Docsity
Docsity

Prepara tus exámenes
Prepara tus exámenes

Prepara tus exámenes y mejora tus resultados gracias a la gran cantidad de recursos disponibles en Docsity


Consigue puntos base para descargar
Consigue puntos base para descargar

Gana puntos ayudando a otros estudiantes o consíguelos activando un Plan Premium


Orientación Universidad
Orientación Universidad


Microbiologia CCAA UAB, Apuntes de Microbiología

Microbiologia 1r CCAA UAB. Molt útils i sintetitzats

Tipo: Apuntes

2018/2019

Subido el 16/01/2019

johnnybgoode
johnnybgoode 🇪🇸

4.3

(9)

8 documentos

1 / 65

Toggle sidebar

Esta página no es visible en la vista previa

¡No te pierdas las partes importantes!

bg1
1
HISTÒRIA DE LA MICROBIOLOGIA:
Va tenir un inici imprecís. Al principi se sabia que els aliments es podrien, caducaven, etc. També se sabien fer
fermentacions. Però no se sabia a què era degut. No es coneixien els microorganismes.
Mètodes de conservació dels aliments: Accidentals (llavors):
Dessecació solar
Salat
Fumat
Congelació
Els llevats s’utilitzaven per a preparar aliments i begudes, com el pa, la cervesa, el vi, el sake… No se sabia que la
producció d’aquests aliments era deguda als llevats.
DESCOBRINT ELS MICROORGANISMES:
Antonie van Leewenhoek (1632-1723)
Era un fabricant de teles que tenia com a hobby fabricar uns microscopis simples d’una sola lent, de 266A. Amb un
d’aquests microscopis va observar per primer cop els microorganismes, mirant en una gota d’aigua, l’any 1674. Els va
anomenar animàlculs. Es considera que la microbiologia va tenir el seu tret de sortida quan va realitzar una publicació a
la Royal Society (a la qual va ingressar) l’any 1674. Va ser un detractor de la teoria de la generació espontània.
Robert Hooke (1635-1703)
Amb un microscopi compost d’entre 300 i 600 A, i examinant una làmina de suro, va observar per primer cop les
cèl·lules vegetals, les quals va anomenar cel·les degut a la forma característica de cel·les de rusc que tenien.
Posteriorment el nom va evolucionar a cèl·lules. Va publicar els seus descobriments al llibre Micrographía, l’any 1665, el
primer llibre de microbiologia de la història.
També va descriure els fongs filamentosos.
Se li atribueix la llei de Hooke de l’elasticitat, és plausible que ell tingués la primera idea sobre la teoria de la gravetat, va
descriure per primer cop Urà, va inventar el baròmetre, l’higròmetre i l’anemòmetre...
TEORIES SOBRE LA GENERACIÓ DE LA VIDA (150 anys de durada, segona meitat del segle XIX):
Dues teories predominants:
Teoria de la generació espontània abiogènesi
Teoria de les malalties infeccioses
Teoria de la generació espontània:
Tot ésser viu prové d’un altre ésser viu anterior o de la matèria inerta sota unes determinades condicions.
Va ser defensada inicialment per Aristòtil.
Es pensava que el Sol o la calor infonien vida a les molècules que eren inanimades, i que hi havia alguna cosa
generadora de vida a l’aire que varen anomenar principi vital. Així es creia també que molts d’insectes procedien de la
rosada que queia sobre les fulles.
Jan van Helmont creia que les puces, les paparres, els polls, els cucs i els ratolins naixien de les nostres entranyes i
excrements. Fins i tot tenia una recepta per generar ratolins que confirmava la seva hipòtesi: havia de posar roba
interior suada de dona conjuntament amb blat dins un recipient gran, després de 21 dies el blat es convertia en ratolins
perfectament normals.
Francesco Redi va demostrar la falsedat de la teoria amb aquest experiment:
Va posar diferents tipus de carn (de serp, de peix i de vedella) en diferents pots. Uns els va deixar completament oberts i
els altres els va tancar hermèticament:
Als pots que estaven oberts havien aparegut cucs i mosques que entraven i sortien.
Als pots tancats no havia ni cucs ni mosques encara que la carn estava podrida i feia mala olor.
Va deduir que els cucs s’originaven de les mosques, qüestionant per tant la teoria de la generació espontània. Els
seguidors d’aquesta teoria li varen recriminar que amb això no es demostrava res, ja que perquè es generés qualque
tipus de vida feia falta que entrés l’aire i que actués el principi vital, cosa que no ocorria en els pots tancats
hermèticament.
pf3
pf4
pf5
pf8
pf9
pfa
pfd
pfe
pff
pf12
pf13
pf14
pf15
pf16
pf17
pf18
pf19
pf1a
pf1b
pf1c
pf1d
pf1e
pf1f
pf20
pf21
pf22
pf23
pf24
pf25
pf26
pf27
pf28
pf29
pf2a
pf2b
pf2c
pf2d
pf2e
pf2f
pf30
pf31
pf32
pf33
pf34
pf35
pf36
pf37
pf38
pf39
pf3a
pf3b
pf3c
pf3d
pf3e
pf3f
pf40
pf41

