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Reglas para la solución de problemas
5 puntos clave para la solución de problemas
- REGLA del UNO (Método KISS) Cambiar o modificar solo un elemento a la vez.
- REGLA del DOS Un "problema" no existe hasta que ocurre por lo menos dos veces.
- PONERLO NUEVAMENTE Si cambia una pieza y no resuelve el problema, vuelva a colocar la parte original.
- TIRARLO A LA BASURA Si una pieza ha caducado o se ha roto, deséchela.
- TOMAR NOTA Cada sistema debe tener un libro de notas para registrar cualquier servicio y/o acción de mantenimiento. John W. Dolan, a contributing editor for LC-GC Magazine, ( LC-GC 6, 304 - 308, 1988)
Las 10 preguntas más importantes
- Mi presión está aumentando/disminuyendo en mi LC.
- Mi altura de pico está disminuyendo, pero la RT y el área son los mismos.
- Mi RT está cambiando más alto/más bajo, pero el área es la misma.
- Mi área de pico y altura están cambiando.
- Mi presión es fluctuante.
- Un pico extra está apareciendo en mi cromatograma.
- Tengo una línea de base irregular.
- Mi sistema se quedó fuera de la fase móvil durante el fin de semana.
- Estoy recibiendo un error de fuga.
- Mi LC no deja de comunicarse con mi computadora.
Mi altura de pico es decreciente, pero mi área y RT son
los mismos
Causa probable: Columna Lavar la columna según las instrucciones del fabricante. Si la cromatografía continúa degradándose, reemplace la columna. Si encuentra que tiene que reemplazar las columnas continuamente cada pocos meses, reevalúe su método. Es posible que necesite incorporar un paso de limpieza de muestra o instalar una columna de protección (Guarda Columna).
Mi RT está cambiando* más alto/más bajo, pero el área
es la misma
Causa probable: Bomba RT decreciente: bomba acuosa defectuosa (Bomba A) Purgar la bomba e intentar limpiar las válvulas de retención. Los consumibles probablemente necesitan ser reemplazados en una bomba acuosa. Compruebe si hay fugas y realice PM. Aumento de RT: bomba orgánica defectuosa (Bomba B) Purgar la bomba e intentar limpiar las válvulas de retención. Los consumibles probablemente necesitan ser reemplazados en una bomba orgánica. Compruebe si hay fugas y realice PM.
- Corrida a corrida la variación de RT de ± 0,02-0,05 min es normal, sin embargo, el comportamiento del método debe utilizarse para determinar lo que es una variación normal.
Mi presión está fluctuando ~ 150 psi HPLC
~ 400 psi UHPLC
Causa probable: Check Valves en la Bomba El aire está atrapado en las check valves y/o las check valves se pegan. Retire la cabeza de la bomba con las check valves unidas y sonique en isopropanol durante 15 minutos. Puede utilizar la función CONDITION (sólo en las bombas AD) para determinar qué lado de la bomba es problemático. Recuerde desgasificar regularmente las fases móviles. Utilice ACN de alta calidad (al menos grado HPLC). ACN de alta calidad tendrá niveles más bajos de impurezas y por lo tanto tendrá una longitud de onda de corte UV más baja. Menores impurezas forman una línea base más baja, una sensibilidad más alta y un límite de detección más bajo. Si todavía tiene problemas, reemplace las check valves.
Un pico extra está apareciendo en mi cromatograma
Causa probable: Autosampler o Columna Realizar inyecciones en blanco. ¿El pico extra es más ancho que sus vecinos? Si es así, el pico extra podría ser un eluter tardío de la corrida anterior. Ajuste los parámetros del método para asegurarse de que todos los picos se eluyeron de la columna durante la corrida. Si el área de pico extra disminuye significativamente con cada inyección subsiguiente, la contaminación se encuentra en el exterior de la aguja. Ajuste los parámetros de enjuague de la aguja. Realizar la enseñanza del puerto de inyección. Si el área de pico extra sigue siendo la misma después de varias inyecciones en blanco, la contaminación está dentro de la aguja/sample loop. Intente enjuagar la línea de flujo. Ajuste los parámetros internos de enjuague de la aguja (si es posible). Reemplace las piezas según sea necesario.
Mi sistema se quedó fuera de la fase móvil durante el fin
de semana
Causa probable: Houston, error en la Cabina! Desconecte el detector y retire la columna del sistema. Retire el aire de las tuberías de la bomba. Purge manualmente líneas seguidas de autopurga. Cambie a metanol 100% a bajo caudal antes de apagar la bomba. Vuelva a conectar la columna en sentido inverso. Flujo bajo (la mitad del flujo normal) durante 10 min o más para eliminar el aire y las partículas secas de la columna. Vea la línea de salida de la columna para asegurarse de que todo el aire es removido. Instale la columna en la dirección correcta del flujo y vuelva a conectar el detector. Vuelva a las condiciones iniciales de la fase móvil y ejecute hasta que alcance una línea de base estable.
Estoy recibiendo un error de fuga
Causa probable: Bombas, Autosampler, Horno, Detector Consulte el controlador o el software para localizar la fuga. Los sensores de fugas en las bombas, el automuestreador y los detectores son sensores eléctricos por lo que el líquido tiene que entrar en contacto con el sensor para producir un error. Sensor de fugas en el horno es el vapor sniffer. La presencia de vapor en el aire produce error. Si no se encuentra ninguna fuga y se sigue produciendo el error, aumente el umbral del sensor de fuga. Sensores de fugas pueden ser activados debido a cambios en las estaciones o el clima. Si detecta que debe continuar aumentando el umbral, el sensor puede estar defectuoso.
¡Sorpresa! Solución de problemas Sugerencia 11
- Tengo división de pico Causa probable: tubería, uniones y conexiones Todos los picos se dividen: Revise todas las conexiones de los tubos, ya que probablemente haya un vacío en las conexiones de los tubos. Un pico se divide: Repase el desarrollo del método, es probable que no tenga la separación adecuada de los componentes.
Referencias
Shimadzu Virtual Advisor https://prominenceva.ssi.shimadzu.com/ https://nexerava.ssi.shimadzu.com/ LC Resources http://www.lcresources.com/resources/reslinks.html ChromAcademy http://www.chromacademy.com/ LCGC http://www.chromatographyonline.com/ Separation Science http://www.sepscience.com/Techniques/LC Basic Liquid Chromatography (online textbook) http://hplc.chem.shu.edu/HPLC/index.html Introduction to Modern Liquid Chromatography, 3rd Edition Lloyd R. Snyder, Joseph J. Kirkland, John W. Dolan
