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La práctica de preparación de muestras biológicas para su estudio al microscopio óptico y electrónico de transmisión. Se detalla el proceso histológico básico, incluyendo la tinción con hematoxilina-eosina, en el departamento de biología celular, genética y fisiología. El texto explica los pasos necesarios para obtener cortes suficientemente finos y presenta el protocolo para realizar la tinción.
Tipo: Ejercicios
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Cuando se pretende estudiar una muestra biológica al microscopio óptico o electrónico de transmisión, es necesario tratarla para que se puedan obtener cortes lo suficientemente finos para que permitan que la luz del microscopio óptico o los electrones del microscopio electrónico de transmisión puedan atravesarla y nos posibiliten visualizar las estructuras celulares que la componen. Para alcanzar este fin, se deben seguir una serie de pasos que en conjunto denominamos etapas del proceso histológico, el cual se puede definir como el protocolo a seguir en el estudio de un determinado tejido, bien animal o vegetal, desde que el organismo está vivo hasta que la muestra se puede observar al microscopio.
La forma de realizar una preparación histológica para microscopía óptica o electrónica sigue prácticamente los mismos principios, aunque presentan algunas particularidades.
En esta práctica se tratarán los pasos básicos del proceso histológico para el procesamiento de una muestra de tejido animal y se realizará una tinción básica.
Departamento de Biología Celular, Genética y Fisiología Área de Biología Celular
La hematoxilina es un colorante básico que le da un color azulado a los componentes ácidos del tejido (acidófilo). La eosina es un colorante ácido que le da un color rosado a los componentes básicos del tejido (basófilo).
El protocolo a seguir para realizar esta tinción es el siguiente:
Disolvente natural 10min Alcohol etílico 100º 5 min Alcohol etílico 96º 5 min Alcohol etílico 70º 5 min Agua destilada 5 min Hematoxilina 1 min Alcohol etílico 96º + ác. acético 1 min Agua corriente 5 min Eosina 5 s Agua destilada 5 min Alcohol etílico 70º 5 min Alcohol etílico 96º 5 min Alcohol etílico 100º 5 min Xilol o disolvente natural 5 min Montaje con DPX
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