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Microscopía, Diapositivas de Histología

Información sobre la historia y funcionamiento del microscopio, así como los componentes que lo conforman y su importancia en la observación de objetos pequeños. Se explica el poder de resolución y la abertura numérica, y se detallan los tipos de objetivos y su uso. También se mencionan dos tipos de microscopios especiales: el de campo oscuro y el de contraste de fases.

Tipo: Diapositivas

2020/2021

A la venta desde 12/04/2023

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11/04/2023
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MICROSCOPÍA
Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ
MICROSCOPÍA
El ojo humano no logra distinguir objetos de menos de 50
micras de diámetro ni consigue resolver dos líneas
separadas por menos de 100 micras (es decir, las ve como
una sola línea).
MLMA
Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ
¿Qué es un microscopio?
Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ
La denominación de “microscopio” fue
dada por Johann Giovanni Faber.
(1570-1640).
Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ
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MICROSCOPÍA

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

MICROSCOPÍA

El ojo humano no logra distinguir objetos de menos de 50 micras de diámetro ni consigue resolver dos líneas separadas por menos de 100 micras (es decir, las ve como una sola línea). Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA

¿Qué es un microscopio?

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

 La denominación de “microscopio” fue

dada por Johann Giovanni Faber.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Historia  El microscopio se invento, hacia 1610 , por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses.La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los miembros de la "Accademia dei Lincei" una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA Historia  Las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopía aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA Historia

A mediados del siglo XVII un

comerciante holandés,

Leenwenhoek, utilizando

microscopios simples de

fabricación propia, describió

por primera vez protozoos,

bacterias, espermatozoides y

glóbulos rojos.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA HistoriaDurante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos. En 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener aumentos de 2000 x. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA

Microscopio estereoscópico  Instrumento que mediante la sobreposición de 2 imágenes planas, una por cada ojo, permite apreciar imágenes tridimensionales o volúmenes.  www.microscopeworld.com/images Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Microscopio de campo claro

 Microscopio óptico compuesto utilizado en la

mayoría de los laboratorios, que forma una

imagen a partir de un corte histológico

empleando luz visible.

 También se usan métodos de tinción, según las

necesidades, con el fin de aumentar los detalles

en la imagen.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA PARTES ÓPTICAS

 Espejo

 Condensador

 Objetivos

 Ocular

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA ESPEJO

 Tiene 2 caras:

◦ plana – para luz natural.

◦ cóncava --- para luz artificial.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

CONDENSADOR

 Sin él no sirve el

microscopio.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ CONDENSADOR Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ OBJETIVOS  Son los responsables del poder de resolución. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Poder de resolución Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ OCULAR  Aumenta la imagen. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

AUMENTOS TOTALES DE LA

IMAGEN OBSERVADA

Se calcula:

(aumentos objetivo) x (aumentos ocular)

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ PARTES MECÁNICAS

◦ Base o pie

◦ Brazo

◦ Platina

◦ Tubo o cabezal

◦ Revolver

◦ Pinzas

◦ Tornillos de desplazamiento vertical y horizontal

◦ Tornillo macrométrico y micrométrico.

◦ Diafragma

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA Platina Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MLMA Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

MICROSCOPIO DE CAMPO OBSCURO

 Fue creado en 1903.

 El efecto producido por este microscopio consiste

en un fondo obscuro (negro) sobre el cual se ven

los objetos intensamente iluminados.

 Se usa un condensador especial, y aquí la luz NO

entra al objetivo.

 USOS: para observar microorganismos sin teñir

en preparaciones húmedas. Los microorganismos

aparecen brillantes.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

  • La luz se dirige del condensador a la

muestra en ángulo oblicuo.

  • Solo la luz desviada o esparcida por el

espécimen entra al objetivo para formar

la imagen.

  • Visualizar objetos pequeños que refractan

una gran cantidad de luz incidente.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Condensador

 Ofrece una iluminación oblicua que realza

el contraste en especímenes que no

pueden ser observados de manera

adecuada con iluminación normal en

campo claro.

 El objeto se puede observar gracias a la

luz difractada por el mismo.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE

FASES

La muestra se ilumina de manera controlada por medio de un diafragma anular y de objetivos especiales de contraste de fase.Este sistema de iluminación controlada hace posible distinguir detalles estructurales que varían muy ligeramente en su densidad o índice de refracción.Fue inventado en 1932. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Diferencias entre Microscopio Optico

Convencional y Microscopio de Contraste de

Fases

El Microscopio de Contraste de Fases Contiene: ➢ Diafragma anular en el Condensador que consta de un anillo transparente con la parte central oscurecida y que forma un cono de luz hueco como el del microscopio de campo oscuro. ➢ Placa de Difracción ó Placa de Fase dentro del tubo del sistema de lentes objetivos, la cual consta de un anillo ranurado a manera de disco. ➢ Ocular similar al del microscopio de campo claro.  El contraste de fases se basa en las modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparación. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ La iluminación

 Con un cono hueco de luz, al igual que en

el microscopio en campo oscuro,.

 El cono de luz es mas estrecho.

 Contiene un dispositivo en forma de

anillo, que reduce la intensidad de la luz y

provoca un cambio de fase de un cuarto

de la longitud de onda.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ MICROSCOPIO DE LUZ UV

 La principal ventaja estriba en devolver la

absorción específica de varias sustancias visibles.

