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En este documento se presenta la práctica virtual de Electroforesis de DNA, un proceso clave en Biología Molecular. Conducirá el lector a través del procedimiento, objetivos y resultados esperados de este experimento. Además, se incluyen preguntas para comprobar el entendimiento del tema.
Tipo: Monografías, Ensayos
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¡No te pierdas las partes importantes!
En esta simulación, se realizará la electroforesis en gel para separar diferentes soluciones de tintes. ¿Qué necesita saber antes de que este laboratorio se inicie? •La electroforesis en gel se utiliza para separar biomoléculas, como el ADN y el ARN, en un gel de agarosa compuesto de diminutos poros según su tamaño y carga eléctrica. •Una corriente eléctrica aplicada al gel migra las biomoléculas cargadas hacia el electrodo de carga opuesta. •Como los fragmentos de ADN tienen una carga negativa similar, todos se mueven hacia el electrodo positivo. •Las moléculas más pequeñas se moverán a través de los poros del gel más rápido que las moléculas más grandes. •El tinte de carga se utiliza a menudo para visualizar la rapidez con la que funciona un gel y añade peso a la muestra, lo que permite que se hunda en el fondo del pocillo. PROCEDIMIENTO: Ingrese al siguiente enlace: https://www.labxchange.org/library/items/lb:LabXchange:5d12867d:lx_simulation: Materiales Reactivos Los productos químicos que se pueden utilizar en este experimento
1. Explique el principio en el cual se basa la electroforesis de ADN. Se usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel o de otra matriz. 2. Cuál es el objetivo de la electroforesis. La electroforesis es una técnica de laboratorio que se usa para separar moléculas de ADN, ARN o proteínas en función de su tamaño y carga eléctrica. 3. Explique en qué consiste la electroforesis de gel de poliacrilamida y cuando es recomendable utilizarla. La electroforesis en geles de poliacrilamida es uno de los métodos más utilizados para la purificación, análisis y caracterización de proteínas. La técnica permite separar moléculas cargadas y explota diferencias en movilidad cuando se les somete a la acción de un campo eléctrico. 4. Explique que es, y cuál es la función de la agarosa en la electroforesis. Los geles se comportan como un tamiz molecular y permiten separar moléculas cargadas en función de su tamaño y forma. Así, moléculas de DNA de diferente tamaño van a emigrar de forma distinta en una electroforesis en gel de agarosa. 5. De qué depende que los fragmentos de DNA queden del lado positivo o negativo del gel Los fragmentos tienen carga negativa, por lo que se mueven hacia el electrodo positivo. Puesto que todos los fragmentos de ADN tienen la misma cantidad de carga por masa, los fragmentos pequeños atraviesan el gel más rápido que los grandes. 6. Como se visualizan las bandas de DNA al finalizar la electroforesis Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN y se coloca bajo luz UV, los fragmentos de ADN brillarán, lo cual nos permite ver el ADN presente en distintos lugares a lo largo del gel. 7. Que es un DNA marcador o DNA marcador de peso molecular y por qué se usa en una electroforesis Son moléculas de ADN o de proteínas que permiten determinar por comparación el tamaño de los fragmentos de ácidos nucleicos o proteínas contenidos en las muestras sometidas a electroforesis
8. Completar el siguiente cuadro según corresponda: DENOMINACIÓN IMAGEN DESCRIPCIÓN Caja de electroforesis Un equipo de electroforesis es un equipo que permite la separación de mezclas de partículas con carga eléctrica en solución; aprovechando la diferente velocidad de migración cuando se aplica un campo eléctrico (electroforesis) Trasiluminadores Es una cámara en donde nos permite que el ADN se pueda visualizar después de la electroforesis. Este iluminará el gel con luz UV o azul, lo que ocasiona que las moléculas de ADN se vuelvan visibles como bandas en el gel Micropipeta Es^ un^ instrumento^ usado para recolectar muestras en volúmenes muy pequeños, medidos en μL, lo que corresponde a la millonésima parte de un litro TAE Es una disolución tampón formada por Tris, acetato y EDTA, de uso frecuente en electroforesis, en especial en gel de agarosa para separar ácidos nucleicos
Puntas para Micropipeta Estos están diseñados para su empleo en la rutina diaria de laboratorio que necesitan pipetear sustancias en cantidades pequeñas son de un único uso para evitar la contaminación de las muestras. Muestras teñidas con azul Son las soluciones de ADN extraído y teñidas con Azul de Bromofenol para ser puestas en los orificios del gel agarosa y que estos sean corridas en el proceso de electroforesis
