PROBLEMES AMPLIACIÓ DE BIOLOGIA CEL·LULAR
PROBLEMA 6
A) A partir dels resultats del gel, quin significat tenen les bandes discretes dels carrils
1, 4 i 5? I les bandes difoses de la resta de carrils?
Carril 1: La banda discreta és resultat de la presència d’una proteïna de 45kDa que es troba
intacta. Això és degut a que la proteïna ha pogut translocar a la membrana del microsoma
en el medi in vitro i, per tant, no ha pogut ser degradada per la proteïnasa K. La proteïna
secretora que esperaríem trobar és de 40kDa, 5kDa menys pesada que la que hem
obtingut. Podem inferir també que l’ATP i el GTP són necessaris per la hidrolisi que es dona
durant el procés de translocació de la proteïna secretora que li permetrà entrar al
microsoma.
Carril 4: La banda discreta d’aquest carril és igual a la del carril 1 (proteïna intacta de
45kDa). La diferència amb el primer carril és que en la preparació utilitzada en el sistema in
vitro, la quarta té GMP-PNP no hidrolitzable en comptes de GTP. Com que la hidròlisi és
necessària pel procés de translocació, segurament d’alguna manera el GMP-PNP ha passat
a GTP.
Carril 5: En aquest carril trobem dues bandes discretes, una de 40kDa, el mateix pes
molecular que la proteïna secretora que busquem i una de 5kDa. La principal diferència amb
els altres 2 carrils és que s’ha deixat més temps d’incubació abans d’extreure les proteïnes
del medi.
Les bandes dels carrils 2, 3, 6 i 7 són difoses. Això significa que les proteïnes que estaven
sent incubades en aquests medis han estat digerides per la proteïnasa K perquè no han
