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Una práctica de laboratorio sobre las pruebas cualitativas para detectar la presencia y tipos de carbohidratos en muestras. Se explican las reacciones químicas de Molish, Benedict, Salliwanoff y Bial, y se muestran resultados para lactosa, glucosa, sacarosa, galactosa, fructosa, ribosa, almidón y arabinosa.
Tipo: Monografías, Ensayos
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Informe de la práctica de laboratorio de bioquímica N° 4 Miércoles – 08:00pm Presentado A: Qco. ANDY RHENALS AVILEZ UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA FACULTAD DE INGENIERIAS PROGRAMA DE INGENIERIA AMBIENTAL MONTERÍA, 08/ 06/ DE 2022
Los carbohidratos son uno de los grupos básicos de alimentos. Esta categoría de alimentos abarca azúcares, almidones y fibra. La principal función de los carbohidratos es suministrarle energía al cuerpo, especialmente al cerebro y al sistema nervioso. Una enzima llamada amilasa ayuda a descomponer los carbohidratos en glucosa (azúcar en la sangre), la cual le da energía al cuerpo. Los carbohidratos se clasifican como simples o complejos. Esta clasificación depende de la estructura química del alimento y de la rapidez con la cual se digiere y se absorbe el azúcar. Los carbohidratos simples tienen uno (simple) o dos (doble) azúcares, mientras que los carbohidratos complejos tienen tres o más. Los ejemplos de azúcares simples provenientes de alimentos abarcan: Fructosa (se encuentra en las frutas), galactosa (se encuentra en los productos lácteos). Los azúcares dobles abarcan: Lactosa (se encuentra en los productos lácteos), maltosa (se encuentra en ciertas verduras y en la cerveza), sacarosa (azúcar de mesa). Existen pruebas para determinar la presencia de carbohidratos o qué tipo de hidratos de carbono se manifiestan en una muestra problema; las pruebas para estos reconocimientos son: Prueba de molish : la reacción de molish es una reacción que presenta la propiedad de teñir cualquier carbohidrato presente en una disolución. Es la reacción cualitativa, por lo que no permite saber la cantidad de glúcidos en la solución original. *Prueba de Bial : Cuando se calientan las pentosas en ácido clorhídrico concentrado se forma furfural que se condensa con orcinol en presencia de iones férricos para dar un color verde azuloso Prueba de Selliwanoff: Esta prueba es específica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan más rápidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el resorcinol produciendo un complejo coloreado. Si el tiempo de ebullición se prolonga, puede dar también positivo para otros azúcares. Prueba para la sacarosa: La sacarosa es el único disacárido común no reductor y por lo tanto ese reduce en las soluciones alcalinas de cobre. Prueba de Benedict: Es otra de las reacciones de oxidación, que como conocemos, nos ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir, aquellos compuestos que presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la glucosa, lactosa o maltosa o celobiosa, en la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu
Estufa o calentador Pipetas de 5 y de 10ml Beakers de 100 y 400ml 10 tubos de ensayo Pinza para tubos de ensayo Gradilla Gotero Papel tornasol REACTIVOS: PROCEDIMIENTO
Fructosa Salliwanof f Rosado Positivo Arabinosa Salliwanof f No hubo cambio Negativo Glucosa Salliwanof f No hubo cambio Negativo PRUEBA BIAL: SOLUCIÓN PRUEBA COLORACIÓN RESULTADO Ribosa Bial Azul Positivo Arabinosa Bial No hubo cambio Negativo Almidón Bial No hubo cambio Negativo PRUEBA PARA POLISACARIDOS: SOLUCIÓN PRUEBA COLORACIÓN RESULTADO Almidón Polisacáridos Violeta Positivo PRUEBA PARA SACAROSA: SOLUCIÓN PRUEBA COLORACIÓN RESULTADO Sacarosa Benedict Rojo ladrillo Positivo Sacarosa Salliwanoff Rosado Positivo
PRUEBA DE MOLISH: En la reacción de Molish, agregamos el ácido sulfúrico concentrado a la muestras de lactosa, se presenta una deshidratación del glúcido en la interface, esto trae como consecuencia que se forme una anillo furfural, el cual está compuesto por un furán y un grupo aldehído, este a su vez reacciona con el alfa- naftol, estos descompone el carbohidrato presentándose una hidrolisis en los enlaces glucosídicos y al reaccionar con ácido sulfúrico se da la formación de dos capas, la primera capa que es producto del furfural, mientras la segunda que es producto del alfa-naftol que da como resultado una coloración morada, lo cual quiere decir que hay presencia de carbohidratos. PRUEBA DE BENEDICT: Esta ración dio positiva para la lactosa y glucosa porque en el medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído que tiene un OH libre que puede reaccionar con el ion cúprico en solución; en la sacarosa, no dan positivo puesto que sus OH anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico. PRUEBA DE BARFOED: Al realizar la prueba de Barfoed se obtiene como resultado que tanto la ribosa como la galactosa su reacción es positiva ya que al ser monosacáridos tienen la capacidad de reducir el cobre al someterse a calentamiento lo que va provocar que se forme un precipitado de color rojo ladrillo, lo cual indica la presencia de monosacáridos, Para el caso del almidón no se evidencio ningún cambio ya que por ser un polisacárido no tiene poder reductor al interactuar con el reactivo de Barfoed no puede reducir el cobre por lo tanto la prueba es negativa.
