MANUAL DE PRACTICAS DE BIOQUÍMICA
R. NAVARRO
B. MESTAS
G. SUCASACA
1
PRACTICA N° 10
GLICOLISIS
PRODUCCION DE ACIDO PURIVICO DURANTE LA FERMENTACION DE
LA GLUCOSA POR LA LEVADURA Y SU IDENTIFICACION
INTRODUCCION
La glicólisis es el proceso por el cual la glucosa se degrada a Etanol y CO2, y/ó a ácido
láctico dependiendo del organismo que lo efectúe.
Ambas rutas de fermentación son similares hasta la formación de piruvato,
manteniendo idénticas las etapas de conservación de energía que conducen a la formación
de ATP.
La glucólisis no solo es la ruta principal para el metabolismo de la glucosa que conduce
a la producción de Acetil−Co−A y a su oxidación en el ciclo del ácido cítrico, sino que también
proporciona una vía importante para metabolizar fructosa y galactosa derivada de los
alimentos. La característica de la glucólisis de proporcionar ATP en ausencia de oxígeno es
de significado crítico biomédico, porque permite al músculo esquelético hacer un trabajo
sumamente eficiente aún cuando la oxidación aeróbica se vuelva insuficiente, a la vez que
los tejidos con capacidad glucolítica pueden sobrevivir a episodios de anoxia. Inversamente,
el músculo cardíaco, que está adaptado al trabajo aeróbico, tiene una capacidad glucolítica
relativamente deficiente y supervivencia escasa bajo condiciones de isquemia. Hay un
número pequeño de enfermedades en las que las enzimas del sistema glucolítico como por
ejemplo la piruvatocinasa muestran actividad deficiente; estas anomalías se manifiestan
principalmente como anemias hem olíticas. En las células cancerosas que proliferan con
rapidez, la glucólisis procede a una velocidad mucho mayor que la requerida por el ciclo del
ácido cítrico; por tanto, se produce más piruvato que el que puede ser metabolizado. El
resultado es una producción excesiva del lactato, que favorece un entorno local relativamente
ácido en el tumor, situación que puede tener implicaciones con ciertos tipos de terapéutica
contra el cáncer. También se produce acidosis láctica por deficiencia de piruvato
deshidrogenasa.
OBJETIVOS
- Demostrar la formación de ácido pirúvico durante la fermentación de la glucosa por
levadura.
- Producir e identificar ácido pirúvico a partir de glucosa.
MATERIAL
Tubos de ensayo
Tubos de centrifuga
Trípode, rejilla con asbesto, mechero
Baño maría
Pipetas
Centrifuga
Vasos de precipitados de 250 y 600 ml.
Pinzas para tubos de ensayo.
Solución de glucosa a diversas concentraciones 0.5, 1.0 y 2.0%
Suspensión de levadura al 5 % en Na2HPO4y KH2PO4(18 hrs de fermentación antes de
su utilización).
Acido tricloroacético al 10%
Nitroprusiato de sodio.
2,4 dinitrofenilhidracina.
Hidróxido de amonio concentrado.
Hidróxido de sodio 0.1N
