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practica de tejidos animales, Guías, Proyectos, Investigaciones de Biología Celular

practica de laboratorio de tejidos animales

Tipo: Guías, Proyectos, Investigaciones

2018/2019

Subido el 08/12/2021

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TEJIDOS ANIMALES
Juan Manuel Padilla (1929610); Isabela Obregón (1925667); Maité Nahuel (1922183)
Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Programa Académico de Biología
18 de julio de 2019
1. Técnicas histológicas, cómo se procesa un tejido animal o corte con tinción de hematoxilina-eosina para su observación.
Para poder estudiar tejidos es necesario preparar las muestras de acuerdo a la finalidad de la observación. A continuación, describiremos de manera general la
técnica histológica.
Primero se debe obtener el tejido realizando una biopsia o autopsia, también se puede trabajar con el órgano o animal completo. Luego se procede a la fijación,
fundamental para conservar, lo mejor posible, las estructuras celulares y moleculares junto con las características que poseía el tejido vivo. Para la fijación se
pueden realizar procesos químicos o físicos. Lo más común es el uso de sustancias que preservan la muestra, si es un tejido se realiza la inmersión en la sustancia y
si es un órgano o animal completo se puede realizar la perfusión que no es más que la irrigación de la sustancia por el circuito sanguíneo. Después, se procede a la
inclusión que significa endurecer la muestra para poder obtener cortes finos. La inclusión se logra embebiendo la muestra en sustancias que polimerizan como la
resina o que se vuelven consistentes como la cera. Por último se obtienen los cortes en aparatos especiales como el microtomo que logran cortes muy finos. Con
los pasos ya mencionados se puede hacer la observación en el microscopio, sin embargo, es muy común seguir procesando la muestra con técnicas que permiten
visualizar diferentes características, una de ellas es la tinción, cuyo proceso se describe a continuación.
Las tinciones de hematoxilina eosina se utilizan sobre cortes de parafina, debido a las propiedades hidrosolubles de las sustancias de tinción que se utilizan, si el
tratamiento se aplica sobre cortes sin desparafinar y sin hidratar la coloración no se dará. Por un lado, la hematoxilina es un colorante básico, y la eosina es un
ácido, de esta manera estas teñirán de distintos colores las estructuras ácidas y básicas presentes en el corte.
Para la tinción correcta con estos dos colorantes se le aplican los siguientes procesos al corte:
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TEJIDOS ANIMALES

Juan Manuel Padilla (1929610); Isabela Obregón (1925667); Maité Nahuel (1922183) Universidad del Valle, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Programa Académico de Biología 18 de julio de 2019

1. Técnicas histológicas, cómo se procesa un tejido animal o corte con tinción de hematoxilina-eosina para su observación. Para poder estudiar tejidos es necesario preparar las muestras de acuerdo a la finalidad de la observación. A continuación, describiremos de manera general la técnica histológica. Primero se debe obtener el tejido realizando una biopsia o autopsia, también se puede trabajar con el órgano o animal completo. Luego se procede a la fijación, fundamental para conservar, lo mejor posible, las estructuras celulares y moleculares junto con las características que poseía el tejido vivo. Para la fijación se pueden realizar procesos químicos o físicos. Lo más común es el uso de sustancias que preservan la muestra, si es un tejido se realiza la inmersión en la sustancia y si es un órgano o animal completo se puede realizar la perfusión que no es más que la irrigación de la sustancia por el circuito sanguíneo. Después, se procede a la inclusión que significa endurecer la muestra para poder obtener cortes finos. La inclusión se logra embebiendo la muestra en sustancias que polimerizan como la resina o que se vuelven consistentes como la cera. Por último se obtienen los cortes en aparatos especiales como el microtomo que logran cortes muy finos. Con los pasos ya mencionados se puede hacer la observación en el microscopio, sin embargo, es muy común seguir procesando la muestra con técnicas que permiten visualizar diferentes características, una de ellas es la tinción, cuyo proceso se describe a continuación. Las tinciones de hematoxilina eosina se utilizan sobre cortes de parafina, debido a las propiedades hidrosolubles de las sustancias de tinción que se utilizan, si el tratamiento se aplica sobre cortes sin desparafinar y sin hidratar la coloración no se dará. Por un lado, la hematoxilina es un colorante básico, y la eosina es un ácido, de esta manera estas teñirán de distintos colores las estructuras ácidas y básicas presentes en el corte. Para la tinción correcta con estos dos colorantes se le aplican los siguientes procesos al corte:

2. Analizar tejidos que componen distintos órganos, sus características y relación con la función del tejido. Los órganos son estructuras compuestas de varios tejidos, que en conjunto cumplen una función. A su vez lo tejidos están compuestos por la unión de células que se relacionan. En un tejido se pueden encontrar distintos tipos de células especializadas, lo que quiere decir que tienen funciones específicas, pero entre si trabajan para desarrollar la función del tejido que componen. A continuación, se presentan tres órganos la piel, el intestino delgado y la tráquea, con sus respectivas histologías, sus capas y que tipo de tejidos las componen, al igual que características y la relación de estas tienen con la función del tejido y órgano en el que están presentes.

