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Funcionalidad, piezas, cuidado y utilidad del microscopio en el laboratorio
Tipo: Resúmenes
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Informe 3 de Laboratorio de Biología Celular Nombres: David E. Contreras, Santiago J. Trespalacios I. Objetivo Conocer sus piezas y su funcionalidad, así como el cuidado, desempeño y utilidad en el Laboratorio de Microbiología. II. Introduccion El microscopio es imprescindible en el Laboratorio de Biología celular para el análisis de la morfología y composición de los microorganismos, así como su actitud a diferentes colorantes, lo que junto con otros criterios, dejará su identificación, por consiguiente, es fundamental conocer su conveniente funcionamiento. Antonio van Leeuwenhoek, en 1676, enorme apasionado en pulir lentes que empleaba para analizar extensa variedad de materiales, es el primero en mirar bacterias y protozoarios en agua de lluvia, en infusiones distintas y en su sarro dental. La máxima amplificación que consiguió Leeuwenhoek en los diferentes microscopios que construyó ha sido de 300 diámetros. La perfección del moderno microscopio compuesto permite intensamente el análisis de la morfología de microorganismos y al menos de varias de las gigantes construcciones de la célula bacteriana. A fines del siglo XIX surgieron adelantos relevantes en Microscopía, período de monumental aumento en Microbiología. II. Conceptos básicos de microscopia MICROSCOPIO OPTICO Se utiliza para incrementar la medida de la imagen aparente de los objetos, lo que posibilita mirar los detalles estructurales de los microorganismos. El microscopio óptico normal que se utiliza para mirar bacterias y otros organismos celulares es un microscopio compuesto, el cual está provisto de una fuente luminosa, una lente condensadora de luz que la lidera hacia el objeto a mirar y 2 juegos de lentes que ayudan a la amplificación de la imagen. Por medio de la refracción o meditación de los relámpagos luminosos por medio de el sistema de lentes del microscopio, se forma la imagen del objeto, que es más grande que el objeto mismo, permitiendo el test de sus construcciones en detalle. AMPLIFICACION La capacidad amplificadora de un microscopio compuesto es el producto del crecimiento personal de los oculares y los lentes fines. Un microscopio típico que se utiliza en bacteriología tiene fines con poder de resolución de 10X, 40X y 100X y oculares de 10X, por lo que es capaz de amplificar la imagen de la muestra 100, 400 y 1000 veces. En un crecimiento de 1000X, las bacterias y microorganismos enormes tienen la posibilidad de visualizar realmente bien, sin embargo los virus y varios de los detalles finos de las construcciones bacterianas son imposibles de ver. PODER DE RESOLUCION La resolución se define como el espacio de máxima aproximación entre 2 aspectos en el cual todavía tienen la posibilidad de mirar evidentemente como 2 entidades independientes, o sea, es la distancia entre 2 entidades estructurales de
un objeto en la cual aún tienen la posibilidad de mirar como construcciones separadas en la imagen amplificada. El poder de resolución de un microscopio está individuo a la longitud de onda de la luz y a la propiedad de las lentes conocidas como la abertura numérica (AN). El límite del poder de resolución de un microscopio es alrededor igual a 0.61/AN que para un microscopio óptico es de cerca de 200 nm (nanómetros). A menor longitud de onda de la luz y AN de las lentes, va a ser mejor el poder de resolución del microscopio. Por consiguiente, está claro que el poder de resolución de los microscopios ópticos se encuentra restringido por AN que se obtenga de los sistemas de lentes y las longitudes de onda del espectro de luz visible. Abertura NUMERICA Esta expresión, que frecuenta abreviarse AN, sugiere la proporción de luz que entra en un objetivo a partir de un punto del campo del microscopio. Tal costo es de suma trascendencia, debido a que, como se comentó previamente, de él es dependiente el poder de Resolución, la propiedad de mayor relevancia de un objetivo. La AN de una lente es dependiente del índice de refracción (N) del medio que llena el espacio entre el objeto y la parte frontal del objetivo, y del ángulo (μ) de los) de los relámpagos de luz más oblicuos que logren entrar al objetivo. La fórmula para calcular la AN es: AN = N x sen μ) de los/ El aire tiene un índice de refracción