Como las radiaciones UV son invisibles, las

imágenes se hacen visibles por el registro sobre

una emulsión fotográfica.

 Su sistema óptico es de cuarzo o de fluorita.

 Útil para la observación de ácidos nucleícos,

vitamina A.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Microscopia Confocal Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ  La Microscopia Confocal permite el estudio de muestras orgánicas e inorgánicas que por su naturaleza fluorescen o que en su caso, estén marcadas con sustancias específicas para destacar rasgos de interés. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Componentes

 Líneas de láser de trabajo ( 405 nm-

633 nm).

 4 objetivos ( 10 x, 20 x, 40 x/oil y 63 x/oil)

 Lámpara de halógeno.

 Lámpara de vapor de mercurio para

fluorescencia.

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Condiciones  - Las muestras deben estar teñidas con fluoróforos.  - Las muestras son excitadas a una longitud de onda y fluorescen

emitiendo a una longitud

de onda mayor.  - Solo los haces de luz que pasan por el foco llegan al detector.  - Se observan planos. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

Aplicaciones  Estudio de estructuras y sustancias fotosensibles y autofluorescentes en biomateriales.  Estudio cualitativo y cuantitativo de tejidos vegetales y animales, así como de sus estructuras celulares.  Estudio de emulsiones de distinta complejidad y localización de microorganismos.  Estudio de muestras in vivo a lo largo de una secuencia temporal o para la colocalización de distintos marcadores en una región concreta. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ

 • Expresión y localización de moléculas en 2 o 3

dimensiones, permitiendo reconstrucciones

tridimensionales, tanto en cultivos celulares como

tejidos histológicos.

 • Estudios de colocalización de diferentes tipos de

moléculas, tales como proteínas, lípidos,

carbohidratos, etc.

 • Estudio de histoquímica, inmunología, rutas de

comunicación, inmunocitoquímica y expresión génica.

 • Hibridación in situ con sondas fluorescentes (FISH).

Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Referencias  Ross, Michael H., Kaye Gordon I. Y Médica Panamericana. Buenos Aires, ARGENTINA. 2005. Pawlina Wojciech. Histología: Texto y Atlas Color con Biología Celular y Molecular. 4ª. Ed. Editorial  Jesús Boya Vegue. Atlas de Histología y Organografía Microscópica. 3ª. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2011.  Leslie Gartner , James Hiatt. Atlas en Color de Histologia. 5ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2011.  Ulrich Welsch. Histologia. 2ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2009.  Aldo R. Panamericana. 2008. Eynard , Mirta A. Valentich , Roberto A. Rovasio. Histologia y Embriología del ser humano. 4ª. Ed. Ed. Editorial Médica  Wolfgang Kühnel. Atlas Color de Citología e Histología. 11ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2005.  Jacqueline H. Carr , Bernadette Rodak Atlas de Hematología Clínica. 3ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2010.  Real Academia Nacional de Medicina. Diccionario de Términos Médicos. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2012.  Angel Mejía. Diccionario de Labaoratorio Aplicado a la Clínica. 3ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana.2005.  Bruce Introducción a la Biología Celular. 3ª. Ed. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2011. Alberts , Dennis Bray , Karel Hopkin , Alexander Johnson , Julian Lewis , Martin Raff , Keith Roberts , Peter Walter.  Gartner, Leslie P. Histologia básica. Editorial Elsevier España. 2011.  Montuenga, L.; Esteban, F.J.; Calvo, Alfonso. Técnicas en Histología y Biología Celular. Editorial Elsevier España. 2009.  Stevens, A./Lowe, J.S. HISTOLOGIA HUMANA. 3ª. Ed. Editorial Elsevier. 2006.  Junqueira, L.C.; Carneiro, J. Histologia básica. 6ª. Ed. Editorial Masson. 2005.  Michael H. Ross (†) 2012. , Wojciech Pawlina, Todd. A. Barnash. ATLAS DE HISTOLOGIA DESCRIPTIVA. Editorial. Medica Panamericana.  Elke Lütjen-Drecoll, Johannes W. Rohen. ANATOMIA. Un vieje al interior del cuerpo humano. Editorial. Medica Panamericana.2012.  Vladimir Flores. Bases moleculares y celulares de la histogénesis, la morfogénesis y las alteraciones del desarrollo. Orient formación médica. Ed. Editorial Médica Panamericana. 2012. ada a la  Francisco Javier Calderón Montero. Fisiología Humana. Aplicación a la actividad física. Editorial. Medica Panamericana. 2012. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ Referencias  Gerard J. Tortora , Bryan Derrickson. Principios de anatomía y fisiología. 11ª. Edición. Editorial. Medica Panamericana. 2006.  Aldo R. Edición. Editorial Medica Panamericana. 2008. Eynard / Mirta A. Valentich /Roberto A. Rovasio. Histologia y Embriologia del ser humano. Bases celularfes y molecuolares. 4ª.  Di Fiore. Nuevo Atlas De Histologia Normal. Editorial Ateneo. 2006.  SEPULVEDA, JULIO. TEXTO ATLAS DE HISTOLOGIA BIOLOGIA CELULAR Y TISULAR. Editorial Mac Graw Hill, México. 2012.  FORTOUL. Histologia y biología celular. Editorial Mac Graw Hill, México. 2010. Dra. en C. MARÍA L. MUÑOZ