TEMA 9: RECOMBINACIÓN EN BACTERIAS
•Recombinación en bacterias:
La recombinación en bacterias se produce por algún mecanismo parasexual. Implican la
herencia estable del ADN. Estos mecanismos implican transferencia y recombinación y son:
• Conjugación: ADN unidireccional entre dos bacterias.
• Transformación: capta el ADN de otra bacteria del medio de cultivo.
• Transducción: el ADN se transfiere mediante un fago.
A partir de estos mecanismos se origina un merocigoto o cigoto parcial (haploide o diploide
para según qué genes) entre el cromosoma bacteriano y un fragmento de ADN más o menos
grande.
•Técnicas para el estudio en bacterias:
Existen dos tipos de medios de cultivo:
•Medio mínimo: está compuesto por carbono, nitrógeno, fósforo, iones y vitaminas. En
él no crecen los mutantes.
•Medio completo: está compuesto por carbono, nitrógeno, fósforo, iones y vitaminas y
además contiene sustancias necesarias para el desarrollo de mutantes.
Los medios pueden ser líquidos estériles o semilíquidos (agua + agar. Permite aislar bacterias
por inoculación seriada) a los que se añade bacterias cuyo crecimiento se mantiene hasta que la
concentración de sustancias tóxicas inhibe el crecimiento.
•Detección de mutantes:
Para estudiar los mutantes algunos caracteres que se pueden estudiar son:
• Aspecto de la colonia: variación de colores.
• Resistencia a antibióticos, bacteriófagos u otras sustancias.
• Mutantes auxótrofos: son aquellos que no pueden acabar el crecimiento de forma
adecuada porque el medio de cultivo carece de un aminoácido. Lo opuesto es
protótrofo, todos sus genes realizan su ruta metabólica pudiendo crecer en un medio
mínimo.
DETECCIÓN DE MUTANTES AUXÓTROFOS
Mediante la técnica de placas-réplica:
Con una membrana estéril, a modo de tampón, se transfiere el cultivo a dos medios mínimos,
uno con leucina y otro sin leucina. En el medio sin leucina solo crecen las bacterias protótrofas
(leu+), pero en el otro crecen ambas. Podemos aislar las bacterias auxótrofas (leu-) y elaborar un
cultivo con ellas porque en ambas placas crecen con la misma distribución.
•El genoma bacteriano:
• Son organismos unicelulares.
•Su cromosoma es circular y su ADN duplexo.
• Presentan plásmidos (pequeñas moléculas circulares de ADN).
• Poseen episomas (plásmidos capaces de replicarse de manera autónoma o de integrarse
en el cromosoma bacteriano).
•El episoma que controla el apareamiento y el intercambio génico entre células de E. coli
se denomina factor F (de fertilidad).
•Transferencia génica:
Es un mecanismo de recombinación que capta el ADN de otra bacteria del medio de cultivo. La
reproducción bacteriana no está relacionada con el intercambio. Además, el material genético no
recombinado se degrada por lo que la célula receptora permanece haploide. Hay tres tipos:
•Conjugación. Una bacteria donadora se aproxima a una bacteria receptora. Entre
ambas, se forma un puente citoplasmático y, a través de él, se transfiere el ADN
