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Manejo del microscopio y observación de células bacterianas, Esquemas y mapas conceptuales de Humanidades y Ciencias Sociales

Humanidades y Ciencias Sociales

Este documento proporciona una guía detallada sobre el uso y manejo adecuado del microscopio óptico, incluyendo la identificación de sus partes y sistemas, así como el desarrollo de habilidades prácticas para su correcto funcionamiento. Además, se explica el procedimiento para la observación de células bacterianas y cianofitas, incluyendo la técnica de tinción gram, que permite diferenciar entre bacterias gram positivas y gram negativas. El documento abarca temas fundamentales de biología celular y molecular, como la estructura y composición de las paredes celulares bacterianas, la organización del material genético y la importancia de la resolución y el poder de aumento del microscopio en la observación de microorganismos. Esta información resulta valiosa para estudiantes de biología, microbiología y áreas afines, ya que les permitirá adquirir conocimientos y habilidades prácticas esenciales para el estudio y análisis de células procariotas.

Tipo: Esquemas y mapas conceptuales

2018/2019

Subido el 01/05/2024

evelyn-Tamara-24
evelyn-Tamara-24 🇵🇪

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¡No te pierdas las partes importantes!

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Biología Celular y Molecular 1
P5 BCyM up la.pmd
Práctica 5
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MANEJO DEL MICROSCOPIO Y OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS BACTERIANAS
I. COMPETENCIA:
• Identifica cada uno de las partes y sistemas que conforman el microscopio
• Desarrolla las habilidades para el manejo del microscopio
• Reconoce los cuidados que se debe tener en el uso del microscopio
• Reconoce las principales especies del reino mónera.
• Emplea adecuadamnete los procedimientos para realizar la tinción Gram.
II. FUNDAMENTACION:
El microscopio (de , micrós = pequeño y , scopéo = observar) es un instrumento que permite
observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el
primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene una o varias
lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que
investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía.
El conocimiento de las estructuras del ser vivo está basado casi totalmente en el estudio con el microscopio.
El microscopio óptico es un instrumento que permite la observación de objetos y detalles de estructuras tan
pequeñas que no podrían ser observadas a simple vista. Con él, nuestro grado de visibilidad se amplía en
cientos o miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Las principales
dificultades en la observación y estudio de estructuras biológicas son su reducido tamaño y su transparencia
a la luz visible. Dado que el microscopio permite superar estas dos dificultades, su uso y el conocimiento de
los principios y técnicas en microscopía, resultan fundamentales para el desarrollo de la investigación en
ciencias biológicas.
III. MATERIALES DEL LABORATORIO:
• Microscopio
• Láminas porta-objetos
• Láminas cubre-objetos
• Servilleta de algodón, sin almidonar
• Papel de seda
Ocular
Revólver
Objetivos
Tornillo
macrométrico
Tornillo
micrométrico
Diagrama
Fuente de luz
Condensador
Platina
Base
Brazo
Diafrag ma
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¡Descarga Manejo del microscopio y observación de células bacterianas y más Esquemas y mapas conceptuales en PDF de Humanidades y Ciencias Sociales solo en Docsity!

Biología Celular y Molecular 1 P5 BCyM upla.pmd Práctica 5

MANEJO DEL MICROSCOPIO Y OBSERVACIÓN DE

CÉLULAS BACTERIANAS

I. COMPETENCIA:

  • Identifica cada uno de las partes y sistemas que conforman el microscopio
  • Desarrolla las habilidades para el manejo del microscopio
  • Reconoce los cuidados que se debe tener en el uso del microscopio
  • Reconoce las principales especies del reino mónera.
  • Emplea adecuadamnete los procedimientos para realizar la tinción Gram. II. FUNDAMENTACION: El microscopio (de , micrós = pequeño y , scopéo = observar) es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía. El conocimiento de las estructuras del ser vivo está basado casi totalmente en el estudio con el microscopio. El microscopio óptico es un instrumento que permite la observación de objetos y detalles de estructuras tan pequeñas que no podrían ser observadas a simple vista. Con él, nuestro grado de visibilidad se amplía en cientos o miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Las principales dificultades en la observación y estudio de estructuras biológicas son su reducido tamaño y su transparencia a la luz visible. Dado que el microscopio permite superar estas dos dificultades, su uso y el conocimiento de los principios y técnicas en microscopía, resultan fundamentales para el desarrollo de la investigación en ciencias biológicas. III. MATERIALES DEL LABORATORIO:
  • Microscopio
  • Láminas porta-objetos
  • Láminas cubre-objetos
  • Servilleta de algodón, sin almidonar
  • Papel de seda Ocular Revólver Tornillo^ Objetivos macrométrico Tornillo micrométrico Diagrama Fuente de luz Condensador Platina Base Brazo Diafragma

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA:

4.1. El primer proceso será explicado por el docente por ello es necesario que prestes atención y anotes las características importante en tu libreta de apuntes. 4.2. Iniciamos por las partes del microscopía SISTEMA MECÁNICO : Comprende los siguientes dispositivos.

