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Asignatura: Técnicas experimentales de edafología, Profesor: Raimundo Cabrera Pérez, Carrera: Biología, Universidad: ULL
Tipo: Ejercicios
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El microscopio se inventó, hacia 1610 por Galileo , según los italianos, o por Jansen , en opinión de los holandeses. Este aparato mostró por primera vez vida que no se podía observar directamente., y permitió descubrir niveles de complejidad insospechados. Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660 y 1665 , cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia. A mediados del s. XVII, Leenwenhoek , utilizando microscopios simples de fabricación propia observo que un trozo de corcho estaba compuesto de numerosos espacios a los que llamó celdas , nombre que designó lo que conocemos actualmente como la unidad estructural, funcional y morfológica de los seres vivos: células. Además, describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides, glóbulos rojos. En 1877 surgieron las mejoras más importantes de la óptica cuando Ernst Abbe publica su teoría del microscopio, y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopia de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro, lo que permiten obtener aumentos de 2000X. A principios de los años 30 se había alcanzando el limite teórico para los microscopios ópticos, no consiguiendo estos aumentos superiores a 500X o 1000X sin embargo existían un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares (núcleo, mitocondria, etc.). En 1931 , surge el microscopio electrónico de trasmisión , utilizando un haz de electrones en lugar de luz para enfocar las muestras consiguiendo aumentos de hasta 100.000X. En 1942 , surge el microscopio electrónico de barrido , en el cual la muestra es recubierta de un metal delgado y barrida con electrones. El detector mide la cantidad de electrones emitidos, observándose la muestra en tres dimensiones.
El microscopio óptico está compuesto por los siguientes componentes o sistemas: (1) Sistema mecánico (2) Sistema de iluminación (3) Sistema óptico
1. El sistema mecánico: Está constituido por el conjunto de piezas del microscopio encargadas de soportar y desplazar a los restantes componentes. Básicamente está formado por los siguientes elementos:
A) El estativo : Es la pieza que da soporte a todos los elementos del microscopio. Básicamente consta de una base sobre la que descansa todo el aparato y en cuyo interior se encuentra el sistema de iluminación. El resto del estativo está formado por el brazo que sirve de asa para su transporte, el cabezal del que pende el revólver y del que arranca el tubo. B) La platina y sus mandos de desplazamiento : La platina es la pieza sobre la que se coloca y sujeta, mediante una pinza , la preparación histológica a observar, y que permite su desplazamiento a voluntad por medio de dos mandos que la mueven en sentido antero-posterior y latero-lateral. La preparación histológica consta de un porta objetos, el espécimen y el cubre objetos. C) Los mandos de enfoque : Son mandos que desplazan la platina en sentido vertical. El denominado tornillo macrométrico permite un primer enfoque de aproximación mientras que el tornillo micrométrico realiza un enfoque fino y preciso.
2. El sistema de iluminación: Son las piezas del microscopio encargadas de iluminar el espécimen. En general consta de una lámpara y su correspondiente transformador situados en la base. Un interruptor y un botón regulador de la intensidad controlan la iluminación. El condensador es una pieza con un conjunto de lentes , situada debajo de la platina, cuya misión es concentrar la luz, a fin de conseguir una adecuada iluminación. Se puede desplazar en sentido vertical mediante un mando. Así mismo posee un diafragma que mediante una palanca, controla la cantidad de luz sobre el espécimen. 3. El sistema óptico: Es el encargado de aumentar las imágenes proporcionadas por los objetos histológicos. Básicamente consta de los objetivos, los oculares y el condensador. B) El objetivo : Es la pieza que posee la lente situada sobre el objeto a observar. Los objetivos se encuentran alojados en una pieza giratoria que recibe el nombre de revolver y sirven para aumentar la imagen del objeto a estudiar. Cada objetivo lleva grabado el valor de su coeficiente de aumento. Hay dos tipos de objetivos: i) Secos ii) Húmedos o de inmersión C) Los oculares : Llamados así por situarse próximos a los ojos, se encuentran en la parte alta del microscopio, en el extremo superior del tubo que arranca del cabezal donde se encuentran además un sistema de prismas para dirigir la trayectoria de la luz desde los objetivos a los oculares.
Los oculares están insertados en dos cortos tubos. El tubo del lado derecho posee un anillo para corregir la diferencia de visión que tengamos en nuestros ojos. Los oculares pueden girar a derecha e izquierda para que su separación coincide con la separación de nuestros ojos.
Los cuatro sistemas ópticos están colocados en el cuerpo de la lupa, que puede desplazarse verticalmente para que el objeto observado quede en el foco del conjunto de las lentes y de esta manera se produzca una imagen nítida. Esta operación se denomina enfocar y se lleva a cabo con dos tornillos laterales de movimiento simultáneo llamados mando de enfoque. La columna se une a la base de la lupa. En ésta se encuentra la platina, que es la superficie sobre la que se coloca el objeto para ser observado. A los lados de la platina hay cuatro orificios en los que pueden colocarse las dos pinzas de fleje que hay en la base, según las necesidades de la observación. Para poder ver el objeto es necesario iluminarlo lateralmente (no por transparencia) debido a que la imagen se forma por reflexión.