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Seminario microbiología clínica.
CASO CLÍNICO 1.
- ¿Qué es la disuria?
La disuria es la dificultad o dolor al orinar.
- ¿Cuál es el microorganismo causal más probable en el caso presentado?
Streptococcus agalactiae: Debido a que en infecciones producidas por este patógeno la madre puede ser asintomática y se puede producir un parto antes de término. Esta infección es grave debido a que puede producir una sepsis neonatal (alta mortalidad). Además, el niño presenta una respiración anormal inducida por la taquipnea, bradicardia y cianosis, síntomas propios de neonatos infectados con este patógeno.
- ¿Cómo llegarías a su identificación?
- Presencia de colonias β-hemolíticas en agar sangre.
- Prueba de la catalasa (-).
Como métodos complementarios a la identificación y como medida de seguridad para un correcto tratamiento del paciente:
- Emplear el medio de manitol salado, en este medio habrá crecimiento, pero como método diferencial de S. aureus este no virará a amarillo, produciendo un cultivo de colonias rojas al no fermentar el manitol.
- Medio Granada: Medio selectivo y diferencial para aislar e identificar a S. agalactiae a partir de muestras clínicas.
- Prueba de CAMP (+). Empleada para la identificación presuntiva de estreptococos del grupo B ( Streptococcus agalactiae ). Es una prueba definitiva en la identificación de dicho microorganismo puesto que es el único estreptococo β-hemolítico que produce una prueba de CAMP positiva.
- Test Pyr (-).
- Una característica morfológica sobresaliente al observar con el microscopio es la tendencia a crecer en cadenas ya que se trata de un estreptococo.
- Es una bacteria anaerobia facultativa.
- Son bacterias no esporuladas e inmóviles.
- En la tinción de Gram deberá identificarse como cocos Gram (+).
- ¿Cree que el procesamiento del urocultivo realizado a la madre y su interpretación fueron correctos? ¿Por qué?
No fue correcto debido a:
- A pesar de que el número de colonias es mayor de 100.000 ufc/ml, lo que significaría una bacteriemia significativa, al existir en la muestra células epiteliales y otro microorganismo se sospecha que no se ha tomado bien la muestra en la madre, por lo que habría que repetir la toma de muestra ya que la mujer está embarazada.
- La interpretación no es correcta porque se informó como un cultivo mixto y no se indicó la presencia de una infección en la paciente, a la cual tras ceder espontáneamente los síntomas no se le trató. Se debería haber hecho un aislamiento e identificación del microorganismo causante de la infección.
- No se realizó la identificación del microorganismo a pesar de que se sospechara de una contaminación y siendo el número de microorganismos muy elevado para haber sido rechazado sin más.
- Conociendo ya el microorganismo causal, ¿qué medidas se podrían haber adoptado para prevenir la infección en el recién nacido?
La única medida eficaz aceptada actualmente para interrumpir la transmisión vertical de Streptococcus agalactiae es la administración endovenosa de antibióticos intraparto a los gestantes portadores, durante un periodo de tiempo de 4 horas o más antes del nacimiento; ya que la administración de antibiótico durante la gestación es ineficaz puesto que no erradica la colonización vaginal de dicho patógeno (si se suprime el tratamiento de antibiótico se produciría la reinfección por vía rectal).
Otra medida de profilaxis sería la administración al comienzo del parto, o bien de penicilina G o bien de ampicilina intravenosa cada 4 horas hasta el final de parto.
Si hubiera alergia a β-lactámicos, estos fármacos se pueden sustituir por clindamicina o eritromicina intravenosas.
Eritromicina y otros macrólidos tiene afinidad de la subunidad ribosomal 50s inhibiendo así la translocación de la aminoacil ARN-t por tanto afecta síntesis proteica.
ANTIBIOGRAMAS
1. Antibiograma sobre Mycobacterium tuberculosis.
El medio utilizado para llevar a cabo el antibiograma para M. Tuberculosis es el medio enriquecido de Löwenstein-Jensen, el cual lleva base de huevo para dar un mayor número de resultados positivos.