- Pie: Base que da soporte y estabilidad al microscopio. - Columna: Estructura que une el pie con la platina y el tubo. Sostiene además el condensador y el diafragma. - Platina: Superficie plana para sostener el porta objetos y el cubre-objetos que contienen a las preparaciones. - Tubo: Proporciona soporte a los lentes oculares y objetivos. - Tornillo macrométrico: Asociada a dos tomillos, permite el movimiento vertical del tubo o de la platina para obtener la distancia a la cual el objeto puede ser observado nítidamente; es decir, el enfoque preciso para el observador. - Tornillo micrométrico: Permite movimientos muy cortos en un ajuste fino del enfoque para lograr una observación precisa.

  • Revólver. Sistema giratorio relacionado con el tubo, que porta los lentes objetivos para diversos aumentos, pudiendo utilizarlos alternativamente.
  • Pinzas. Par de láminas rectangulares, situadas sobre la platina, para mantener al porta-objetos. SISTEMA ÓPTICO: Comprende los lentes oculares y los lentes objetivos. - Oculares: Lentes dispuestos en la parte superior del tubo cercano al ojo del observador. Su aumento puede ser de 6X, 10X y 15X.Siendo el más común 10X. - Objetivos: Son lentes de diferentes aumentos situados en el otro extremo del tubo, en el revólver. El de menor aumento es más corto (3.2X, 4X, 5X y 10X) y el de mayor aumento es más largo (40X y 44X). Puede existir además un objetivo de inmersión de 100 a 150 aumentos, es decir de 100X a 150X. SISTEMA DE ILUMINACIÓN:
  • Diafragma: Abertura que regula la cantidad de luz que ingresa hacia la preparación.
  • Condensador: Lente que concentra el haz luminoso hacia la preparación.
  • Espejo o luz incorporada: Proporciona la luz que llega hasta el objeto a estudiar y el sistema óptico del microscopio. Existe un espejo plano por un lado y cóncavo por el otro, para ser usados cuando se disponga de abundante o escasa luz, respectivamente. La luz incorporada corresponde a un foco de luz eléctrica adaptado en el lugar que ocupa el espejo. 4.3. Coloca el microscopio sobre tu mesa e identifica cada uno de las partes del sistema. 4.4. Realiza un esquema del microscopio y de cada uno de sus partes. Procura ser detallado en el esquema. 4.5. Explicar cuáles son las características de la visión con el microscopio: a) Grado de Aumento: Es la magnificación total que sufre la imagen del objeto debido al efecto de los lentes oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de veces que aumenta el lente ocular por el número de veces que aumenta el lente objetivo. Si el objetivo aumenta la imagen de un objeto 40 veces, esta al pasar por la lente ocular será nuevamente aumentada.

micrométrico para grandes desplazamientos, para ello está el tornillo macrométrico.

