Laboratorio No. 3
PROCESAMIENTO DE TEJIDOS: TINCIÓN HE
En histología se trabaja con cortes de tejidos de un espesor entre 5 y 10 µm realizados
con un micrótomo; por ello es necesario que la muestra se encuentre lo suficientemente
endurecida a fin de evitar la deformación o laceración de las estructuras histológicas
manteniendo su arquitectura original lo mejor posible. Para lograrlo anterior se ha recurrido
a técnicas de procesamiento de tejidos por medio de las cuales se infiltra en los espacios intra
y extracelulares una sustancia en estado líquido que posteriormente pasará a estado sólido
(proceso de embebido), permitiendo obtener un bloque fácil de manejar y cortar. Se cuenta
actualmente con varias sustancias como agentes de embebido las cuales pueden ser solubles
en agua o no, procediéndose después de la fijación a pasar la muestra por diferentes
soluciones hasta llegar al medio del embebido.
1. Deshidratación
Si el agente de embebido es insoluble en agua, debido a que por lo general el fijador se
encuentra disuelto en agua, inmediatamente después de la fijación deberá deshidratarse el
tejido; por el contrario, si la sustancia de embebido es soluble en agua este paso se omite. La
deshidratación se efectúa por medio de agentes deshidratantes de los cuales el alcohol etílico
es el más utilizado, se emplea en soluciones de concentración creciente de 60% hasta llegar
al 100%. Otros agentes deshidratantes son el isopropanol, 2-etoxietanol (celosolve), acetona,
butanol, piridina, dioxano y tetrahidrofurano.
2. Aclaramiento
Este paso es esencial en el procesamiento del tejido, debe realizarse siempre
independientemente del tipo transparente, por medio de una sustancia con un alto índice de
refracción y que sea soluble con el agente deshidratante y de embebido. El aclarador más
utilizado es el xileno o xilol, pero también existen otros como el tolueno, benceno,
cloroformo, aceites de cedro, clavo, orégano y sándalo, bisulfuro de carbono, éter de petróleo
y tetracloruro de carbono. Es importante mencionar que cuando se utiliza dioxano o
tetrahidrofurano como deshidratantes, no es necesario emplear un aclarador ya que estos
compuestos también sirven como aclarantes por su alto índice de refracción.
3. Embebido
Es el paso final del procesamiento de un tejido previo a su corte, se utilizan sustancias
naturales o sintéticas cuya característica común es que a temperatura ambiente son sólidas y
tienen un bajo punto de fusión a fin de poderlas introducir en forma líquida en el tejido a
temperaturas relativamente bajas para no dañarlo.
El embebido consta de dos pasos; el primero es la impregnación que consiste en la
penetración de la sustancia a las células y espacios intercelulares, luego se procede a la
inclusión que es la obtención de pequeños bloques de agente de embebido con el tejido
impregnado dentro.