El procedimiento más utilizado es el de Canetti, Rist y Grosset: consiste en determinar la proporción de bacilos resistentes a un determinado antimicrobiano que existe en la población bacteriana inicial. Para ello, se dispone de una serie de tubos con medios de Löwenstein y los diversos antimicrobianos a una concentración establecida. Se inoculan dos series de tubos, con dos diluciones de una suspensión bacilar, así como unos tubos control sin antimicrobiano.
En los tubos control se obtiene el crecimiento correspondiente al total de la población bacteriana inoculada y las colonias que crecidas en los tubos con antimicrobiano indicarán el número de bacilos resistentes a dicho antimicrobiano en la población analizada.
Se cuentan las colonias aparecidas en los tubos control y en los tubos con antimicrobiano, y si el crecimiento en éstos últimos es superior a la proporción crítica en relación con el crecimiento en los testigos, la cepa se considera resistente, si es inferior, sensible.
2. Antibiograma para Haemophilus Influenzae.
Para el antibiograma de H. Influenzae debemos preparar un medio especial que además de la base de Mueller-Hinton contiene 15ug/ml de beta-NAD, 15ug/ml de hematina bobina, 5mg/ml de extracto de levadura y un pH de 7.2 a 7.4. El medio se denomina Haemophilus test Premium (HTM).
Se cultiva directamente una colonia en el medio de Mueller-Hinton al 0,9% a partir de un cultivo agar chocolate con 20-24 horas de incubación. Debemos de ajustar una turbidez de 0,5 en la escala de Mac Farland y no superior, ya que en caso de H. Influenzae productor de beta lactamasas se puede conducir a resultados falsamente resistentes a cefalosporinas.
Los diferentes antimicrobianos que podemos incluir en el cultivo se clasifican en dos grupos. El grupo I tiene antimicrobianos como ampicilina (sola o con sulbactam), amoxicilina/ ácido clavulánico, cefaclor, cefuroxima, ceftriaxona o cefotaxima, cotrimoxazol (trimetoprima/sulfametoxazol) y cloranfenicol.
El grupo II recoge cefixima, cefepime, aztreonam, azitromicina o claritromicina, levofloxacina o ciprofloxacina u ofloxacina, rifampicina, tetraciclina y meropenem.
Tiene resistencias naturales a clindamicina y a lincomicina.
3. Antibiograma para Bacteroides
Al tratarse de un microorganismo anaerobio, requiere unas condiciones especiales para promover su crecimiento.
Se recomienda seguir las recomendaciones del NCCLS: " Method for antimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria".
Es importante probar la sensibilidad a los aislamientos recuperados de sitios estériles del cuerpo, los que son importantes clínicamente y tienen sensibilidad variables y especialmente los aislados en cultivos puros de especímenes correctamente recogidos. Los antibióticos probados deben incluir la Penicilina, una Penicilina del amplio- espectro, una Penicilina con un inhibidor de beta-lactamasa, Clindamicina, Cloranfenicol, una Cefalosporina de segunda generación (eg, Cefoxitin), más nuevas quinolonas, Metronidazoles y un carbapenémico.
La recomendación de la NCCLS sobre los métodos de antibiograma para los anaerobios incluye:
a) Dilución en agar : Para aquellos anaerobios que crecen bien en el medio. Utilizar medio de Brucella agar + Vitamina K + Hemina + Sangre de carnero. b) Dilución en caldo : Solo para Bacteroides. Utilizar caldo Brucella + Vitamina K + Hemina + Sangre de carnero. Preparar una suspensión de 0.5 McFarland e incubar a 35 ºC por 48 horas en anaerobiosis.
Seminario realizado por:
- (^) Aurora María Durán Ruíz.
- Cira Fernández Herrero.
- David Ferrer Cuadros.
- Javier Gutiérrez Ballesteros.
- Marta Jiménez Durán.
- Amanda Jiménez García.
