Métodos de Esterilización: Una Guía Completa para el Laboratorio, Apuntes de Organización y Gestión del laboratorio

¡Descarga Métodos de Esterilización: Una Guía Completa para el Laboratorio y más Apuntes en PDF de Organización y Gestión del laboratorio solo en Docsity!

John Querubín Franco Aguirre

 La esterilización es un proceso que pretende la muerte de todas las formas de vida microbiana: bacterias y sus esporas, hongos y virus. Este proceso es de gran importancia en el laboratorio para garantizar la no contaminación de materiales, instrumentos, soluciones y medios de cultivo con microorganismos indeseados.  Existen diferentes métodos para lograr la esterilidad de materiales y medios de cultivo; la selección de este dependerá de las características particulares del material.

 Esterilización química: se fundamenta en que algunas sustancias químicas tienen la capacidad de promover una o más reacciones químicas capaces de producir la muerte de los microorganismos. Al emplear este método se pueden usar agentes químicos gaseosos o no gaseosos.  Agentes Gaseosos  El óxido de etileno es un agente alquilante que se ha convertido en uno de los métodos de esterilización química más utilizados. Cuando se emplea este método se debe determinar cuidadosamente el tiempo de exposición a emplear ya que éste depende de factores como la temperatura, humedad, concentración del gas, la permeabilidad del material que recubre los instrumentos a esterilizar y el tipo de microorganismo a eliminar. Generalmente un período completo de esterilización tarda varias horas.

Ojo

ESTERILIZACION ≠ DESINFECCION: en este proceso se eliminan los agentes patógenos reconocidos, pero no necesariamente todas las formas de vida microbianas. Es un término relativo, donde existen diversos niveles de desinfección.(ej: hipoclorito de sodio, alcohol yodado, alcoholes y amonios).

 La esterilización por óxido de etileno se puede utilizar para esterilizar materiales sensibles al calor y la humedad, tales como materiales plásticos desechables (placas de Petri).Tiene buena capacidad de difusión y penetrabilidad.  Es muy tóxico para la piel, ojos y mucosas. Es inflamable, explosivo y carcinogénico. Los ciclos de esterilización son largos. Requiere aireación del material una vez esterilizado.  Temperatura de 37 ºC durante 5 – 5. 5 h (ciclo frío). ƒTemperatura de 55 ºC durante 2 - 4 h (ciclo caliente). ƒHumedad entre 40 - 70 %.

Radiaciones  Radiación ultravioleta: radiación con longitudes de onda entre 100 y 400 nm. Afectan a los ácidos nucleicos provocando errores en la duplicación y pérdida de viabilidad.  El tiempo de exposición varia de acuerdo con la intensidad de emisión y el tipo de microorganismos.  Tienen bajo poder de penetración: solo se utilizan para la esterilización de superficies (cámaras de bioseguridad, quirófanos, salas de envasado de medicamentos). Producen daños en ojos y piel.

RADIACIONES

 Radiaciones ionizantes : tienen mayor energía que las ultravioleta y por tanto mayor poder de penetración. Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucléicos, proteínas y otros componentes celulares. Se utilizan para la esterilización de materiales termosensibles como jeringas, sondas, suturas, guantes, etc. No se utilizan para medios de cultivo o soluciones porque producen alteraciones de los componentes. Solo se utiliza a escala industrial por el alto costo.

 Filtración : Método usado para la esterilización de líquidos termolábiles. Existen filtros de diferentes composiciones (polietersulfona, nylon, celulosa, etc). Estos filtros tienen poros uniformes que varían en tamaño entre 0 , 02 μm hasta 25 μm, los más utilizados son los de 0 , 22 μm de diámetro porque son capaces de retener hasta a las bacterias más pequeñas.  Se saturan rápidamente y la velocidad de filtración a través de ellos es lenta.  No es un método que como tal sea microbicida. https://www.youtube.com/watch?v=ggpzNduZz_

 Esterilización por calor seco: provoca desnaturalización de proteínas, oxidación de componentes celulares y efectos tóxicos por altas concentraciones de electrolitos debido a la deshidratación. Menos efectivo que el calor húmedo; por lo que requiere mayor tiempo de exposición.

Aire caliente  No es corrosivo para metales o instrumentos.  Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas ( aceites, glicerina) material quirúrgico y vidriería termorresistente.  Bajo poder de penetración.  Tiempos de exposición largos Temperatura Tiempo 160 °C 120 minutos 170 °C 60 minutos 180 °C 30 minutos

Incineración  Descarte inmediato de material cortopunzante (agujas)  Espectro de uso muy limitado

Ebullición  Temperatura a 100 °C, este proceso puede aplicarse a líquidos (medios de cultivo) o materiales de laboratorio y destruye las formas vegetativas de bacterias y hongos; no es efectivo contra esporas y virus.  El tiempo de esterilización por este método es de 20 a 30 min.

Autoclavado.  Este proceso asegura la esterilización completa por una combinación de temperatura elevada, presión ( 15 - 18 PSI) y tiempo ( 15 o 20 minutos). Asegura la destrucción de formas vegetativas, esporas y virus.  Esterilización de medios de cultivo y plásticos no termolábiles (puntas de micropipetas), volumétricos de vidrio y vidriería general de uso en el laboratorio.

 Controles físicos o mecánicos.  Controles químicos  Controles biológicos