de 1.0, que limita la resolución que se puede obtener, sin embargo se puede aumentar la AN poniendo aceite de inmersión entre el espécimen y el propósito, aumentando de esta forma el poder de resolución del microscopio. El aceite de inmersión tiene un índice de refracción de 1.5, lo cual se incrementa considerablemente la AN y esto optimización el poder de resolución del microscopio. TIPOS DE MICROSCOPIO Sencilla. Los primeros microscopios, construidos por Leeuwenhoek alrededor de 1675, eran primordiales, o sea, contenían sólo una lente o lupa. Compuesto. Tiene numerosas lentes combinadas, capaces de crear monumental crecimiento. Hay diversos aditamentos que usados en el microscopio óptico ordinario, incrementan mucho su rendimiento como herramienta de observación, p. ej. Microscopio en Campo Oscuro (Ultramicroscopio), Microscopio de Contraste de Etapas, Microscopio de Fluorescencia, Microscopio de Luz Ultravioleta, Microscopio de Interferencia, Microscopio de Contraste de Interferencia Diferencial de Nomarski. Microscopio Electrónico Existe además el Microscopio electrónico, que gracias a sus maneras para obtener imágenes claras de los objetos más diminutos, ha elaborado contribuciones de la más grande trascendencia, más que nada en el analisis de la constitución y ciclos vitales de los virus filtrables. El poder de resolución del microscopio electrónico es mucho más grande que el del microscopio óptico pudiéndose inclusive mirar construcciones moleculares como proteínas y ácidos nucleicos, sin embargo ya que los haces electrónicos tienen
Tornillos macrométrico y micrométrico: Sirven para enfocar, pudiendo que la muestra se vea nítida y clara, debido a que permiten subir y bajar todo el cuerpo humano del tubo junto con sus lentes y en microscopios modernos, junto con la platina. El tornillo micrométrico posibilita subir o bajar bastante sutilmente. Platina: Parte del microscopio donde se sitúa la muestra que será examinada. Pinzas de la Platina: Estas sirven para sujetar la muestra a analizar. Tornillos para mover la Platina: Dichos sirven para desplazar la muestra que está sobre la platina, hacia arriba, debajo, derecha o izquierda, hasta enfocar el campo adecuado. Fuente de Luz: Se encuentra colocada debajo del objeto; ésta emite la luz que pasa por el condensador, para después iluminar la preparación. Condensador: Antes de que la luz alcance la muestra en la platina, se condensa y enfoca a través de una gran lente condensadora que se halla bajo la platina. Diafragma: Sirve para controlar la luz a través del condensador. Objetivos: La función de éstos es delimitar el tamaño de la imagen: ¨Objetivo de pequeño aumento o "Seco débil": Útil para observar microorganismos grandes, p. ej. Protozoarios. Este objetivo está marcado con un “3” o “2/3”, que significa 2/3 de pulgada o 16 mm. También está marcado como 10X. Tiene una lente en el extremo mucho más grande que cualquiera de los otros objetivos. ¨Objetivo de gran aumento ó "Seco fuerte": Este se usa para el examen de microorganismos vivos suspendidos en gotas de agua u otros líquidos. Está marcada con “6” ó “1/6” que significa 1/6 de pulgada ó 4 mm. También está marcado como 45X ó 50X. La lente del extremo es de menor tamaño que la del seco débil. ¨Objetivo de inmersión en aceite: Este objetivo es indispensable para el examen de frotis teñidos de bacterias. La lente visible del extremo es mucho más corta que la de los objetivos secos. Este objetivo está marcado “oil inmer” o “homoginmer” que significa inmersión homogénea. También está marcado “1/12” (1/12 de pulgada, 1. mm, 1.8 mm) y con 97X ó 100X. Las marcas 10X, 45X y 97X con que suelen estar marcados los objetivos del microscopio corresponden a la potencia amplificadora, y las letras “N.A.”, a la apertura numérica. Mientras mayor sea la cifra “N.A.”, mayor será el detalle que revela el objetivo. Las cifras 16 mm, etc., en los objetivos, se refieren a lo que se llama distancia focal equivalente, o sea, nos da una idea de la distancia que deberá haber entre el extremo del objetivo y la muestra al enfocarse. Oculares: Son tubos cortos, cada uno con dos lentes. La función de éstos es amplificar la imagen del objeto formado por el objetivo. Los oculares están marcados “5X”, “10X”, etc. indicando que amplían la imagen del objetivo 5 veces, 10 veces, etc. derecha ó izquierda, hasta enfocar el campo correcto.
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