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Tipo: Apuntes
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Introducción. Cuando se realiza una observación en un microscopio óptico, se puede conocer el aumento al cual se está trabajando (aumento del objetivo x aumento del ocular), que es el aumento del sistema óptico del microscopio. Pero en muchas ocasiones es deseable determinar las dimensiones del objeto de estudio y es necesario calibrar el microscopio. Para ello es necesario un ocular micrométrico , que posee grabado en su interior una reglilla con unidades arbitrarias y un objeto micrométrico , que es un portaobjetos grabado con una reglilla de dimensiones conocidas. Al observar a través de un microscopio con estos dos aditamentos, se sobreponen las reglillas (ocular vs objeto) y se puede estimar la longitud de las marcas de la reglilla del ocular. Objetivo El alumno aprenderá a calibrar un microscopio óptico Material Microscopio de campo claro Ocular milimétrico Objeto milimétrico Preparación permanente Papel seda Aceite de inmersión Método. 1- Limpiar cuidadosamente el objeto y ocular milimétricos con el papel seda 2- Enfocar la preparación permanente y realizar una correcta iluminación con el objetivo de menor aumento.
3- Observe las indicaciones del objeto milimétrico; determiné la dimensión de la reglilla, el número de divisiones que posee, y por ello la longitud de cada división. 4-Sustituir la preparación permanente con el objeto milimétrico, centrarlo y enfocarlo. 5- Sustituir uno de los oculares por el ocular milimétrico, hacer coincidir el inicio de la reglilla del ocular milimétrico con el inicio de la reglilla del objeto milimétrico. 6- Observe las marcas que coinciden entre ambas reglillas. ¿Existen otras marcas que coinciden?, si es así, se tomará en cuenta para los cálculos la de mayor dimensión (longitud). 7- Determinar el número de divisiones de la reglilla del objeto milimétrico que coincide con la división del ocular milimétrico. Calcule la dimensión del total de divisiones de la reglilla del objeto milimétrico usado, por cada división del ocular milimétrico. 8- Se puede usar la siguiente formula: C= b/a donde C= factor de calibración; b= es el número de divisiones entre las marcas extremas del objeto milimétrico; a= es el número de divisiones entre las marcas extremas del ocular milimétrico. Por ello, el factor de calibración es un factor que al ser multiplicado por las dimensiones de la reglilla del objeto, nos dará la dimensión de la cada división del ocular milimétrico. por ejemplo: si la reglilla del objeto milimétrico es de 1 mm, y esta dividida en 10, cada dimensión es de entonces de 0.1mm; si al hacer los pasos 1 a 8 el factor de calibración es de 1.20, esto implica que cada división o marca de la reglilla del ocular será de 0.12 mm. 9- Realice el procedimiento 1 a 8 para cada objetivo del microscopio; ya que este cálculo no es necesario hacerlo cada vez, siempre y cuando se use el mismo microscopio (mismos objetivos, oculares y distancia del tubo del