Vista previa parcial del texto

¡Descarga Microbiologia CCAA UAB y más Apuntes en PDF de Microbiología solo en Docsity!

HISTÒRIA DE LA MICROBIOLOGIA:

Va tenir un inici imprecís. Al principi se sabia que els aliments es podrien, caducaven, etc. També se sabien fer fermentacions. Però no se sabia a què era degut. No es coneixien els microorganismes. Mètodes de conservació dels aliments: Accidentals (llavors):  Dessecació solar  Salat  Fumat  Congelació Els llevats s’utilitzaven per a preparar aliments i begudes, com el pa, la cervesa, el vi, el sake… No se sabia que la producció d’aquests aliments era deguda als llevats. DESCOBRINT ELS MICROORGANISMES: Antonie van Leewenhoek ( 1632 - 1723) Era un fabricant de teles que tenia com a hobby fabricar uns microscopis simples d’una sola lent, de 266A. Amb un d’aquests microscopis va observar per primer cop els microorganismes, mirant en una gota d’aigua, l’any 1674. Els va anomenar animàlculs. Es considera que la microbiologia va tenir el seu tret de sortida quan va realitzar una publicació a la Royal Society (a la qual va ingressar) l’any 1674. Va ser un detractor de la teoria de la generació espontània. Robert Hooke (1635-1703) Amb un microscopi compost d’entre 300 i 600 A, i examinant una làmina de suro, va observar per primer cop les cèl·lules vegetals, les quals va anomenar cel·les degut a la forma característica de cel·les de rusc que tenien. Posteriorment el nom va evolucionar a cèl·lules. Va publicar els seus descobriments al llibre Micrographía , l’any 1665, el primer llibre de microbiologia de la història. També va descriure els fongs filamentosos. Se li atribueix la llei de Hooke de l’elasticitat, és plausible que ell tingués la primera idea sobre la teoria de la gravetat, va descriure per primer cop Urà, va inventar el baròmetre, l’higròmetre i l’anemòmetre... TEORIES SOBRE LA GENERACIÓ DE LA VIDA (150 anys de durada, segona meitat del segle XIX): Dues teories predominants:  Teoria de la generació espontània  abiogènesi  Teoria de les malalties infeccioses Teoria de la generació espontània: Tot ésser viu prové d’un altre ésser viu anterior o de la matèria inerta sota unes determinades condicions. Va ser defensada inicialment per Aristòtil. Es pensava que el Sol o la calor infonien vida a les molècules que eren inanimades, i que hi havia alguna cosa generadora de vida a l’aire que varen anomenar principi vital. Així es creia també que molts d’insectes procedien de la rosada que queia sobre les fulles. Jan van Helmont creia que les puces, les paparres, els polls, els cucs i els ratolins naixien de les nostres entranyes i excrements. Fins i tot tenia una recepta per generar ratolins que confirmava la seva hipòtesi: havia de posar roba interior suada de dona conjuntament amb blat dins un recipient gran, després de 21 dies el blat es convertia en ratolins perfectament normals. Francesco Redi  va demostrar la falsedat de la teoria amb aquest experiment: Va posar diferents tipus de carn (de serp, de peix i de vedella) en diferents pots. Uns els va deixar completament oberts i els altres els va tancar hermèticament:  Als pots que estaven oberts havien aparegut cucs i mosques que entraven i sortien.  Als pots tancats no havia ni cucs ni mosques encara que la carn estava podrida i feia mala olor. Va deduir que els cucs s’originaven de les mosques, qüestionant per tant la teoria de la generació espontània. Els seguidors d’aquesta teoria li varen recriminar que amb això no es demostrava res, ja que perquè es generés qualque tipus de vida feia falta que entrés l’aire i que actués el principi vital, cosa que no ocorria en els pots tancats hermèticament.

