FUNDAMENTOS DE INGENIERÍA GENÉTICA Y GENÓMICA Grado en Biología
Departamentos de Bioquímica y Biología Molecular, I y Genética Facultad de Ciencias Biológicas. U.C.M.
ACTIVIDAD Nº 1 MÉTODOS PREPARATIVOS SOLUCIONES
APELLIDOS: NOMBRE:
EJERCICIO 1.1. A partir de 4 ml de un cultivo bacteriano (primer tubo de la serie indicada en
la figura) se tomó una alícuota cuyo volumen se indica encima de la flecha y se diluyó hasta
el volumen indicado en el segundo tubo. De manera similar se realizaron varias diluciones
tal como se indica. Finalmente, 100 µl de la última dilución se extendieron en una placa con
agar nutritivo. Tras su incubación a 37ºC apareció el número de colonias que se indica.
¿Cuál es el nº de células/ml presentes en cada una de las diluciones y en el cultivo original?.
SOLUCIÓN
volumen de alícuota 1 μl 1 μl 10 μl 100 μl
nº células en alícuota 2x107 2x104 50 50
volumen del tubo 4 ml 1 ml 4 ml 100 μl
nº células en tubo 8x1010 2x107 2x104 50
conc en tubo (cel/ml) 2x1010 2x107 5x103 5x102
EJERCICIO 1.2. Se desea realizar una reacción de restricción en un volumen final de 20 µl.
La mezcla de reacción ha de contener 2 µl de la disolución de enzima de restricción, BSA a
una concentración de 1 mg/ml, un tampón a una concentración 1x y 100 µg de DNA. Calcula
los volúmenes que deberán de tomarse de las correspondientes soluciones stock de: BSA
(20 mg/ml), tampón (10x) y DNA (50 mg/ml).
4 ml 1 ml 100 l
1 l
1 l
10 l
100 l
4 ml 50 colonias
