Práctica 1 de bioquímica
Cromatografía
NOMBRE: ISABEL MARÍA MARTÍNEZ BELMONTE
GRUPO: P8, EYF10
1. ¿De qué tipo es cada una de las resinas utilizadas en la práctica?
Durante la práctica se han utilizado dos tipos de resinas. Una resina es positiva, de intercambio
aniónico, mientras que la otra resina es negativa, de intercambio catiónico.
2. ¿Cómo se comporta el grupo ionizable del azul de bromotimol (ácido o base)?
El grupo ionizable del azul de bromotimol se comporta como ácido débil.
3. ¿A qué tipo de resina se une cada uno de los indicadores utilizados en la práctica? ¿Por
qué?
En primer lugar añadimos rojo de metilo a los indicadores (ambo indicadores se comportan como
aminoácidos). Tras añadir el rojo de metilo, se añade HCL. El resultado que obtenemos tras añadir
estas dos sustancias es que la matriz blanca (carga positiva) no retiene el metilo. Sin embargo, la
matriz marrón (carga negativa), sí retiene el rojo de metilo.
En la siguiente comprobación, añadimos NaOH y posteriormente el rojo de metilo y NaOH. El
resultado es que la matriz blanca es la que retiene el metilo y la matriz marrón no.
Llevamos a cabo los mismos pasos con el azul de bromotimol y HCL. El resultado es que las dos
matrices gotean color amarillo a PH ácido por lo que tiene carga neutra (ácido débil).
Por último, pasamos el PH a 14 utilizando NaOH. El resultado es que la matriz oscura no retiene el
colorante mientras que la matriz blanca si. Sigue actuando como un ácido débil.
4. Carga de una proteína con un pI = 5.0.
a. A pH = 3 : la carga es positiva
b. A pH = 5 : la carga es neutra
c. A pH = 9 : la carga es negativa
Justificación de la respuesta: cuando el PH está por encima del punto isoeléctrico, la carga será
negativa.
5. ¿A qué tipo de resina se podrá unir la proteína anterior a cada uno de esos pH?
1. En el primer experimento la carga es positiva por lo que solo sería posible que se
uniese a la resina negativa.
2. En el segundo experimento la carga es neutra por lo que no se podría unir a ninguna
resina.