Capa 2 Dermis (ver anexo 3) Subcapas papilar Reticular Descripción Es la región superficial que tiene contacto con la membrana basal y dispone de receptores de tacto o presión llamados corpúsculos de Meissner y terminaciones nerviosas que determinan el dolo y la temperatura, principalmente constituida por tejido conjuntivo laxo conteniendo fibras proteicas compuestas por colágeno y elastina. Es la capa más profunda y de mayor grosor de la dermis, está compuesta por tejido conectivo denso irregular que contiene fibras de elastina y colágeno de tipo I en haces entrelazados. en los espacios entre fibras encontramos adipocitos, folículos pilosos, nervios, glándulas sebáceas y glándulas sudoríparas. Función Esta es la encargada de causar crestas y surcos en la epidermis, con un patrón genético determinado para cada individuo que puede apreciarse como líneas rectas o formación de espirales como sucede con los dedos, de esta forma dando lugar a las huellas dactilares. Es la encargado de proporcionarle a la piel la capacidad de estirarse y recuperar la forma inicial una vez terminado el estiramiento, en los desgarros pequeños que se dan en las fibras de la dermis durante un estiramiento extremado son inicialmente rojizos y luego se mantienen visibles como estrías blanquecinas. Todo esto debido a la combinación de fibras de colágeno y elastina en esta capa. ÓRGANO INTESTINO DELGADO (ÍLEON) Función general del órgano Las funciones principales del intestino delgado son las de digerir y absorber nutrientes de la comida, mediante la secreción de diversas enzimas, con la ayuda de su función motora. El intestino se divide en tres tramos, el duodeno, el yeyuno y el íleon. El corte que se observó es del tramo del íleon, en específico este es responsable de finalizar la absorción de nutrientes que no se hizo en el yeyuno y de reabsorber sales biliares para reusar. Característico de este tramo es la absorción de vitamina B12, que no se da en los otros dos tramos. CAPAS DEL ÓRGANO (Ver anexo 4) Capa 1 Mucosa Subcapas Epitelio Lámina propia Muscularis mucosae (muscular de la mucosa) Descripción El epitelio de la mucosa es un epitelio columnar simple (una sola capa) conforma proyecciones que se extienden hacia el lumen, con similitud a dedos, conocidas como vellosidades. Epitelio de las vellosidades: El epitelio se compone de células de absorción, columnares, con un núcleo basal. La superficie apical posee un borde de cepillo, compuesto de microvellosidades. El epitelio se compone principalmente de las células de absorción (enterocitos) pero también hay presencia de algunas células caliciformes dispersas, estas tienen forma de cáliz, son células La lámina propia que viene de inmediato después del epitelio es tejido conectivo laxo con una red de capilares sanguíneos y canales linfáticos. A comparación de otros tejidos conectivos, la lámina propia se le considera altamente rica en células, ya que en gran proporción está compuesta por células del sistema inmune, linfocitos y puede incluir células musculares lisas. Su matriz extracelular tiene su respectiva sustancia fundamental y baja presencia de fibras proteicas de colágeno y elastina. La muscular de la mucosa es una capa delgada de tejido muscular liso , entre la capa mucosa y submucosa. Contiene dos capas de fibras, una interna circular y otra externa longitudinal.

glandulares que secretan mucus, y ocasionalmente algunas células endocrinas. Epitelio de las criptas: Las criptas contienen las células madre de las células principales del epitelio, y además células de paneth. Función

