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RECUENTO DE LINFOCITOS VIABLES, Esquemas y mapas conceptuales de Biología

Biología

Adiestrar al alumno en el manejo, reconocimiento y recuento de linfocitos viables - Capacitar al alumno en el trabajo inmunológico con células viables

Tipo: Esquemas y mapas conceptuales

2017/2018

Subido el 16/12/2022

valeria-ab-1
valeria-ab-1 🇵🇪

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PRACTICA Nº 10
RECUENTO DE LINFOCITOS VIABLES
OBJETIVOS:
- Adiestrar al alumno en el manejo, reconocimiento y recuento de linfocitos
viables
- Capacitar al alumno en el trabajo inmunológico con células viables.
III. MATERIAL Y METODOS:
MATERIAL BIOLOGICO
- Ratón blanco
MATERIAL DE LABORATORIO
- Agua destilada estéril
- Algodón
- Alcohol Yodado
- Cloroformo
- Estuche de disección
- Estufa
- Lactato de Ringer o Buffer fosfato salino (PBS)
- Láminas portaopbjetos
- Laminillas cubre objeto
- Microscopio compuesto
- Nigrosina al 0.2 %
- Pipeta de 2 5 mL.
- Pipetas Pasteur
- Placa de petri
- Refrigeradora.
- Tubos de ensayo de 13 x 100 mm
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¡Descarga RECUENTO DE LINFOCITOS VIABLES y más Esquemas y mapas conceptuales en PDF de Biología solo en Docsity!

PRACTICA Nº 10

RECUENTO DE LINFOCITOS VIABLES

OBJETIVOS:

  • Adiestrar al alumno en el manejo, reconocimiento y recuento de linfocitos viables
  • Capacitar al alumno en el trabajo inmunológico con células viables. III. MATERIAL Y METODOS: MATERIAL BIOLOGICO
  • Ratón blanco MATERIAL DE LABORATORIO
  • Agua destilada estéril
  • Algodón
  • Alcohol Yodado
  • Cloroformo
  • Estuche de disección
  • Estufa
  • Lactato de Ringer o Buffer fosfato salino (PBS)
  • Láminas portaopbjetos
  • Laminillas cubre objeto
  • Microscopio compuesto
  • Nigrosina al 0.2 %
  • Pipeta de 2 5 mL.
  • Pipetas Pasteur
  • Placa de petri
  • Refrigeradora.
  • Tubos de ensayo de 13 x 100 mm

PROCEDIMIENTO:

  1. Anestesiar a un ratón con cloroformo.
  2. Hacer la disección y extraer el bazo. Luego colocarlo en una placa petri con SSF y Lactato Ringer o Buffer fosfato salino(PBS), previamente refrigerado.
  3. Triturar el bazo manteniendo en todo momento la placa petri sobre hielo.
  4. La suspensión obtenida, colocarlo en un tubo de ensayo.
  5. Añadir unas cuantas gotas de nigrosina al 0.2% e incubar a 37 o^ C por 3 minutos, para facilitar la incorporación del colorante dentro de la célula muerta.
  6. Luego homogenizar muy suavemente y tomar una gota de la suspensión y colocarlo en una lámina portaobjetos y cubrir con laminilla. Observar al microscopio y realizar el recuento de 100 células (vivas o viables y muertas), lo cual corresponde al tiempo cero. El tubo conservarlo a 4 o^ C.
  7. Este último paso será repetido 4 veces a los 5, 10, 15 y 20 minutos.
  8. Expresar sus resultados de acuerdo al gráfico 1.