Redi va repetir l’experiment però no va tancar hermèticament els pots, sinó que els va tapar amb una gasa que deixava passar l’aire però no les mosques. Els resultats varen ser els mateixos que al experiment anterior, a més va observar que els cucs apareixien sobre la gasa que cobria els pots. L’aire no portava els cucs sinó que eren les mosques les que els feien aparèixer atretes per l’olor de la carn. Els insectes no naixien per generació espontània. John Needham: 1745  va fer un experiment per comprovar la teoria de la generació espontània: va estudiar les colònies de microorganismes de la carn. Va bullir carn per destruir els microorganismes. Ho va fer en un recipient no tancat hermèticament, que deixava passar l’aire, ja que ell creia que l’aire era essencial per a la creació de la vida. El resultat va ser que quan va examinar les mostres va veure que hi havia colònies  creia que era degut a que la vida sorgeix de la matèria morta, tal com suggeria la teoria de la generació espontània. Lazzaro Spallanzani: 1769  refuta l’experiment de Needham. Fa el mateix que ell però segellant bé els recipients i prolongant el període de cocció. No s’hi forma cap colònia, posteriorment. Needham va al·legar que l’experiment de l’italià va destruir l’esperit vital de les coses. Però Spallanzani va demostrar altre cop que Needham estava equivocat, obrint altre cop els recipients dels quals suposadament n’havia destruït l’esperit vital, i va observar que s’hi tornaven a formar colònies de microorganismes. Louis Pasteur (1822-1895): famós per:  Investigar les malalties infeccioses humanes, especialment el carboncle i la ràbia.  Rebatiment de la teoria de la generació espontània  Estudis sobre la fermentació (alcohòlica i làctia)  la va atribuir als microorganismes.  Noves tècniques de conservació dels aliments (pasteurització).  Primeres vacunacions antiràbiques  Teoria microbiana  inspirà mesures d’asèpsia i antisèpsia que salvaren moltes vides. Rebatiment de la teoria de la generació espontània: Va fer el següent experiment:

Postulats originals:

  1. El microorganisme en qüestió ha d’estar present en tots els pacients que tinguin aquesta malaltia. La seva distribució pel cos s’ha de correspondre amb les lesions observades.
  2. El microorganisme no ha d’aparèixer en una altra malaltia de forma fortuïta o sapròfita (un sapròfit és aquell ésser viu que s’alimenta de matèria orgànica en descomposició).  així es demostra que aquell bacteri no es troba en el cos del malalt de forma sapròfita. Si fos sapròfit, no seria el causant de la malaltia.<
  3. El microorganisme ha d’aïllar-se de la persona infectada i se n’ha d’obtenir un cultiu pur.
  4. El cultiu pur ha de mantenir la capacitat de produir la malaltia.
  5. El microorganisme a estudiar ha d’aïllar-se en un cultiu pur a partir de l’animal infectat intencionadament. Versió molecular dels postulats: per demostrar que un gen és el causant d’una malaltia.
  6. El gen ha d’estar present en els bacteris que causen la malaltia i no en bacteris no-virulents.
  7. La inactivació específica del gen o els gens associats a la virulència ha de portar a una pèrdua de patogenicitat o virulència.
  8. La introducció d’aquest gen en un bacteri no virulent ha de convertir aquest bacteri en un bacteri virulent.
  9. Ha de demostrar-se que el gen associat a la virulència és expressat pel bacteri quan aquest infecta un hoste. A més, el producte del gen ha de generar una resposta immunològica. Joseph Lister: va ser el primer metge en aplicar les teories de Pasteur a la cirurgia  va ser el primer en esterilitzar els instruments d’operació abans de cada intervenció (tècniques antisèptiques).

