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UTILIZACIÓN DEL MICROSCOPIO DE LUZ
Juan Sebastián Alvarez Reza (221127013) Katerine Fernanda Jaguandoy Criollo (221127019) Departamento de Recursos Hidrobiológicos, Facultad de Ciencias Pecuarias Ingeniería en Producción acuícola Universidad de Nariño-Sede Torobajo 2022 Introducción. En la actualidad, el campo de la microscopia ha avanzado enormemente y se han desarrollado diferentes tipos de microscopios, entre los cuales podemos encontrar el microscopio simple, el compuesto (invertido, de fluorescencia, de luz ultravioleta, luz polarizada, de contraste de bases de campo oscuro), el electrónico (transmisión y de barrido), entre otros (Gómez, G. F. 2018). Para poder aprovechar al máximo un microscopio óptico se debe conocer las partes del equipo, en estas partes podemos encontrar los tipos de lentes que se implementan, el tipo de iluminación usado, entre otros; pero no es suficiente saber el nombre de cada parte del microscopio, si no también conocer el uso de cada parte para así poder asociarlos y tener un máximo desempeño del equipo. Por otro lado, es necesario ilustrar y explicar a las personas que van a operar estos equipos para que estos puedan realizar un buen trabajo tanto de limpieza como de transporte y especialmente su uso, de esta manera los operarios o estudiantes desarrollaran un interés sobre el campo de la investigación microscópica. Objetivos. Identificar las partes del microscopio óptico y su función. Introducir al estudiante en el manejo adecuado del microscopio. Materiales y métodos. Materiales: Microscopio óptico Papel seda Aceite de inmersión Pinzas de disección Frasco con etanol 2 ml de azul de metileno al 0.2 % Bisturí Portaobjetos Cubreobjetos Palillos o hisopos
Cebolla Papel toalla Compás Marcador de vidrio Jabón antibacterial para lavado de manos Métodos: El primer método utilizado es un simulador virtual que sirve para aprender el funcionamiento del microscopio, en este simulador se observara el montaje en el objetivo 10X y 100X. Luego se observa el video suministrado por el docente en el que se observa detalladamente como se realiza un montaje húmedo. Procedimiento.
- Identifique la importancia del microscopio de campo claro en la investigación científica. R/ En el microscopio de campo claro la luz que emite la fuente de iluminación del microscopio es ópticamente conjugada con el plano de la muestra a través las lentes del colector y el condensador. Una vez que la luz interacciona con la muestra, la luz reemitida por ella se conjuga ópticamente con el plano del observador para formar la imagen muestra, empleando para ello el lente objetivo (llamada comúnmente objetivo) y la lente ocular (ocular). La imagen de la muestra en el plano del observador es magnificada y el grado de aumento es caracterizado por el factor de aumento total (MT) (ALTAMIRANO, M. A. G. 2015). Estos microscopios fueron los primeros en utilizarse para el estudio de la anatomía humana y animal. Gracias a ellos se conocen hoy en día los distintos tipos celulares y las organelas que los componen; Un microscopio para trabajo de rutina de campo claro es utilizado frecuentemente en el laboratorio, en la detección de enfermedades. Con ayuda del microscopio de fluorescencia se han podido detectar sustancias fluorescentes como algunas vitaminas (microscopiooptico 2020). Es de gran importancia porque gracias al sistema de iluminación simple, podemos observar áreas iluminadas y unas estructuras coloreadas. A través del microscopio óptico compuesto de campo claro se diferencian las partes de cualquier muestra teñida.
- ¿Qué importancia tiene realizar la iluminación de Kohler? R/ A diferencia de la iluminación crítica, forma 2 conjuntos de planos ópticamente conjugados C1 y C2 para iluminar homogéneamente el campo visual de la muestra sin que la imagen de la fuente interfiera con el plano de la muestra (S. Inoué, and R. J. Walter 1986).
Pantallazo 1 •Montaje de pescado blanco en estado de metafase. Aumento total: 1 00X Dibujo biológico Pantallazo 1 Componentes celulares observados: En la captura de pantalla realizado con un aumento de 100X se logra observar las células de pescado blanco en sus etapas de mitosis, se observa la membrana celular, también se observa el material genético y se ven las fibras de huso. Pantallazo 2: Montaje de pescado blanco en estado de metafase. Aumento total: 1000X Dibujo biológico pantallazo 2 Componentes celulares observados: En esta captura de pantalla realizado con un aumento de 1000X, se observa mas detalladamente la etapa de metafase de la célula, se logra observar como el material genético se ha condensado formando los cromosomas y estos se han alineado en la zona ecuatorial, se ven bien detallados las fibras o microtúbulos de huso, también se observan los polos que atraen a los cromosomas hijos.
Video tutorial.
- Montaje húmedo de la letra “E” Con la ayuda de una pinza se coloca el recorte de la letra en el centro del portaobjetos, en el sentido de lectura y se deposita una gota de agua con ayuda del gotero, posterior a esto se coloca el cubreobjetos (con ángulo de 45°). El montaje queda así: Si el montaje queda sin burbujas se procede a la observación. Primero se usa el objetivo de menor aumento y se enfoca con el tornillo macrométrico, luego se pasa al objetivo 10X y se enfoca con el tornillo micrométrico y finalmente se repite el proceso con el objetivo 40X.
Para desmontar la placa se debe de bajar la platina a su tope máximo y con ayuda del revólver se pone el objetivo de menor aumento y se abre la pinza y se retira la placa. Observación: en este montaje se logra ver los rastros de tinta impresos en la hoja de papel.
