¡Descarga Diagnóstico Microbiológico de la Meningitis Bacteriana: Un Estudio de Caso y más Apuntes en PDF de Microbiología solo en Docsity!
Universidad Nacional Autónoma de
México
Facultad de Estudios Superiores
“Zaragoza”
Carrera: Médico cirujano
Modulo: Sistema Nervioso y Órganos de los Sentidos
Microbiología – Laboratorio
Meningitis Bacteriana
Grupo: 1307 Dra. Verónica Torres Caballero Integrantes: Benito Victorino María Nataly (Introducción) Cruz Zepeda José Eduardo (Introducción) De Jesús Pérez Erika Jocelyn (Introducción) Diaz Sánchez Alba Lizeth (Objetivos, Material, Procedimiento, Conclusión) Flores Avila Luis Ramon (Introducción) Lorenzo Santos Pedro (Cuestionario Extra) Mendoza Ocampo Edgar (Resultados) Ortiz Avila Leonardo Uriel (Cuestionario del Manual) Rocha Arevalo Fabiola Yamilet (Análisis de resultados) Rodríguez Morales Yareli (Análisis de resultados)
OBJETIVO
Conocer las características morfológicas y de tinción, así como los métodos de cultivo e identificación de las principales bacterias causantes de meningitis bacteriana INTRODUCCIÓN La meningitis se define como un proceso inflamatorio agudo del sistema nervioso central causado por microorganismos que afectan las leptomeninges, los cuales incluyen bacterias, virus, hongos y parásitos. Un 80% ocurre en la infancia, especialmente en menores de 10 años. (1) La importancia de identificar el agente el etiológico influye en la elección precoz de la antibioticoterapia, y como resultado limita las complicaciones y secuelas. Se conoce la asociación de diferentes formas bacterianas con la edad del niño, la enfermedad de base que pueda padecer y su estado inmunitario (Cuadro 1). (1) Los tres agentes etiológicos bacterianos reportados con mayor frecuencia en la etapa pediátrica son S. pneumoniae, Neisseria meningitidis y Haemophilus influenzae tipo B, este último agente asociado con menor incidencia debido a la administración de vacuna conjugada contra Hib. (1) En el periodo neonatal predominan los microorganismos Gram negativos. (1) Al implementar la administración de la vacuna conjugada contra Hib, Streptococcus pneumoniae es el principal agente causal de meningitis bacteriana en niños que pasan el periodo neonatal. (1)
- Síndrome encefálico: Se reconocen alteraciones del estado de alerta, somnolencia, estupor, delirio o coma. Crisis convulsivas, irritabilidad e hipertonía. (1)
- Síndrome meníngeo: Rigidez de nuca, signo de Brudzinski y Kerning. (1)
- Síndrome de hipertensión endocraneal: Vómitos, cefalea, edema de papila, fontanela abombada, separación de suturas; estas dos últimas son más comunes en neonatos y lactantes. (1) La sospecha clínica de un proceso infeccioso en el sistema nervioso central nos obliga a realizar el análisis del líquido cefalorraquídeo (LCR) obtenido por punción lumbar, con determinación de: (1)
- Medición de la presión del líquido cefalorraquídeo. (1)
- Estudio citoquímico. (1) - Tinción de Gram. (1) - Cultivo. (1)
- Exámenes inmunológicos (coaglutinación o aglutinación de látex). (1)
- Determinación de reacción en cadena de polimerasa (PCR). (1) En el análisis del líquido cefalorraquídeo en meningitis bacteriana encontraremos aumento de la presión, aspecto turbio o purulento, aumento de la celularidad con pleocitosis a expensas de mononucleares en la etapa inicial del padecimiento, con variación en las primeras 24 horas a polimorfonucleares (Cuadro 2). (1) La muestra adecuada para el diagnóstico microbiológico de la meningitis es el LCR, que normalmente se obtiene mediante punción lumbar. La punción se realizará de ordinario en los espacios intervertebrales L3-L4 o L4-L5. El LCR se recogerá en tubos estériles, siempre que sea posible se obtendrán dos tubos, uno para análisis citoquímico y otro para estudio microbiológico, seleccionando siempre el más turbio para la realización de pruebas de diagnóstico microbiológico. (2)
Para el estudio de bacterias o virus habituales se necesita 1 ml en cada caso, y si además deben investigarse hongos o micobacterias es necesario disponer de 2 ml adicionales para cada uno de estos estudios, e idealmente llegar a los 10 ml en total. (2) Cuadro 2. Características de LCR. Una herramienta importante en la elección del tratamiento antibiótico es la tinción de Gram, que nos orienta acerca de la probable etiología. Encontrando una relación directa entre el número de bacterias y el porcentaje de identificación por tinción de Gram. (1) Además, podemos mencionar falsos negativos en la tinción de Gram por falta de penetración de los colorantes al encontrarnos ante una muestra con exceso de polimorfonucleares o bacterias; y falsos positivos por efecto de contaminantes en la tinción. (1) Debido al tipo de bacterias implicadas en la etiología de la meningitis, para el cultivo deben emplearse medios enriquecidos, como el agar sangre y el agar chocolate. (2) S. pneumoniae es un coco Gram positivo, encapsulado, lanceolado, que frecuentemente se presenta en cadenas rectas y cortas. En caldos tiene un