METODOLOGIES D’ESTUDI DELS AGENTS CAUSALS:

CULTIU DE MICROORGANISMES : proporcionar les condicions físiques, químiques i nutritives adequades a un grup de bacteris perquè pugui multiplicar el seu nombre de forma controlada. Tipus de medis:  Segons les característiques del medi: o Líquids o Sòlids  En funció de la disponibilitat de nutrients: o Continus o Discontinus  Segons si es coneix la composició química exacta del medi: o Definits  la composició química es coneix totalment o Indefinits  està format per extractes de materials complexos dels quals és impossible conèixer la composició química de forma exacta.  Segons els microorganismes que puguin créixer en ells: o Generals o Selectius  afavoreixen el creixement de certs microorganismes en detriment dels altres. Ex: medi SPS per a clostridis. o Diferencials  algun dels seus components permet diferenciar les colònies dels diferents tipus de microorganismes. o Selectiu-diferencials  selectius + diferencials. Ex: agar de MacConkey per identificar Escherichia coli. o Medis d’enriquiment  permeten aïllar un tipus determinat de microorganisme a partir d’una mescla de població mixta de mida gran. Medis de cultiu: microorganismes  necessiten CO 2 o carboni orgànic. Fórmula química elemental de qualsevol microorganisme: C 4 H 7 O 2 N  pot variar una mica en funció de la fase del microorganisme.  Carboni  50% del pes sec  Oxigen  32%  Nitrogen  14%  Fòsfor  3%  Sofre  1%  Altres elements traça  Fe, K, Mg, Mn, Co, Mb, Cu y Zn.

Aquests nutrients han d’estar presents en el medi en una forma assimilable pels microorganismes:  Carboni: o Orgànic o CO 2  en microorganismes fotosintètics  Nitrogen  NH^4 / NO^3 -^ / NO^2 -^ / Aminoàcids  Fòsfor  PO 43 -  Sofre  Aminoàcids sulfurats / SO 42 - De vegades cal afegir aminoàcids i/o vitamines al medi de cultiu. Els cultius es dissenyen en funció de la composició química del microorganisme que es vol estudiar. Colònia = 10^9 individus Mètodes d’aïllament: e ls bacteris tenen un creixement exponencial  és necessari molt poc temps per fer créixer una població. Només l’1% de les espècies de bacteris del sòl són cultivables. Entre el 0,1 i el 0,01% de les espècies de bacteris marins són cultivables. Existeixen procediments d’enriquiment del nombre de bacteris d’ambients naturals per a facilitar el seu aïllament. Ex. Columna de Winogradsky. Medis on fer créixer les poblacions:  Llesques de patata  Brous nutritius  Medis sòlids: o Gelatina o Sèrum o Sang coagulada o Agar  descobert el 1881 per Walter Hesse.  Etc Els cultius normalment s’estudien en plaques de Petri (Julius Richard Petri, 1887) Cultiu pur = cultiu axènic  aquell que només conté un tipus de microorganisme. Les tincions:

