It / Io) x 100 Transmitancia
A= - Log T
Absorbancia
A= log ( 100 / %T)
…. empleamos la absorbancia
A= abc
Conc. Prob = (A Prob/A Patrón)(Conc. Patrón)
Calibración del espectrofotómetro
- (^) Prender el equipo y esperar 15 minutos para que los circuitos alcancen temperatura.
- (^) Elegir la longitud de onda deseada con el selector.
- (^) Verificar 0% de T. Se realiza en modo transmitancia y colocando un cuerpo negro