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ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN GUÍA DE LABORATORIO NRO. 12 PROGRAMA : Nutrición EXPERIENCIA CURRICULAR : Química Inorgánica y Orgánica CICLO : III TURNO : A SEMESTRE : 2025- DOCENTE (ES) : Mg. Pedro Alberto Añanca Rojas SESIÓN Nº : 12 LUGAR : Laboratorio de Química I. TEMA: Carbohidratos: definición, clasificación y estructura monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos e importancia. II. RESULTADO DE APRENDIZAJE: Analiza la estructura de los carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos señalando la importancia que cumplen en el metabolismo celular del ser humano. III. OBJETIVOS ● Identificar azúcares reductores en frutas como naranja, mandarina, plátano y otras, utilizando los reactivos de Molisch y Fehling, observando cambios de color como indicador de reacción positiva. ● Analizar la hidrólisis de la sacarosa mediante la acción del ácido clorhídrico y posterior neutralización con hidróxido de sodio, comprobando la formación de glucosa y fructosa con el reactivo de Fehling.
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN ● Detectar la presencia de almidón en alimentos como papa, camote, yuca y pan, utilizando el reactivo de Lugol y observando la coloración azul característica. ● Detectar y cuantificar glucosa en orina, aplicando la prueba de Benedict y comparando los cambios de color con una tabla de concentración para valorar la posible presencia de hiperglucemia. ● Comprender los fundamentos químicos detrás de cada prueba (reacciones de oxidación- reducción, hidrólisis, formación de complejos), y su aplicación en el diagnóstico clínico y análisis de alimentos. IV. FUNDAMENTO TEÓRICO Los carbohidratos son compuestos orgánicos esenciales formados por carbono, hidrógeno y oxígeno. Representan la principal fuente de energía rápida en los organismos vivos. Se clasifican en monosacáridos, disacáridos y polisacáridos, según la cantidad de unidades estructurales que los componen. La prueba de Molisch es una reacción general para identificar carbohidratos. Consiste en la deshidratación de azúcares por acción del ácido sulfúrico, formando derivados furfúricos. Estos compuestos reaccionan con el 1-naftol presente en el reactivo de Molisch, produciendo un anillo violeta en la interfase, que indica un resultado positivo. La prueba de Fehling se emplea para identificar azúcares reductores (como glucosa y fructosa), que poseen grupos funcionales capaces de reducir los iones cúpricos (Cu² ) a óxido cúprico (Cu O), el⁺ ₂ cual precipita como un sólido rojizo. Este proceso requiere calentamiento para activarse. La sacarosa, al ser un disacárido no reductor, solo reacciona positivamente tras una hidrólisis ácida, que la convierte en glucosa y fructosa. El reactivo de Lugol detecta la presencia de almidón, un polisacárido formado por cadenas de glucosa. El yodo del Lugol se aloja en la estructura helicoidal del almidón, formando un complejo de color azul oscuro característico. Por otro lado, la prueba de Benedict permite identificar y cuantificar glucosa en muestras biológicas como la orina. Al calentar, los azúcares reductores reducen el ion cúprico a óxido cúprico,
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN ● Hidróxido de sodio ● Fenolftaleína ● Alcohol VI. PROTOCOLOS DE SEGURIDAD: Todos los estudiantes deberán cumplir estrictamente con el Protocolo de Seguridad en Laboratorios de Química y Afines establecido por la Universidad César Vallejo S.A.C. durante el desarrollo de las prácticas. El objetivo es garantizar un ambiente de trabajo seguro, minimizando la exposición a riesgos químicos, físicos o biológicos, tanto para sí mismos como para sus compañeros. Puede consultar el protocolo institucional completo en el siguiente enlace: Protocolo de seguridad – Universidad César Vallejo. Vestimenta: ● Es obligatorio el uso de guardapolvo o bata de laboratorio, el cual debe cubrir completamente la ropa de calle. ● La bata debe mantenerse cerrada en todo momento mientras se esté dentro del laboratorio. ● Su uso debe estar restringido únicamente al interior del laboratorio para evitar la contaminación cruzada con ambientes externos. ● El incumplimiento puede provocar exposición directa de la piel a sustancias químicas corrosivas o irritantes. Cabello y Accesorios: ● El cabello largo debe estar recogido y cubierto con una gorra o toca durante toda la práctica. ● Está prohibido el uso de accesorios colgantes (pulseras, collares, bufandas, mangas anchas, etc.), así como calzado descubierto como sandalias. ● No seguir esta norma puede resultar en atrapamiento con equipos, contacto con fuego o derrames de reactivos peligrosos. Higiene de manos
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN ● Las manos deben lavarse frecuentemente, especialmente después de manipular reactivos químicos o material contaminado. ● El lavado debe realizarse antes de salir del laboratorio y antes de consumir alimentos, incluso si se usan guantes. ● No lavarse las manos adecuadamente puede ocasionar intoxicaciones, quemaduras químicas o contaminación por contacto indirecto. Equipamiento de Seguridad ● Cada laboratorio debe contar con un kit de seguridad y un botiquín de primeros auxilios, accesibles para todos los participantes. ● Se debe conocer la ubicación de extintores, duchas de emergencia y lavaojos. ● En caso de accidente o derrame, se debe notificar inmediatamente al docente o responsable del laboratorio. ● Ignorar estas medidas impide una respuesta oportuna ante emergencias y puede agravar las consecuencias de un accidente. VII. DESARROLLO DE LAS ACTIVIDADES:
1. RECONOCIMIENTO DE AZÚCARES REDUCTORES CON EL REACTIVO DE MOLISCH: PROCEDIMIENTO 1. En un tubo de ensayo coloque 1 ml de la solución de monosacárido (lima, naranja), añada 3 gotas del reactivo de Molisch recién preparado y mezcle bien. 2. Luego incline el tubo de ensayo un poco y haga resbalar por la pared 2 ml de ácido sulfúrico concentrado, dejándolo que baje al fondo sin mezclarse. La formación de un anillo color violeta en la interfase indicará resultado positivo. (Molisch: 15g de 1-naftol en 100 ml de alcohol absoluto) Para analizar los resultados anteriores, responde las siguientes preguntas:
- ¿Qué indica la aparición de un anillo violeta en la prueba de Molisch?