las cepas capsuladas son de mayor tamaño y de aspecto más mucoide, alcanzado los 3 mm. Presenta un olor característico. (4) Neisseria meningitidis. Se presentan como diplococos Gram negativos arriñonados. (5) N. meningitidis presenta una morfología macroscópica caracterizada por colonias de mayor tamaño que N. gonorrhoeae, convexas, lisas, borde entero, brillantes y grisáceas. (5) N. meningitidis crece tanto en agar sangre como agar chocolate, no así N. gonorrhoeae que crece sólo en agar chocolate en los aislamientos primarios. (5) Las cepas de Escherichia coli presentan un característico brillo metálico, en EMB agar (con Eosina y Azul de Metileno). Este medio es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativo de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de Enterobacteriaceae. (6) La piedra angular del diagnóstico la constituye la identificación microbiológica del agente, esto logrado a partir de la solicitud del cultivo de líquido cefalorraquídeo, que a la vez brinda apoyo terapéutico al momento de la elección del tratamiento antibiótico específico a partir del antibiograma. (1) El tratamiento se establece de manera empírica, tomando en cuenta la posible etiología para el grupo etario (Cuadro III) hasta la obtención del agente específico a partir del análisis del líquido cefalorraquídeo (LCR) y su cultivo. Una vez identificado el agente causal se puede determinar el tiempo que se recomienda mantener el tratamiento. (1) MATERIAL
- Asa bacteriológica.
- Microscopio.
- Juego de colorantes para tinción de Gram.
- Placa de Agar Sangre.
- Placa de Agar Chocolate.
- Placa de Agar EMB.
- Cepa de Escherichia coli.
- Cepa de Neisseria sp.
- Cepa de Streptococcus pneumoniae. PROCEDIMIENTO 1- Sembrar las cepas en las placas correspondientes por la técnica de estria cruzada. Reportar la morfología colonial a las 24 y 48 horas. 2- Realizar preparaciones y teñir con la técnica de Gram. Observar a 100X. **CUESTIONARIO
- ¿Cuál es el aspecto del líquido cefalorraquídeo que procede de una infección bacteriana?** En el análisis del líquido cefalorraquídeo en meningitis bacteriana encontraremos aumento de la presión, aspecto turbio o purulento. Referencia bibliográfica Robledo-Leija MR. Meningitis bacteriana. Evid Med Invest Salud 2013; 6 (1): 18-
2. ¿Cuántos tubos de muestra se extraen para el análisis del LCR? Justifique su respuesta. La muestra adecuada para el diagnóstico microbiológico de la meningitis es el LCR, que normalmente se obtiene mediante punción lumbar. La punción se realizará de ordinario en los espacios intervertebrales L3-L4 o L4-L5. El LCR se recogerá en tubos estériles, siempre que sea posible se obtendrán dos tubos, uno para análisis citoquímico y otro para estudio microbiológico, seleccionando siempre el más turbio para la realización de pruebas de diagnóstico microbiológico. Referencia bibliográfica
Presencia de leucocitos, linfocitos o polinucleares, glóbulos rojos, bacterias, restos de fibrina, células neoplásicas y la presencia de sustancias extrañas introducidas en el LCR. La presencia de leucocitos provoca diferentes grados de turbidez que dependen, no sólo del número, sino también de la calidad de esos elementos. Referencia bibliográfica SEIMC [en línea]. España. Soc Esp Enf Inf Microbiol Clin; [citado 27 Agosto] Diagnóstico microbiológico de las infecciones del sistema nervioso central; [ pant]. Disponible en: https://n9.cl/5qzo
5. ¿Qué aspectos comprende el examen del LCR? Presión, aspecto, células, tipo de células, proteínas, lactosa, lactato, Ph. Referencia bibliográfica Robledo-Leija MR. Meningitis bacteriana. Evid Med Invest Salud 2013; 6 (1): 18-
RESULTADOS Agar Sangre Agar Chocolate Agar EMB Escherichia coli Se observa alfa hemolisis. No hay crecimiento. Colonias negro azuladas de brillo metálico. Neisseria sp Colonias convexas, lisas, bordes enteros, brillantes y Colonias convexas, lisas, bordes enteros, brillantes y Colonias del color del medio incoloras.