El material massa espès per a la diferenciació dels seus elements es pot diluir prèviament amb una solució salina estèril. Es posa un cobreobjectes sobre la mostra. Utilitat:  Detectar trofozoïts mòbils de paràsits intestinals  Detectar ous i quists d’altres paràsits, larves i cucs.  Hifes de fongs  Etc Tinció simple: examen microscòpic de les mostres lleugerament modificades. Un sol colorant  totes les cèl·lules es tenyeixen amb la mateixa tonalitat. Ex:  Hidròxid de potassi (KOH)  mostres de fongs. Digereix parcialment els components proteics de la cèl·lula hoste però no actua sobre la membrana del fong.  Tinta xinesa = nigrosina. Observar Cryptococcus.  no s’adhereix a la càpsula, i aquesta apareix com un halo blanc  Blau de metilè de Loeffler  observar leucòcits. Tinció diferencial: examen microscòpic de mostres clíniques molt modificades. Varis colorants combinats  les estructures cel·lulars es diferencien en funció dels colorants que s’hi queden fixats. Ex: tinció de Gram, tinció de Ziehl-Neelsen. La tinció de Gram:

  1. El frotis fixat amb calor es tenyeix un minut amb cristall violeta.
  2. Es neteja el frotis.
  3. Es cobreix amb una solució iodada durant un minut.
  4. Es torna a netejar amb aigua.
  5. Es decolora amb una mescla d’alcohol etílic i acetona.
  6. S’escorre.
  7. Es cobreix amb safranina o fucsina bàsica (color de contrast) durant 2 minuts.
  8. Es neteja un altre cop.
  9. S’asseca. Bacteris gram-positius: Paret gruixuda  diverses capes de peptidoglicà interconnectades + àcid teïcoic (un tipus d’àcid gras de 70-90 carbonis). 80-90% de les parets dels gram-positius són peptidoglicans. Bacteris gram-negatius: Paret prima només de peptidoglicà  rodejada amb una capa exterior de fosfolípids, lipopolisacàrids, lipoproteïnes. 10- 20% de peptidoglicans. Explicació del funcionament de la tinció de Gram:
  10. El colorant bàsic violeta cristall tenyeix TOTES les cèl·lules de blau. Cultius de més de 24 hores poden perdre l’habilitat de retenir el colorant violeta.
  11. S’aplica la solució iodada  l’I 2 entra a les cèl·lules i forma un complex insoluble en aigua amb el cristall violeta. Passa a totes les cèl·lules.
  12. Decoloració amb alcohol i acetona  el complex I 2 - Cristall violeta hi és soluble. Cryptococcus neoformans en una tinció amb tinta xinesa. BGN i llevadures en una tinció Gram.

a. Grampositius  no permeables al dissolvent, perquè aquest deshidrata la paret cel·lular i tanca els porus. No es decoloren. b. Gramnegatius  la mescla dissol la membrana exterior de la paret de la cèl·lula, al ser un solvent lipídic. També pot danyar la membrana citoplasmàtica a la que s’uneix el peptidoglicà  no poden retenir els complexos I 2 - Cristall violeta  es decoloren. La decoloració s’ha de fer amb poca aigua i amb el temps calculat. La majoria d’organismes no es comporten al 100% gramnegativament o grampositivament. Alguns es comporten d’una manera o d’una altra depenent de la situació.

  1. Coloració de contrast amb safranina o fucsina bàsica  coloren de color vermell les cèl·lules gramnegatives.

HISTÒRIA DE LA IMMUNOLOGIA:

