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Una comparativa entre cromatografía analítica y preparativa, explicando sus principios básicos, diferencias y tipos existentes. La cromatografía preparativa se utiliza para separar y aislar componentes de una mezcla en cantidades variadas, desde microgramos hasta cien gramos. El documento define la cromatografía preparativa, describe el sistema cromatográfico y distingue tipos de cromatografía, incluyendo sólido-líquido, líquido-líquido, líquido-gas y sólido-gas, adsorción, partición y intercambio iónico.
Tipo: Apuntes
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La cromatografía es una técnica que permite la separación de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos contrapuestos. En este documento se hará hincapié a la cromatografía preparativa que comprende un amplio campo de aplicaciones, desde el aislamiento de 1 μg. de muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g. La cromatografía preparativa se diferencia de la técnica analítica en muchos aspectos, he aquí una breve comparación. COMPARACIÓN ANALÍTICA PREPARATIVA Genera rápida información Recuperación óptima del producto Permite todo tipo de separación Recuperación de solutos sin cambio Velocidad Pureza Selectividad Rendimiento Capacidad máxima (1<k<5) Productividad Economía
La cromatografía preparativa es parte de los procesos de separación utilizada para separar moléculas dispersas en mezclas homogéneas. Generación de una segunda fase por la incorporación de energía o un aditivo. Intercambio de energía entre las fases. Son separadas las fases, cada una con concentraciones distintas.
Fase estacionaria Fase móvil El comportamiento cromatográfico es determinado por la interacción de todos los componentes individuales en las fases: Soluto, Solvente y Adsorbente. Retención. Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un sólido o un líquido anclado a un soporte sólido. Desplazamiento. Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase móvil, que puede ser un líquido o un gas.
Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase móvil se pueden distinguir distintos tipos de cromatografía Cromatografía sólido-líquido****. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un líquido. Cromatografía líquido-líquido****. La fase estacionaria es un líquido anclado a un soporte sólido. Cromatografía líquido-gas****. La fase estacionaria es un líquido no volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas. Cromatografía sólido-gas****. La fase estacionaria es un sólido y la móvil un gas. Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la mezcla y la fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre.
Cromatografía de adsorción****. La fase estacionaria es un sólido polar capaz de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar. Cromatografía de partición****. La separación se basa en las diferencias de solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil, que son ambas líquidas. Cromatografía de intercambio iónico****. La fase estacionaria es un sólido que lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por aquellos iones presentes en la fase móvil.
La cromatografía preparativa se lleva a cabo en placas de gel de sílice de 1-2 mm de espesor sobre un soporte de vidrio. Se utiliza para la separación y aislamiento de los componentes de una mezcla en cantidades comprendidas entre 100-200 mg. En la superficie del adsorbente (gel de sílice), mediante una pipeta Pasteur, se traza una línea continua con la muestra disuelta y se introduce la placa en posición vertical en una cubeta. Durante la elución debe permanecer tapada para evitar la evaporación del disolvente. Una vez se han separado los productos que componen la muestra, se marca con una cuchilla el contorno del compuesto a aislar y con ayuda de una espátula se desprende del soporte de vidrio el gel de sílice con el compuesto adsorbido. Una vez transferido a un erlenmeyer se añade un disolvente en el cual sea soluble el producto, se filtra el gel de sílice y una vez eliminado el disolvente tenemos el producto puro.
Es el método más utilizado para la separación de compuestos orgánico a escala preparativa. La fase estacionaria se deposita en el interior de una columna de vidrio que termina con una placa porosa que impide su paso y en un estrechamiento con una llave. La mezcla se deposita sobre la parte superior de la fase estacionaria mientras que la fase móvil atraviesa el sistema. Los compuestos van saliendo por separado de la columna y se recogen en fracciones, los más polares quedan más retenidos y para que salgan generalmente hace falta aumentar la polaridad del disolvente. El tiempo necesario para eluir un compuesto de la columna se llama tiempo de retención.
Depende de: Rendimiento Productividad Economía Escala de separación Velocidad de separación Presión Adsorbente Fase móvil Fase estacionaría