- ¿Cuál es la función del ácido sulfúrico en esta prueba?
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- ¿Por qué se utiliza ácido clorhídrico en la hidrólisis de la sacarosa?
- ¿Qué sucede químicamente durante la hidrólisis de la sacarosa?
- ¿Cuál es la función de la fenolftaleína y el hidróxido de sodio en esta parte de la práctica?
- ¿Por qué se ensaya con Fehling después de la hidrólisis?
- ¿Qué resultados esperas obtener si la hidrólisis fue exitosa? 4. RECONOCIMIENTO DE ALMIDÓN PROCEDIMIENTO
- Tomar una pequeña cantidad de muestra en un tubo de ensayo. (yuca, papa, camote, pan)
- Si es necesario agregar agua destilada
- Agregar 2 a 3 gotas de Lugol y agitar
- Apreciar la coloración azul si es que lo hay
- Repetir para las otras muestras Para analizar los resultados anteriores, responde las siguientes preguntas:
- ¿Qué indica la aparición de una coloración azul tras añadir Lugol?
- ¿Qué tipo de enlace químico se detecta con el reactivo de Lugol?
- ¿Qué muestra entre yuca, papa, camote o pan esperas que tenga mayor contenido de almidón? ¿Por qué?
- ¿Por qué es importante disolver la muestra con agua antes del ensayo?
- ¿Qué conclusiones puedes sacar si no se observa ningún cambio de color? 5. DETECCIÓN Y CÁLCULO DE GLUCOSA EN LA ORINA PROCEDIMIENTO
- Con ayuda de una pipeta deposite 5ml de la solución de Benedict en un tubo de ensayo.
- Agregue 12 gotas de orina dentro de un tubo de ensayo y mézclelas completamente.
- Hierva durante 2 minutos con ayuda del baño María, luego deje enfriar la mezcla hasta la temperatura ambiente.
- Examine el color final de la mezcla y compárela con la tabla de resultados:
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN COLOR FINAL RESULTADO
CONCENTRACIÓN
(mmol/L) Azul Negativo 0 Verde Huellas 14 Verde con Prec. Amarillo Positivo (+) 28 De amarillo hasta verde oscuro Positivo (++) 56 Castaño Positivo (+++) 83 De anaranjado a rojo ladrillo Positivo (++++)
- Repita el experimento anterior con la orina de una persona diabética. Análisis de resultados:
- ¿Qué reacción ocurre entre la glucosa y el reactivo de Benedict?
- ¿Qué color indica la presencia de glucosa en la orina?
- ¿Por qué se utiliza un baño María en lugar de calentar directamente?
- ¿Qué problemas de salud se podrían asociar a una prueba positiva de glucosa en orina?
- ¿Cómo se podría cuantificar la cantidad de glucosa presente a partir del resultado visual? VIII. CONCLUSIONES 1. Los carbohidratos pueden identificarse mediante reacciones químicas específicas, lo que permite distinguir entre monosacáridos, disacáridos y polisacáridos con pruebas cualitativas sencillas como Molisch, Fehling, Benedict y Lugol.
ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN de trabajo, distribuir funciones entre los integrantes del grupo para favorecer el trabajo colaborativo y mantener un registro escrito desde el inicio de la práctica para garantizar la correcta sistematización de los resultados. XI. BIBLIOGRAFÍA Código de biblioteca
TEXTO
Armas C. Técnicas experimentales. Ed. Libertad EIRL Trujillo-Perú Hurtado M. Manual de Laboratorio de Química general. Trujillo-Perú Cabeza J. Manual de laboratorio de Química Inorgánica y Orgánica. UCV Trujillo-Perú