- Montaje húmedo de papel fotográfico. Con la ayuda de una pinza se coloca el recorte de papel fotográfico en el centro del portaobjetos, y se deposita una gota de agua con ayuda del gotero, posterior a esto se coloca el cubreobjetos (con ángulo de 45°). El montaje queda así: Si el montaje queda sin burbujas se procede a la observación. Primero se usa el objetivo de menor aumento y se enfoca con el tornillo micrométrico, luego se pasa al objetivo 10X y se enfoca con el tornillo micrométrico, finalmente, se repite el proceso con el objetivo 40X.
Pantallazo 6 papel fotográfico 40X Dibujo biológico Pantallazo 6 Pantallazo 7 papel fotográfico 100X Dibujo biológico Pantallazo 7
Pantallazo 9 células bucales. 40X Dibujo biológico Pantallazo 9 Pantallazo 10 células bucales 100X Dibujo biológico Pantallazo 10 Pantallazo 11 células bucales 400X Dibujo biológico Pantallazo 11
Para desmontar la placa se debe de bajar la platina a su tope máximo y con ayuda del revólver se pone el objetivo de menor aumento y se abre la pinza y se retira la placa. Observación: se observan a células bucales teñidas con azul de metileno, se logra ver el material genético y la membrana celular, en algunas células pareciera verse algunas organelas.
- Montaje de células de epidermis de cebolla. Con la ayuda de un bisturí se realiza un corte de la capa gruesa de la cebolla y se tomara la capa delgada, se coloca en el portaobjetos yse añade 1 gota de Lugol de gran y posterior a esto se coloca el cubreobjetos (con ángulo de 45°). Si el montaje queda sin burbujas se procede a la observación. Primero se usa el objetivo de menor aumento y se enfoca con el tornillo micrométrico, luego se pasa al objetivo 10X y se enfoca con el tornillo micrométrico, finalmente, se repite el proceso con el objetivo 40X.
Pantallazo 14 epidermis de cebolla. 400X Dibujo biológico Pantallazo 14 Para desmontar la placa se debe de bajar la platina a su tope máximo y con ayuda del revólver se pone el objetivo de menor aumento y se abre la pinza y se retira la placa. Observación: se observa cómo están organizadas las células formando el tejido de la epidermis de la cebolla, en estas células se identifica claramente la pared celular y los núcleos que contienen el material genético.
- Diga las diferencias y semejanzas que hay entre las células anímales y vegetales. R/ Semejanzas entre las células animales y vegetales Diferencias entre las células animales y vegetales Una de las principales semejanzas o similitudes entre estos dos tipos de células es que son las unidades morfológicas y funcionales básicas. Tanto las células vegetales como animales son células eucariotas. Las células eucariotas animales y vegetales, a diferencia de las células procariotas (bacterias y arqueas), poseen un núcleo celular organizado con una cubierta que los protege, orgánulos celulares, citoesqueleto (esqueleto celular) y un genoma organizado y empaquetado en Las células vegetales poseen una pared celular por fuera de la membrana plasmática. Esta pared les confiere una gran rigidez y está compuesta por celulosa, lignina, entre otros componentes. Las células animales no poseen esta pared celular. Algunos de los componentes de la pared celular vegetal poseen múltiples aplicaciones comerciales e industriales. La célula vegetal posee cloroplastos en su interior. Estos cloroplastos contienen pigmentos como la clorofila o el caroteno y permiten el proceso de la fotosíntesis. Muchos de estos pigmentos tienen aplicaciones comerciales o industriales. Las células
cromosomas, entre otras cosas. Aquí puedes descubrir más sobre la Diferencia entre célula eucariota y procariota. Están rodeadas por una membrana plasmática semipermeable que delimita el citoplasma. Tamaño que oscila entre 10 y 100 μm. Las células animales pueden alcanzar las 30 μm, mientras que las vegetales, las 100 μm una micra es una milésima parte de un milímetro). Dado su pequeño tamaño, no pueden ser observadas a simple vista y se requiere la ayuda de microscopios. animales no poseen cloroplastos. Aprende más sobre Qué es la fotosíntesis, su proceso e importancia con este otro post de EcologíaVerde. Las células vegetales tienen la capacidad de producir su propio alimento a partir de componentes inorgánicos mediante el fenómeno de la fotosíntesis, lo que se denomina nutrición autótrofa. Las células animales no poseen la capacidad de producir su propio alimento a partir de componentes inorgánicos, lo que se denomina nutrición heterótrofa. En la fotosíntesis, la célula vegetal es capaz de transformar en energía química la energía solar o luminosa. En las células animales, la energía es proporcionada por las mitocondrias. Las células vegetales poseen su citoplasma ocupado por grandes vacuolas en un 90% de su espacio, incluso a veces como una única vacuola de gran tamaño. Estas vacuolas sirven para almacenar productos del metabolismo y para eliminar productos de desecho. Mientras que las células animales poseen vacuolas, pero de pequeño tamaño y que no ocupan tanto espacio. Las células animales poseen un orgánulo llamado centrosoma (encargado de la separación de los cromosomas para dividirlas entre células hijas), mientras que las células vegetales, no. Las células vegetales suelen presentar una forma prismática mientras que las células animales pueden tener distintas formas.
- Al sustituir el objetivo de menor aumento por el de mayor aumento ¿cambia la posición de la imagen? ¿Por qué? R/ Si, ya que, al cambiar de un objetivo de menor aumento por uno de mayor aumento, la imagen que está ligeramente enfocada, gracias a que la mayoría de los microscopios son parafocales, se reducirá el campo visual ya que entre el objetivo sea de mayor aumento va a reducir el campo visual; cada vez que se cambie el objetivo por uno de mayor aumento se debe de enfocar levemente la imagen.
- Usando las condiciones el laboratorio virtual ¿se logró el objetivo de la práctica? ¿Por qué?
