BASES DE MICROBIOLOGIA, Esquemas y mapas conceptuales de Microbiología

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FISION BINARIA

Crecimiento bacteriano

Crecimiento bacteriano

Fisión binaria

Esquema mostrando el proceso

de división binaria de una

bacteria en forma de bastón

Es el aumento irreversible de materia viva que por lo general se

efectúa mediante el incremento y la división de las células

Medición del crecimiento

Medición del crecimiento

Cuenta directa con cámara de Petroff-Hausser

Limitaciones Las células muertas no se distinguen de las vivas Las muy pequeñas son difíciles de ver Se requiere tiempo y habilidad para que sea un método preciso No es bueno para una suspensión diluída (menos de 10 6 cel/ml). La muestra se coloca aquí El portaobjetos lleva marcada una rejilla. Encima de cada cuadrado se coloca un volumen conocido de muestra. Se cuentan las células al microscopio

Métodos para realizar un recuento de bacterias viables

en placa de petri

Métodos para realizar un recuento de bacterias viables

en placa de petri

Célula viable

Es capaz de dividirse para dar una progenie. Un recuento de este tipo implica contar colonias en una placa de petri. Cada célula viable será una unidad formadora de colonia incubación

Inóculo viable Presencia de una fuente de energía Presencia de nutrientes que provean los elementos esenciales para sintetizar la biomasa Ausencia de inhibidores del crecimiento Condiciones físico-químicas adecuadas (temp., pH, tensión de oxígeno, etc.)

Qué condiciones se requieren para el

crecimiento de un cultivo ???

Parámetros que caracterizan el desarrollo de

un cultivo

Parámetros que caracterizan el desarrollo de

un cultivo

I. Velocidad específica de crecimiento II. Tiempo de duplicación III. Número de generaciones/hora IV. Existencia o no de una fase de latencia en el crecimiento V. Número de células en fase estacionaria. Biomasa máxima VI. Rendimiento del crecimiento

 ln x ó ln N tiempo ln xo ó ln No log x = log xo + /2,303 t /2, log x ó log N tiempo log xo ó log No ln (x/xo) =  t x/xo = e t

x = xo e

t x ó N tiempo

II. Tiempo de duplicación

x = 2 xo t = tD ln (x/xo) =  t ln (2 xo/xo) =  tD

tD = ln 2 /  = 0,693 / 

 = ln 2 / tD = 0.693 / tD

Como se ve tD varía inversamente con  y viceversa

Qué diferencia existe entre  y  ???

1 / = ln 2 /   = ln 2. 

 =  / ln 2

n = (log N - log No) / log 2 ó^ n = (log x - log xo) / log 2

tD = t / n  = n / t = 1 / t

D  es el cambio de masa por unidad de tiempo y por unidad de masa ( h

• )  es el número de generaciones por unidad de tiempo ( n. h-1^ )

log N cel viables/ml tiempo A B C D A: Fase de latencia B: Fase exponencial C: Fase estacionaria D: Fase de muerte

Representación gráfica del crecimiento de

un cultivo en batch

Representación gráfica del crecimiento de

un cultivo en batch

V. Número de células en fase estacionariaV. Número de células en fase estacionaria

Agotamiento de algún nutriente (solo si está en concentración limitante) Inhibición del crecimiento por liberación de toxinas Estrés físico y/o químico: cambio de pH, temperatura, etc.

VI. Rendimiento del crecimiento.

Coeficiente de rendimiento

VI. Rendimiento del crecimiento.

Coeficiente de rendimiento

Agotamiento de un nutriente esencial Desarrollo de un pH adverso Acumulación de productos finales del metabolismo que al pH del medio pueden resultar tóxicos para el microorganismo e impedir su crecimiento Y = peso de bacteria formada (g/l) / peso de nutriente limitante consumido (g/l)

Y = coeficiente de rendimiento

Efecto de la concentración de nutrientes sobre la

velocidad de crecimiento

Efecto de la concentración de nutrientes sobre la

velocidad de crecimiento

 = max x s / ks + s

 s (mg/ml) 5 g/l 3 g/l 0.5 g/l 0.1 g/l 0.05 g/l 5 mg/l 0.1 mg/l 1.0 g/l log N°cel/ml tiempo

Cultivo diáuxico

Cultivo diáuxico

Tiempo Log N/ml Consumo de glucosa Fase de latencia para consumir lactosa Consumo de lactosa Crecimiento diáuxico es el desarrollo del microorganismos sobre dos fuentes de energía presentes al mismo tiempo. Primero utiliza una de las fuentes, hasta agotarla, luego hay una pequeña latencia, posteriormente reinicia el crecimiento con la segunda fuente de energía