  • La existencia de pliegues en la capa de la mucosa, las vellosidades y sus microvellosidades permiten que la superficie expuesta sea la mayor posible, así el área disponible para absorción es. Aumentar la superficie epitelial, y por ende la cantidad de células epiteliales disponibles para la absorción.
  • Las células de absorción (enterocitos) son responsables de absorber los nutrientes del lumen intestinal y transportarlos a través del epitelio a la lámina propia donde se pasan a los capilares.
  • Las células caliciformes al secretar mucus promueven el movimiento y una correcta difusión de los contenidos intestinales.
  • Las células de paneth ubicadas en las criptas, secretan enzimas y otros factores que ayudan a proteger el epitelio de las criptas con sus vitales células madre.
  • Las criptas proveen un lugar protegido para las células madre.
  • Las células madre proveen constante renovación celular, de esta manera las células se mueven de las criptas hacia las vellosidades, y a medida que migran se diferencian a sus formas especializadas.
    • Brinda soporte al delicado epitelio de la mucosa y forma el centro de las vellosidades.
    • Los capilares sanguíneos permiten la absorción y transportación de aminoácidos, monosacáridos y otros productos de la digestión.
    • Los canales linfáticos permiten la absorción de grasas hacia el sistema linfático.
    • Por lo delicado y vulnerable que es el epitelio de la mucosa, las células del sistema inmune proveen una línea de defensa.
    • La presencia de linfocitos se puede deber a la presencia de nódulos linfoides. Los linfocitos producen anticuerpos, proteínas que poseen la capacidad de reconocer y vincularse a sustancias desconocidas.
    • La presencia de sustancia fundamental, que consiste mayormente de fluido intersticial y moléculas de polisacáridos, en su matriz extracelular provee rutas de comunicación y transporte, por difusión entre los distintos tejidos. Brinda soporte al epitelio y las vellosidades. Capa 2 Submucosa Descripción La submucosa es una capa gruesa de tejido conectivo denso irregular , contiene vasos sanguíneos, nervios y linfáticos que se ramifican, por un lado, hacia la mucosa y por otro hacia la capa muscular externa y contiene venas y arterias de gran tamaño. Su matriz extracelular está compuesta mayoritariamente por fibras proteicas densamente dispuestas y en distintas direcciones, y en menor proporción por su respectiva sustancia fundamental. Función Une la mucosa a la capa muscular externa. Además, este tipo de tejido conectivo: denso, es característico de áreas expuestas a tensiones multidireccionales constantes, por tanto, en este caso le brinda soporte y elasticidad al órgano y en especial a la capa mucosa, permitiéndole moverse con flexibilidad durante la peristalsis. Capa 3 Muscular Externa Descripción Es una capa de tejido muscular liso , compuesto de dos subcapas: la interna, circular, consiste en fibras musculares lisas, que envuelven el tracto digestivo y la externa longitudinal, que constituido de fibras musculares lisas extendidas paralelamente a lo largo del tracto. El tejido muscular liso consiste en células individuales alargadas, cada una con su núcleo. Función
  • La contracción de la subcapa interna provoca desplazamiento del contenido intestinal hacia delante y hacia atrás, permitiendo que se mezclen bien las sustancias digestivas, pero también para que el contenido en contacto con el epitelio cambie, se renueve. Mientras que las contracciones de la subcapa exterior se dan en forma de onda, propulsando y permitiendo el avance del contenido en digestión a lo largo del tracto.
  • La coordinación de estos dos tipos de contracciones se conoce como peristalsis o movimiento peristáltico, estas construcciones son comúnmente débiles para dar tiempo para la absorción.
  • El músculo liso permite generar contracciones rítmicas independientes de cualquier control directo, por esto es un movimiento espontáneo e involuntario. Capa 4 Serosa

Anexo 1 El corte transversal de la piel de mamífero observado a 10x-10x, se pudieron observar las dos capas que componen la piel, la epidermis y la dermis cada una de estas capas se muestra bastante diferente, ya que están compuestas por tejido con características distintas y por tanto funciones distintas. (figura 1).

Figura 1. Corte transversal de la piel, tinción hematoxilina-eosina, con observación a 10x-10x. Anexo 2 En el corte transversal de la epidermis observado a 40x-10x, se pudieron observar las cuatro subcapas que componen la epidermis, el estrato córneo, el estrato granuloso, el estrato espinoso y el estrato basal, en cada una de estas se pudo apreciar de forma diferente debido a la notoriedad de los dos tipos tejidos que la

