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Tincion Bacteriana: Las tinciones bacterianas facilitan notablemente el examen a microscopio y permiten identificar estructuras morfológicas. TINCIÓN DE GRAM: La mayor parte de las bacterias se clasifican por el método por el cual recibió su nombre, el histólogo Hans Christian Gram.
Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones
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El diagnóstico es la base de todo tratamiento para una patología en específico. Por lo tanto, a la hora de analizar las patologías causadas por un microorganismo, es esencial conocer su morfología, modo de infección y características. Es aquí, donde resalta el uso de técnicas de coloraciones en el laboratorio. En este caso, para el estudio de bacterias, se trata de determinar la composición de su pared celular (peptidiglucano o lipopolisacárido) donde ejercerán su función los antibióticos. Por ende, es importante conocer la práctica de la aplicación de tinción en el estudio de los microorganismos.
Las tinciones bacterianas facilitan notablemente el examen a microscopio y permiten identificar estructuras morfológicas. Por lo tanto, estas se dividen en coloraciones simples y/o compuestas.
Los materiales que se deben usar para elaborar la tinción de Gram son los siguientes:
Después de Tinción Color Violeta Color Rojo-Rosado COMPONENTES Y ESTRUCTURAS Peptidiglucano Capa gruesa Capa delgada Ácido Teicoico Presente Ausente Membrana Externa Ausente Presente Lipopolisacáridos Ausente Presente CARACTERÍSTICAS GENERALES Sensibles a Penicilina Más susceptibles Poco susceptibles Sensibilidad a Lisozimas Sí No
En el siguiente cuadro, se detallan las diferencias entre las paredes celulares:
Núcleo Sin membrana, con un solo cromosoma circular Con membrana, varios cromosomas ESTAFILOCOCOS
ESTREPTOCOCOS
Para la coloración de esporas, se deben seguir los siguientes pasos:
Los flagelos son apéndices filamentos muy largos y finos que le van a permitir a la bacteria desplazarse. Al ser estructuras muy finas no es posible visualizarlas en un microscopio óptico a simple vista por eso es necesario una tinción para flagelos
Las cápsulas son acumulación de material mucoso que rodean la pared celular de algunas bacterias. Las cápsulas se alteran con el color debido a su naturaleza glucídica, por lo cual en esta tinción no se realiza la fijación. Tienen un índice de refracción muy bajo por lo que se observan muy mal al microscopio óptico y además son muy difíciles de teñir. Por lo tanto, para visualizarla se utilizan colorantes que tiñen el fondo resaltando la cápsula. Para realizar esta técnica se siguen los siguientes pasos:
o Azul de metileno: 1 minuto. o Violeta de genciana: 30-45 segundos. o Cristal Violeta: 15 segundos. o Fuchsinas y safraninas: 1 minuto.
La tinta china no penetra la capsula, solo ennegrece el fondo, observándose halos blancos en un campo negro. El procedimiento para realizar una tinción china son los siguientes: Limpiar el portaobjeto con una torunda humedecida de alcohol etílico. Colocar una gota de tinta china. Hacer una suspensión de K. pneumoniae sobre la gota de colorante. Extender la suspensión sobre todo el portaobjeto Dejar secar y etiquetar la presentación
a) ¿Cuál es el paso critico en la coloración Gram?
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