Edward Jenner (1749-1823): va observar que els vaquers que havien passat la verola vacunal (de la vaca), una forma benigna de la verola, ja no eren atacats per la verola humana. 1796  va extreure líquid de les pústules d’una dona amb verola de vaca. La va inocular a un nen, i després a aquest mateix nen li va inocular la verola humana. No la va patir. Va publicar els resultats el 1798. Va postular el seu mètode com una forma d’eradicar la verola. Va remarcar la importància de realitzar estudis clínics de seguiment als pacients immunitzats. Louis Pasteur: 1880  mentre estudia la Pasteurella aviseptica , bacteri del còlera aviar, observa que els bacteris de cultius vells (pocs virulents) immunitzaven a les gallines a les quals els havia administrat aquests bacteris. Així va fer la primera vacuna de soca bacteriana dèbil. El terme vacuna el va encunyar Pasteur en honor a Jenner (verola vacunal  vacuna). Anys posteriors:  Va estudiar la Bacillus anthracis en les ovelles, i va obtenir una vacuna per l’àntrax (atenuava el bacteri escalfant-lo a 45°C).  Va estudiar la ràbia, de la qual es desconeixia el causant  va veure que es perdia virulència quan es mantenien durant un temps a l’aire extractes medul·lars d’animals infectats. En va fer vacunes. La va utilitzar per primer cop contra un nen que havia estat mossegat per un gos amb ràbia (1885). Molts altres tractaments amb èxit  fama. Teories que explicaven els descobriments de Pasteur:  Ilya Ilich Mechnikov (1845-1916)  ‘’Teoria dels fagòcits’’. Creia que els animals vacunats augmentaven la capacitat de fagocitar cada patogen. Prèviament havia observat que els patògens eren eliminats pels fagòcits humans i animals a través de la fagocitosi. Va complementar-ho afirmant que els fagòcits segregaven enzims anàlegs als ‘’ferments’’ digestius.  Emil von Behring (1854-1917) i Shibasaburo Kitasato (1856-1931)  van observar que el cos produeix antitoxines (anticossos) que neutralitzen les toxines de forma específica. Van veure que els sèrums amb antitoxines també immunitzaven. Paul Ehrlich va ser un pioner en l’obtenció de sèrums de cavall, i va dissenyar un assaig per a quantificar l’antitoxina present en aquesta. Al 1900 formula una explicació sobre la formació i l’especificitat dels anticossos, amb base química, la teoria de les cadenes laterals. Deia que els anticossos són unes estructures cel·lulars que quan es trobaven en excés en les cèl·lules són expulsades al medi. Deia que les cadenes laterals ‘’defensen’’ la cèl·lula dels patògens, i que si aquestes vencen, s’han ‘’entrenat’’ per vèncer més patògens (immunització). Jules Bordet va descobrir els complements dels anticossos. Va dissenyar un mètode de detecció d’anticossos basat en la fixació d’aquests complements. Conciliació de les dues teories: Almorth Wrigth y Stewart R. Douglas  1904  descobreixen les opsonines (anticossos dels sèrums dels animals immunitzats que augmenten la capacitat fagocítica dels leucòcits). Relaciona la presència d’anticossos amb la fagocitosi (ajunta les dues teories). Paul Ehrlich (1854-1915): Va descobrir el salvarsan (arsfenamina), per tractar la sífilis (quimioteràpia). Va realitzar un antisèrum per tractar la diftèria.

Sergei Winogradsky (1856-1953): estudia i aïlla bacteris del sòl i l’aigua:  Bacteris nitrificants (cicle N)  Bacteris del sofre (cicle S) Va descobrir la quimiosíntesi o quimiolitotròfia (oxidació de compostos inorgànics per obtenir energia) Va estudiar els bacteris anaerobis fixadors de nitrogen. Va dissenyar la columna de Winogradsky. L’ORIGEN MICROBIÀ DE DE LA VIDA: DISTINTIUS DE LA VIDA CEL·LULAR:  Metabolisme  cèl·lula = sistema obert (nutrients entren, es processen, i surten residus)  Reproducció  transformen el medi en noves cèl·lules  Diferenciació  formació de noves estructures cel·lulars  Comunicació entre cèl·lules  mitjançant substàncies  Moviment  poden tenir moviment propi  Evolució  les diferents espècies de cèl·lules evolucionen CLASSIFICACIÓ DELS ÉSSERS VIUS: Sistema de tres dominis de Carl Woese: Proposa que la vida està subdividida en 3 dominis, els quals diferencia a partir de la seqüenciació genètica.  Arqueobacteris o arqueus  procariotes (no tenen estructures membranals internes – ni nucli ni orgànuls-). Cicle evolutiu diferent als eubacteris.  Eubacteris o bacteris  procariotes.  Eucariotes  inclou els éssers vius unicel·lulars eucariotes i els pluricel·lulars. Arqueobacteris i eubacteris:  Unicel·lulars  Autosuficients  Vida independent Branques de la microbiologia:  Fisiologia microbiana  nutrició i metabolisme  Genètica microbiana  gens, variació genètica, herència  Bioquímica microbiana  enzims i reaccions químiques a les cèl·lules  Sistemàtica microbiana  classificació i nomenclatura  Virologia  virus i partícules víriques  Biologia molecular  àcids nucleics i proteïnes  Ecologia microbiana  diversitat, activitat en els ecosistemes, biogeoquímica  Genòmica  seqüenciació de genomes, anàlisis comparatius