furfurales, como en este caso la fructosa va producir un 5-hidroximetilfurfural, que provoca a su vez la reacción con un difenol llamado resorcina o resorcinol que este contenido dentro del reactivo de Selliwanoff; este se condensa obteniendo como resultado la formación de un complejo rosado. PRUEBA PARA POLISACARIDOS: el color azul-negro de la solución que contiene almidón después de agregarle unas gotas de yodo y H2O, lo que indica la presencia de polisacáridos. posterior al calentamiento en donde el yodo acoplado químicamente con la estructura del almidón se libera de la estructura y produce el cambio de color amarillento, y al fondo un precipitado que son los iones de yodo disueltos en la solución. Luego cuando la solución se enfría nuevamente los iones de yodo vuelven a formar parte de la estructura del almidón, retornando así al color azul-violeta. Este proceso se debe a la fracción de la amilosa, el producto azul es un compuesto de inclusión, en el cual las moléculas de yodo entran en los espacios abiertos en el centro de una hélice de las unidades C6 que forman la molécula de amilosa. Al calentarse las hélices se alargan soltando al yodo cambiando de color y al enfriarse de nuevo las hélices se forman regresando el color azul-negro ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
Prueba de Benedict: Es otra de las reacciones de oxidación, capaces de reducir al cobre de manera más rápida y en condiciones menos drásticas. Por eso un buen manejo del pH y no dejar hidrolizar por mucho tiempo la muestra nos permite reacciones falsamente positivas, de nuevos grupos reductores. Prueba Bial : Prueba específica para las pentosas. Cuando se calientan las pentosas en ácido clorhídrico concentrado se forma furfural que se condensa con orcinol en presencia de iones férricos para dar un color verde azuloso. En palabras técnicas, Reacción del furfural e hidroximetil-furfural con orcinol en medio con HCl, dando lugar a derivados de color azul. Prueba Selliwanoff : Prueba Selliwanoff: Esta prueba está basada en el hecho de que, al calentar las cetosas son deshidratadas más rápido que las aldosas. Las cetosas en el carbono 2 tienen una función cetona, que en presencia de un ácido fuerte producen rápidamente derivados furfúricos que reaccionan con un difenol llamado resorcina que está contenido en el reactivo de Seliwanoff. La sacarosa (un disacárido formado por glucosa y fructosa) y la inulina (un polisacárido de la fructosa) dan positiva la reacción, ya que el HCl del reactivo provoca en caliente la especificamente al reconocimiento de azúcares reductores. En la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que precipita de la solución alcalina de un color rojo- naranja, y este precipitado se lo considera como la evidencia de que existe un azúcar reductor. Prueba de Barfoed: El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y únicamente puede ser reducido por monosacáridos. La reacción consiste en utilizar acetato cúprico y ácido acético en solución ácida con lo que los monosacáridos son hidrólisis del compuesto liberando fructosa (responsable de la reacción positiva). Prueba para Sacarosa: La sacarosa es el único disacárido común no reductor y por lo tanto ese reduce en las soluciones alcalinas de cobre. Además su poder no reductor se debe a que no posee carbonos anoméricos libres, por lo tanto carece de poder reductor. Por este motivo, se debe hidrolizar la Sacarosa. Este a su vez se hidroliza en solución ácida (en presencia de HCl y en caliente), e incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores resultantes.
carbohidratos. Glucogenosis : Son un conjunto de enfermedades metabólicas caracterizadas por un transtorno del metabolismo del glucogeno, se pueden clasificar según su fisiopatología: hepática hipoglucemica, muscular y peculiar( l al lX). La glucogenosis tipo 1 o enfermedad de Von gierke se debe a la deficiencia de la actividad glucosa 6 fosfatasa en el hepatocito. Sus manifestaciones metabólicas agudas son de tipo hipoglucemias asociadas a una acidosis láctica. Mucopolisacaridos is: son un tipo de enfermedad hereditaria, causadas por la ausencia o el mal funcionamiento de ciertas enzimas necesarias para el procesamiento de moléculas llamadas mucopolisacaridos. Intolerancia a la fructosa: es un trastorno por el cual una persona carece de la proteína necesaria para descomponer La diabetes es una enfermedad en la que los niveles de glucosa (azúcar) de la sangre están muy altos. La glucosa proviene de los alimentos que consume. La insulina es una hormona que ayuda a que la glucosa entre a las células para suministrarles energía. fructosa está es un azúcar de las frutas que se presenta en forma natural en el cuerpo.