grisáceos. grisáceos. Streptococcus pneumoniae Se observa alfa hemolisis. Aspecto mucoide. No hay crecimiento. ANALISIS DE RESULTADOS Escherichia coli En el agar sangre se observa un halo de color verdoso alrededor de la colonia de estudio. Es debido a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina por el peróxido de hidrogeno generado por el microorganismo. En agar chocolate no hubo crecimiento notorio por que los eritrocitos se encuentran lisados para su crecimiento. En el EMB se formaron colonias de color negro azuladas de brillo metálico ya que son capaces de fermentar lactosa. Neisseria sp En agar sangre y agar chocolate se formaron colonias convexas, lisas, bordes enteros, brillantes y grisáceos, ya que no necesita de un medio enriquecido para su desarrollo. En agar EMB no hubo cambios en el medio porque es un microorganismo que no fermenta lactosa. Streptococcus pneumoniae En el agar sangre se observa un halo de color verdoso alrededor de la colonia de estudio. Es debido a la oxidación de la hemoglobina a metahemoglobina por el peróxido de hidrogeno generado por el microorganismo. En agar chocolate se observa un aspecto mucoide debido a su capsula. CONCLUSIONES El diagnóstico de laboratorio de las Meningitis Bacterianas a través de la tinción de Gram y los medios de cultivo resuelven el problema de la elección medicamentos antimicrobianos, pero aun así continúan los problemas terapéuticos. Las decisiones del manejo con respecto al momento de administración y la elección
CUESTIONARIO ADICIONAL
1- La presencia de Leucocitos Mononucleares se presenta en este tipo de Meningitis EXCEPTO. a) Vírica. b) Bacteriana. c) Tuberculosa. d) Criptocócica. Referencia bibliográfica SEIMC [en línea]. España. Soc Esp Enf Inf Microbiol Clin; [citado 27 Agosto] Diagnóstico microbiológico de las infecciones del sistema nervioso central; [ pant]. Disponible en: https://n9.cl/5qzo **2- Los valores de glucosa en la meningitis bacteriana tiene un intervalo
45 mg/dL.** a) Verdadero. b) Falso. Referencia bibliográfica SEIMC [en línea]. España. Soc Esp Enf Inf Microbiol Clin; [citado 27 Agosto] Diagnóstico microbiológico de las infecciones del sistema nervioso central; [ pant]. Disponible en: https://n9.cl/5qzo 3- El valor de proteínas en la meningitis bacteriana tiene un intervalo de 100-500 mg/dl. Referencia bibliográfica
SEIMC [en línea]. España. Soc Esp Enf Inf Microbiol Clin; [citado 27 Agosto] Diagnóstico microbiológico de las infecciones del sistema nervioso central; [ pant]. Disponible en: https://n9.cl/5qzo 4- Haemophilus influenzae requiere desde el punto de vista nutricional un medio complejo y factores de crecimiento que se encuentran en el medio: a) Agar Sangre. b) Agar McCONKEY. c) Agar Chocolate. d) Agar Sabouraud. Referencias bibliográficas Sakurada A. Haemophilus influenzae. Rev Chilena Infectol 2013; 30 (6): 661-662. 5- Neisseria meningitidis crece tanto en agar sangre como agar chocolate. a) Verdadero. b) Falso. Referencias bibliográficas Instituto de Higiene [en línea]. Uruguay. Uni Rep Mateos [citado 27 Agosto 2020] Gram negativas exigentes: Aspectos prácticos; [3 pant]. Disponible: https://n9.cl/0kx2e 6- Tipo de hemolisis que genera el Streptococcus pneumoniae en medio agar sangre. a) Alfa. b) Beta. c) Gamma. d) Doble hemolisis. Referencia bibliográfica
Instituto de Higiene [en línea]. Uruguay. Uni Rep Mateos [citado 27 Agosto 2020] Gram negativas exigentes: Aspectos prácticos; [3 pant]. Disponible: https://n9.cl/0kx2e Sakurada A. Haemophilus influenzae. Rev Chilena Infectol 2013; 30 (6): 661-662. 10-En EMB agar (con Eosina y Azul de Metileno) es un medio donde pueden desarrollarse los siguientes microorganismos EXCEPTO. a) Neisseria meningitidis. b) Haemophilus influenzae tipo B. c) Escherichia coli. d) Streptococcus pneumoniae. Referencia bibliográfica: BRITANIA [en línea]. Argentina: Britania Lab; [citado 28 Agosto 2020] EMB agar (con Eosina y Azul de Metileno); [2 pant.]. Disponible en: https://n9.cl/b