Figura 3. Corte transversal de la piel, enfocado en la capa dermis, tinción hematoxilina-eosina, con observación a 40x-10x. Anexo 4 En el corte transversal del tramo íleon del intestino delgado observado a 4x-10x, se pudieron observar las 4 capas que componen el íleon, la mucosa, submucosa, la muscular externa y la serosa, cada una de estas capas se muestra bastante diferente, ya que se están compuestas por tejidos con características y por tanto funciones bastante distintas. Por un lado, la capa mucosa presenta vellosidades, extensiones en todo su borde que dan hacia el lumen intestinal, estas vellosidades están compuestas de tejido epitelial, en la misma capa mucosa, le sigue la lámina propia que es una subcapa de tejido conectivo laxo y hay inclusive otra subcapa de tejido muscular liso, llamada muscular mucosae o muscular de la mucosa. Ya al observar las otras 3 capas sus estructuras se ven más sencillas, la siguiente capa, la submucosa, es tejido conectivo denso y se puede ver presencia de un matriz extracelular con fibras proteicas. En la siguiente capa, la muscular externa, se observa

bien gruesa y densa, esta es una capa de tejido muscular liso. Por último la capa serosa, se observa como la capa más delgada, esta está compuesta por tejido conectivo laxo y tejido epitelial escamoso. (Figura 4) Figura 4. Corte transversal del tramo íleon del intestino delgado, tinción hematoxilina-eosina, con observación a 4x-10x. Anexo 5 En la observación a través del microscopio, se logró distinción de los diferentes tipos de tejido presentes en el corte transversal de tráquea. En orden descendente, observamos el tejido conectivo cartilaginoso hialino, es el que brinda soporte estructural a la tráquea, rodeado por el pericondrio. Le sigue el tejido muscular liso, encargado de la constricción del tubo traqueal. Continúa el tejido conectivo denso irregular con presencia de células glandulares. Por último, la mucosa que está

https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/5-general.php Técnicas histológicas. Protocolos. TINCIÓN: HEMATOXILINA y EOSINA. Atlas de Histología Vegetal y Animal. Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de Biología. Universidad de Vigo. España. 2019 https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/p-tincion-h-e.php Pregunta 2: Intestino Delgado: David King SIU southern Illinois university school of medicine 2016. http://www.siumed.edu/~dking2/erg/smallint.htm Ferrufino J, Taxa L. Histología normal del intestino delgado. Rev Med 1996 1: 46-57 http://www.scielo.org.pe/pdf/rmh/v7n1/v7n1tr2.pdf Clark T; Robert L Sorenson University of Minnesota Dept genetics, cell biology and development. 2005 http://histologyguide.org/slideview/MH-119-ileum/14-slide-1.html?x=28130&y=15303&z=1.7&page=1# Jason T. Collins; Madhu Badireddy. Anatomy, Abdomen and Pelvis, Small Intestine 2019 StatPearls Publishing LLC. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK459366/ Josh Turiccki 2018 HISTOLOGY AND CELLULAR FUNCTION OF THE SMALL INTESTINE. https://teachmephysiology.com/gastrointestinal-system/small-intestine/histology-and-cellular-function/ Órganos animales, intestino delgado. Atlas de Histología Vegetal y Animal. Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. Facultad de Biología. Universidad de Vigo. España. 2019 https://mmegias.webs.uvigo.es/2-organos-a/imagenes-grandes/digestivo-delgado.php University of leeds. https://www.histology.leeds.ac.uk/digestive/small_intestine.php Michigan Histology and Virtual Microscopy Learning Resources. Small and Large Intestine http://histology.medicine.umich.edu/resources/small-large-intestine#i-small-intestine Tráquea: Paniagua R, Nistal M, et al (2007) Citología e histología vegetal y animal 4 ed. McGraw-Hill Interamericana, España. Órganos animales, Respiratorio, Tráquea. Atlas de Histología Vegetal y Animal, Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud, Facultad de Biología, Universidad de Vigo, España. 2019 https://mmegias.webs.uvigo.es/2-organos-a/imagenes-grandes/respiratorio-traquea.php Piel de mamífero:

la piel: estructura y función. fisiología general, Depto. de Biología universidad de cantabria. https://ocw.unican.es/pluginfile.php/879/course/section/967/Tema%252011-Bloque%2520II-La%2520Piel.%2520Estructura%2520y%2520Funciones.pdf Tejidos, membranas, derivados de la piel. Escuela Universitaria de Enfermería. Universidad de Barcelona España. https://www.infermeravirtual.com/files/media/file/95/Tejidos%2C%20membranas%2C%20piel%20y%20derivados.pdf? https://www.eucerin.com.co/acerca-de-la-piel/conocimientos-basicos-sobre-la-piel/estructura-y-funcion-de-la-piel https://medlineplus.gov/spanish/ency/esp_imagepages/8912.htm https://www.ucm.es/data/cont/docs/420-2014-02-07-20-Tumores-piel-texto.pdf