Ubiqüitat = estan presents pertot arreu. Adaptabilitat. Poden produir toxines i/o espores  problemes per a la indústria alimentària. Espores = formacions bacterianes molt resistents que mantenen viu el bacteri en condicions ambientals adverses  perquè contenen l’ADN o ARN d’aquest bacteri. Eucariotes:  Algues: macroscòpiques o microscòpiques = pluricel·lulars o unicel·lulars. Macroscòpiques o pluricel·lulars: algues verdes, marrons i vermelles Fotosíntesi. Formen el fitoplàncton i la vegetació marina  són la producció primària dels ecosistemes. Algunes poden produir toxines. Algunes són paràsites. Contaminació aliments i aigua. Exemple de contaminació de l’aigua: les marees roges, provocades per la proliferació d’algues roges  causen una gran concentració de toxines en l’aigua.

MICROSCOPIA ELECTRÒNICA:

R = (1,22λ / 2n·senθ )  màxima = 0,2 μm On: - λ  longitud d’ona utilitzada

  • n  índex de refracció = relació entre la velocitat de la llum al buit i la seva velocitat en qualsevol altre material (aigua pura: 1,33: la llum viatja 1,33 cops mes a poc a poc en l’aigua que en el buit). TEM  explora la superfície de la imatge punt per punt SEM  examina una gran part de la mostra cada vegada. Fluorescència Làser confocal

MICROSCOPI ÒPTIC:

Augments: Resolució: Poder de resolució = distancia mínima amb la qual es poden visualitzar dos punts adjacents com a entitats separades. Límits de resolució:

  • Microscopi òptic = 200 μm
  • Microscopi electrònic = 0,2 μm Equació d’Abbé per al càlcul de la resolució: R = (0,5λ / n·senθ ) = (0,5λ/AN) On:
  • λ  longitud d’ona utilitzada
  • n  índex de refracció
  • AN = n·senθ  apertura numèrica  mesura de captació de la llum per una lent Contrast: Propietat de l’objecte estudiat (depèn de la llum transmesa per aquest objecte). Distància de treball Angle θ

Es basa en la química del genoma del virió, i en la polaritat de les cadenes d’àcids nucleics:  Segons el tipus de cèl·lula hoste: o Animals o Vegetals o Bacteriòfags Són els microorganismes que més abunden a la Terra. HISTÒRIA DEL DESCOBRIMENT DELS VIRUS:  1884  Pasteur (Ràbia)  1886  Mayer (descripció TMV)  1892  Ivanovski (toxina bacteriana)  1895  Beijerinck (entitat infecciosa més petita)  1935  Stanley (purificació i cristal·lització TMV)  1939  Primeres imatges microscòpia electrònica I: Virus dsDNA (ej., adenovirus , herpesvirus , poxvirus ) II: Virus ssDNA (ej., parvovirus ) III: Virus dsARN (ej., reovirus ) IV: Virus (+)ssRNA (ej., picornavirus , togavirus ) V: Virus (-)ssRNA (ej., Ortomixovirus , rabdovirus ) VI: Virus ssRNA-RT (ej., retrovirus ) VII: Virus dsDNA-RT (ej., hepadnavirus )

MORFOLOGIA, ESTRUCTURA I COMPOSICIÓ QUÍMICA DELS VIRUS:

Simetria: causada per l’envolta del virus, una membrana formada per una doble capa lipídica associada a glucoproteïnes que es projecten cap a l’exterior.  Helicoïdal. Forma allargada. Ex: virus del mosaic del tabac (TMV), de l’ebola. Vegetals.  Icosaèdrica: 20 cares. Forma gairebé esfèrica. Ex: virus de la poliomielitis, virus del papil·loma humà, rinovirus, herpesvirus, adenovirus… Animals.  Virus amb envolta: formats per una bicapa lipídica que prové de l’anterior cèl·lula hoste que conté proteïnes víriques. Aquest embolcall pot contenir virus icosaèdrics o helicoïdals. Animals i vegetals.

