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Extracción Casera de ADN: Obtención de Ácido Desoxirribonucleico con Materiales Caseros, Ejercicios de Bioquímica Médica

El proceso de extracción de ADN a partir de materiales caseros, como tomates o chícharos. El objetivo es observar macroscópicamente las cadenas de ADN. Se incluye una introducción a la estructura y funciones del ADN, la importancia de su extracción en la investigación y el uso de diferentes técnicas para su obtención. Se proporcionan materiales y métodos para realizar la práctica en el laboratorio.

Tipo: Ejercicios

2021/2022

Subido el 13/02/2022

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UNIVERSIDAD DE SONORA
DIVISIÓN DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA SALUD
CAMPUS CAJEME
Licenciatura: Medicina.
Asignatura: Laboratorio de Bioquímica Médica.
Docente: M.C. Zulema Chalas Vega.
PRÁCTICA 1. EXTRACCIÓN CASERA DE ADN
Objetivo: realizar la técnica de extracción de ADN empleando materiales caseros
y observar macroscópicamente las cadenas de ADN.
INTRODUCCIÓN
El ADN (ácido desoxirribonucleico), es una molécula la cual contiene la
información genética en todos los seres vivos, incluso en algunos virus. El ADN se
organiza estructuralmente en cromosomas (Figura 1). A nivel funcional se
organiza en genes, que son piezas de ADN que generan características físicas
específicas. La molécula de ADN consiste en dos cadenas que se enrollan entre
ellas para formar una estructura de doble hélice; cada cadena tiene una parte
central formada por azúcares (desoxirribosa) y grupos fosfato. Enganchado a cada
azúcar hay una de las siguientes 4 bases: adenina (A), citosina (C), guanina (G), y
timina (T). Las dos cadenas se mantienen unidas por enlaces entre las bases; la
adenina se enlaza con la timina, y la citosina con la guanina (Figura 2) (Austin,
s.f.).
La secuencia de bases nitrogenadas a lo largo de la cadena es lo que codifica las
instrucciones para formar proteínas y moléculas de ARN. Estas características no
vienen directamente del propio ADN, sino de una molécula llamada ARN, formada
a partir del ADN, y codifica una proteína. Esto es lo que se llama el dogma central
de la biología molecular: en el ADN hay genes que generan ARNs mensajeros, y
estos generan proteínas. Y esto es lo que da las diferentes características físicas
que observamos en individuos, como el color de ojos, o la altura. También se ha
visto que algunas veces estas instrucciones están almacenadas directamente en
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UNIVERSIDAD DE SONORA

DIVISIÓN DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA SALUD

CAMPUS CAJEME

Licenciatura: Medicina. Asignatura: Laboratorio de Bioquímica Médica. Docente: M.C. Zulema Chalas Vega. PRÁCTICA 1. EXTRACCIÓN CASERA DE ADN Objetivo : realizar la técnica de extracción de ADN empleando materiales caseros y observar macroscópicamente las cadenas de ADN. INTRODUCCIÓN El ADN (ácido desoxirribonucleico), es una molécula la cual contiene la información genética en todos los seres vivos, incluso en algunos virus. El ADN se organiza estructuralmente en cromosomas (Figura 1). A nivel funcional se organiza en genes, que son piezas de ADN que generan características físicas específicas. La molécula de ADN consiste en dos cadenas que se enrollan entre ellas para formar una estructura de doble hélice; cada cadena tiene una parte central formada por azúcares (desoxirribosa) y grupos fosfato. Enganchado a cada azúcar hay una de las siguientes 4 bases: adenina (A), citosina (C), guanina (G), y timina (T). Las dos cadenas se mantienen unidas por enlaces entre las bases; la adenina se enlaza con la timina, y la citosina con la guanina (Figura 2) (Austin, s.f.). La secuencia de bases nitrogenadas a lo largo de la cadena es lo que codifica las instrucciones para formar proteínas y moléculas de ARN. Estas características no vienen directamente del propio ADN, sino de una molécula llamada ARN, formada a partir del ADN, y codifica una proteína. Esto es lo que se llama el dogma central de la biología molecular: en el ADN hay genes que generan ARNs mensajeros, y estos generan proteínas. Y esto es lo que da las diferentes características físicas que observamos en individuos, como el color de ojos, o la altura. También se ha visto que algunas veces estas instrucciones están almacenadas directamente en

el ARN, sin necesidad de pasar a proteínas, como en el caso de los micro ARNs, los cuales son una excepción (Austin, s.f.). Figura 1. Organización estructural del ADN. Fuente: INH, s.f.

  • Batidora (licuadora)
  • Colador
  • Vaso de precipitado (250 mL)
  • Tubo de ensaye (16 x 125) Procedimiento (VIDEO 1)
    1. Preparar la “disolución de lisis” mezcla medio vaso de agua fría, 5 g (una cucharadita) de sal, 12 g (3 cucharaditas) de bicarbonato sódico y 10 mL ( cucharaditas) de detergente lavavajillas. Mantener en hielo hasta su utilización.
    2. Triturar la muestra de origen vegetal (tomate, chícharos, etc.), con la batidora y un poco de agua destilada fría.
    3. Mezclar un volumen del vegetal batido con dos volúmenes de la disolución de lisis.
    4. Agitar vigorosamente durante unos dos minutos y dejar reposar en frío hasta que desaparezca más de la mitad de la espuma.
    5. Filtrar la mezcla por un colador para retener los restos tisulares y obtener el denominado “caldo molecular”, en el que se encuentran los restos celulares de pequeño tamaño y las biomoléculas como el ADN.
    6. En un tubo de ensayo, añadir un volumen de caldo molecular y dos volúmenes de alcohol (96 %) frío (a -20 °C), dejando resbalar lentamente este por la cara interna del recipiente para evitar que se mezclen.
    7. Observar cómo se forman unos filamentos blancos y salinos (en los que se encuentra el ADN) en la interfase agua-alcohol (Figura 3).
    8. Recolectar el ADN con un palillo y depositarlo en un frasco. Figura 3. Observación macroscópica de las fibras y cadenas de ADN.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Investiga y explica los siguientes puntos:

  1. Finalidad de realizar la extracción de ADN a baja temperatura.
  2. Función de emplear los siguientes productos: sal, bicarbonato y detergente.
  3. Función de utilizar alcohol etílico en la última etapa de la extracción. CONCLUSIONES REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Austin, C. P. (s. f.). ADN (ácido desoxirribonucleico). National Human Genome Research Institute (NHGRI). Recuperado de: https://www.genome.gov/es/genetics- glossary/ADN-acido-Desoxirribonucleico. Checa, A. (2016). Extracción de ADN. CONOGASI. Recuperado de: https://conogasi.org/articulos/extraccion-de-adn/. [INH] Instituto Nacional del Cáncer (s. f.). ADN (Ácido Desoxirribonucleico). De los Institutos Nacionales de la Salud de EE. UU. Recuperado de: https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionarios/diccionario-genetica/ def/adn. Marcos-Merino, J. M., Gallego, R. E., & Ochoa de Alda, J. G. (2019). Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo de una estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos. Educación química, 30 (1): 58 - 69. Ríos-Sánchez E., Calleros E., González-Zamora A., Rubio J., Martínez O. C., Martínez A., Hernández S., Pérez-Morales R. (2016). Análisis comparativo de diferentes métodos de extracción de DNA y su eficiencia de genotipificación en población mexicana. Acta Universitaria, 26 (4): 56 - 65. DOI:10.15174/au.2016.1078.