  • Cuando los tornillos macro y micrométrico se encuentren incorporados en un solo dispositivo, el ajuste fino se hace solo después de haber realizado el avance rápido de acercamiento a la preparación.
  • Antes de pasar al siguiente aumento verificar que la imagen a observar se encuentre en el centro del campo, hacer girar el revólver cambiando el lente objetivo hasta llegar al "tope" y accionar solamente el tornillo micrométrico hasta obtener la nueva imagen.
  • Para observar una muestra con el objetivo de inmersión, se coloca una gota de aceite de cedro encima de la lámina de la preparación antes de girar el revólver. Esto permite que la imagen se vea con nitidez para realizar la observación ya que este tipo de lentes requiere que el índice de refracción sea similar al del vidrio.
  • Terminada la observación, girar el revólver para colocar el objetivo de menor aumento en la primera posición de trabajo.
  • Retirar la preparación y dejar limpio el microscopio, secando la platina con cuidado.
  • Si usó el objetivo de inmersión, debe limpiarse inmediatamente después de su uso con ayuda del papel de lente. Quitar el grueso del aceite con una hoja, luego limpiar con una segunda impregnada en xylol o de preferencia alcohol isopropílico. Finalmente con una tercera, secar el lente. No usar cantidades excesivas de solvente pues pueden disolver el cemento de los componentes de los lentes.
  • Mantener cubierto o guardado el microscopio cuando no esté en uso.
  • En sitios con excesiva humedad ambiental deberá guardarse el microscopioen una campana de vidrio con un desecante como carbonato de calcio. V. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS BACTERIANAS Y CIANÓFITAS El reino mónera agrupa a los organismos conformados por células procarióticas, es decir bacterias, mycloplasmas, rickettsias, clamideas y las cianobacterias conocidas como algas verde-azuladas o cianofitas. Las cianobacterias a diferencias de las bactaerias patógenas, son microorganismos autotróficos que fijan el nitrógeno ambiental y realizan fotosíntesis. Su capacidad de formar grandes colonias nos permite identificarlo en el ambiente como el Nostoc sp que se observa en la práctica sin necesidad de ser sometido a la coloración Gram. Las células bacterianas son muy pequeñas, entre 1 y 10 micrómetros (m) de longitud, y solo pueden observarse con ayuda de un microscopio. Las bacterias son organismos procariotas, que carecen de núcleo verdadero, característica que las diferencia de las células vegetales y animales. El núcleo de las plantas y de los animales contiene el material genético en forma de ácido desoxirribonucleico (ADN). El material genético de la célula bacteriana está formado también por ADN (generalmente circular) pero se encuentra en una región densa que no está separada del resto del citoplasma por ninguna membrana. Muchas bacterias poseen también pequeñas moléculas de ADN circulares llamadas plásmidos, que llevan información genética, pero, la mayoría de las veces, no resultan esenciales en la reproducción. TINCIÓN GRAM Los fundamentos de la tinción Gram se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína).

5 P5 BCyM upla.pmd Ribosoma Mesosoma Plásmido (^) Flagelo Citoplasma Nucleoide Pelo ADN Membrana celular Cápsula Pared celular Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plásmatica exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglucano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a las diferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglucano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas. VI. MATERIALES Y EQUIPOS: MATERIALES:

  • Lámina portaobjeto
  • Lámina cubreobjeto
  • Gotero
  • Asa de Kohlle o de siembra
  • Mechero de Bunsen
  • Soporte para láminas REACTIVOS:
  • Alcohol metílico
  • Violeta genciana
  • Lugol
  • Safranina (Fucsina)
  • Azul de metileno MUESTRA BIOLÓGICA: Muestras de bacterias cuyas colonias han sido culltivadas en agar, las cianofitas pueden adquirirse con el nombre vulgar de 'cushuro'. EQUIPO: Microscopio óptico. VII. PROCEDIMIENTOS: TINCIÓN SIMPLE: 1º Colocar una gota de muestra en un portaobjeto.

7 P5 BCyM upla.pmd frasco del decolorante. Se van añadiendo cantidades suficientes del decolorante, hasta lograr que este salga totalmente transparente, es decir, hasta que ya no escurra más líquido azul.

6. Lavado y secado: Lavar con agua para quitar los residuos de decolorante y esperar que seque la lámina al aire libre o con la ayuda de la llama de un mechero de la forma anteriormente descrita. 7. Tinción de contraste: Una vez que la lámina ya secó, procedemos a teñir nuevamente, pero esta vez se va a utilizar un colorante de contraste como por ejemplo la safranina, dejar actuar durante 2 minutos. 8. Nuevo enjuague: Pasado el minuto correspondiente, se procede a enjuagar la lámina con agua, se escurre el agua sobrante y se seca en la forma anteriormente descrita. De esta manera, ya tendremos listo el frotis para su respectiva observación microscópica. Grafica los procedimientos y la respectiva observación en el microscopio. Muestra: ________________________ Aumento: ________________________ ¿De qué color se observan a las bacterias Gram positivas y Gram negativas? Rpta: ___________________________________________________________________________________ VIII. CUESTIONARIO:

  1. ¿Cuáles son las características de los organismos que pertenecen al reino mónera?
  2. Investiga. ¿Qué es la mureína?
  3. ¿Cuál es la diferencia entre una bacteria Gram positiva y Gram negativa?
  4. ¿Cuáles son los pasos que debes tener en cuenta para la observación de un objeto?
  5. ¿Debes tener en cuenta aplicar algún elemento químico para obtener resultados en una muestra? ¿por qué?