  1. L’última dissolució aplicada en una placa de Petri ha de permetre contar fàcilment el nombre de colònies presents en la placa, o sigui ha de tenir una densitat de bacteris molt petita. La sembra de les dissolucions es pot dur a terme en una mateixa placa de Petri  dividint aquesta placa en diverses parts, i aplicant a cadascuna d’elles una gota d’una de les dissolucions, sense repetir la dissolució. EL CICLE VÍRIC:
  2. Adsorció: els virus reconeixen mitjançant receptors de membrana les membranes de les cèl·lules hostes. Elevada especificitat virus-hoste. Si no hi ha receptors en la membrana, o aquest receptor ha estat alterat, la cèl·lula presenta resistència al virus. Si el virus té un embolcall, la cèl·lula hoste reconeix aquest embolcall i l’ atrapa.
  3. Penetració: a. Si el virus no té embolcall: els enzims vírics fan un forat a la membrana i el virus allibera els àcids nucleics vírics a l’interior de l’hoste. b. Si el virus té embolcall: aquest embolcall es fusiona amb la membrana de l’hoste, i s’allibera la partícula vírica a l’interior de la cèl·lula hoste. Després es desfà la càpsida mitjançant enzims vírics, i els àcids nucleics vírics queden alliberats a l’interior de la cèl·lula hoste. c. En els virus animals: la cèl·lula detecta el virus com una partícula nutritiva (el detecta com a substància benigna perquè l’embolcall dels virus animals està format per les mateixes substàncies que la membrana de les cèl·lules animals), i el fagocita. Mecanismes de defensa de l’hoste vers el virus:  Hoste: o No existència/alteració del receptor o Destrucció de l’àcid nucleic víric per enzims de restricció: (tallen àcid nucleic estrany, virus dsDNA) o Protecció àcid nucleic propi hoste (metilació)  Virus: o Modificació del genoma víric després de la replicació: metilació i/o glucosidació
  1. Multiplicació: síntesi d’àcids nucleics i proteïnes. La pròpia cèl·lula hoste fabrica les proteïnes víriques a partir de l’ADN o ARN víric que conté. Fabrica proteïnes primerenques (les de replicació) i després les tardanes (les de la coberta dels virus).
  2. Acoblament: les proteïnes víriques creades per la cèl·lula hoste envolten els àcids nucleics vírics que també han estat replicats per la cèl·lula. Es formen els virions.
  3. Alliberament Duració cicle víric: normalment s’alliberen al voltant de 100 virions.  Virus bacterians 20-60 min  Virus animals 8-40 hores El cicle que he explicat és el cicle lític. També existeix el cicle lisogènic, en el qual els àcids nucleics s’integren en l’ADN de l’hoste, que segueix viu i es pot anar reproduint i fent les funcions vitals fins que un factor desconegut activa l’ADN víric i es completa el cicle del virus. Existeixen substàncies antivíriques, algunes sintètiques i altres produïdes de forma natural. Ex. aciclovir, valaciclovir, famciclovir, granciclovir, cidofovir.  Inhibidors de la polimerasa vírica, de la transcriptasa inversa, de l’ARN víric, de l’ARN-polimerasa, de les proteases...  Bloquejadors de la decapsidació del virus  Inductors de les proteïnes que inhibeixen la replicació vírica TAXONOMIA: Sistema Universal de Taxonomia Vírica:  Ordre (-virales)  Família (-viridae)  Subfamília (-virinae)  Gènere (-virus)  Espècie ( )  Ús noms comuns (verola) Els membres d’una família poden tenir morfologia vírica, estructura del genoma i/o estratègies de replicació diferents. Criteris: tipus d’àcid nucleic, morfologia (simetria i presència o absència d’envolta lipídica), tipus d’hoste...