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Histología: Preparación de Tejidos, Tintas y Microscopía, Apuntes de Histología

El proceso de histología, desde la preparación de tejidos hasta su examen con el microscopio óptico. Se detalla la fijación, la composición química de las muestras, los diferentes tipos de tintas y su importancia, así como la importancia de la histoquímica y la citoquímica. Además, se presentan conceptos relacionados como la metacromasia, la reacción de Schiff y la autorradiografía.

Tipo: Apuntes

2020/2021

Subido el 26/09/2021

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Histología
Histología, también llamada anatomía microscópica, es el estudio científico de las
estructuras microscópicas de los tejidos vivos y órganos del cuerpo.
Preparación del tejido
El corte de rutina teñido con hematoxilina y eosina es la muestra que se utiliza con
mayor frecuencia.
El primer paso en la preparación de una muestra de tejido u órgano es la fijación para
conservar la estructura.
En el segundo paso, la muestra se dispone para su inclusión en parafina con el fin de
permitir su corte.
En el tercer paso, la muestra se monta en el portaobjetos de vidrio y se tiñe para poder
examinarla con el microscopio óptico.
La fijación se utiliza para:
Abolir el metabolismo celular.
Impedir la degradación enzimática de las células y tejidos por la autólisis
(autodigestión).
Destruir microorganismos patógenos tales como bacterias, hongos o virus.
Endurecer el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la
desnaturalización de moléculas proteicas.
histoquímica y citoquímica
Los procedimientos químicos específicos pueden proveer información acerca de la
función de las células y de los componentes extracelulares de los tejidos.
Los procedimientos histoquímicos y citoquímicos pueden tener su fundamento en la
unión específica de un colorante, en el uso de anticuerpos marcados con un colorante
fluorescente con un componente celular en particular o en la actividad enzimática
inherente de un elemento constitutivo de la célula.
Composición química de las muestras histológicas
La composición química de un tejido listo para una tinción de rutina difiere de la del
tejido vivo.
Los componentes que perduran después de la fijación son principalmente moléculas
grandes que no se disuelven con facilidad, en especial después de aplicar el fijador.
Estas moléculas, en particular las que reaccionan con otras moléculas semejantes para
formar complejos macromoleculares, que son las que suelen conservarse en un corte
histológico. Los siguientes son ejemplos de complejos macromoleculares grandes que
se conservan después del corte:
Nucleoproteínas formadas a partir de ácidos nucleicos unidos a proteínas.
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Histología Histología, también llamada anatomía microscópica, es el estudio científico de las estructuras microscópicas de los tejidos vivos y órganos del cuerpo. Preparación del tejido El corte de rutina teñido con hematoxilina y eosina es la muestra que se utiliza con mayor frecuencia. El primer paso en la preparación de una muestra de tejido u órgano es la fijación para conservar la estructura. En el segundo paso, la muestra se dispone para su inclusión en parafina con el fin de permitir su corte. En el tercer paso, la muestra se monta en el portaobjetos de vidrio y se tiñe para poder examinarla con el microscopio óptico. La fijación se utiliza para:

  • Abolir el metabolismo celular.
  • Impedir la degradación enzimática de las células y tejidos por la autólisis (autodigestión).
  • Destruir microorganismos patógenos tales como bacterias, hongos o virus.
  • Endurecer el tejido como resultado de la formación de enlaces cruzados o de la desnaturalización de moléculas proteicas. histoquímica y citoquímica Los procedimientos químicos específicos pueden proveer información acerca de la función de las células y de los componentes extracelulares de los tejidos. Los procedimientos histoquímicos y citoquímicos pueden tener su fundamento en la unión específica de un colorante, en el uso de anticuerpos marcados con un colorante fluorescente con un componente celular en particular o en la actividad enzimática inherente de un elemento constitutivo de la célula. Composición química de las muestras histológicas La composición química de un tejido listo para una tinción de rutina difiere de la del tejido vivo. Los componentes que perduran después de la fijación son principalmente moléculas grandes que no se disuelven con facilidad, en especial después de aplicar el fijador. Estas moléculas, en particular las que reaccionan con otras moléculas semejantes para formar complejos macromoleculares, que son las que suelen conservarse en un corte histológico. Los siguientes son ejemplos de complejos macromoleculares grandes que se conservan después del corte:
  • Nucleoproteínas formadas a partir de ácidos nucleicos unidos a proteínas.
  • Proteínas intracelulares del citoesqueleto. - Proteínas extracelulares en grandes aglomeraciones insolubles unidas a moléculas similares, como ocurre en la formación de las fibras de colágeno.
  • Complejos de fosfolípidos y proteínas (o hidratos de carbono) en las membranas. Muchos de los componentes de los tejidos se pierden durante la preparación de rutina de los cortes teñidos con H&E. Como los siguientes: - Glucógeno (hidrato de carbono intracelular común en el hígado y las células musculares)
    • Proteoglucanos y glucosaminoglicanos Fundamentos químicos de la tinción La hematoxilina y la eosina (H&E) son los colorantes de uso más frecuente en la histología. Los colorantes básicos como la hematoxilina (no es exactamente un colorante básico, pero actúa como uno) reaccionan con los componentes aniónicos de las células y de los tejidos (componentes que tienen una carga neta negativa). Los colorantes ácidos como la eosina reaccionan con los grupos catiónicos en las células y los tejidos; en particular, con los grupos amino ionizados de las proteínas. Metacromasia Ciertos colorantes básicos reaccionan con los componentes del tejido que cambian su color normal de azul a rojo o púrpura; este cambio de la absorbancia se llama metacromasia. La metacromasia ocurre por la presencia de polianiones en el tejido. Cuando estos tejidos se tiñen con una solución colorante básica concentrada, como el azul de toluidina, las estructuras celulares que tienen altas concentraciones de grupos sulfato y fosfato ionizados reaccionan con el colorante haciendo que su color azul se torne rojizo. Grupos aldehído y el reactivo de Schiff La reacción de ácido peryódico-reactivo de Schiff (PAS) tiñe de color rojo los hidratos de carbono y macromoléculas con abundancia de ellos. Se utiliza para demostrar glucógeno en las células, moco en diversas células y tejidos, la membrana basal subyacente epitelios y fibras reticulares en el tejido conjuntivo. Digestión enzimática La digestión enzimática para un componente específico (como glucógeno, ADN o ARN), se puede utilizar para confirmar la identidad del material que se tiñe.
  • Lente ocular (o un par de lentes oculares en los microscopios binoculares, de uso más común) a través de la cual se puede examinar directamente la imagen formada por la lente de objetivo. Otros sistemas ópticos incluyen los siguientes: microscopía de contraste de fase, microscopía de campo oscuro, microscopía de fluorescencia, microscopía de barrido confocal y microscopía de luz ultravioleta.

Diario reflexivo ¿Qué traje? Ya era de mi conocimiento el concepto de histología, así como una vaga idea de los procedimientos para la toma de muestra del tejido, y el uso del microscopio óptico para observarlo. ¿Qué aprendí? Algunas de las técnicas histológicas que se utilizan para el análisis del tejido. Como lo es la preparación del tejido para la muestra y la fijación. También aprendí como afectan y reaccionan los tejidos a los diferentes tipos de tintado, por último, también aprendí los diferente4s tipos de microscopios utilizados para la observación del tejido y sus diferentes usos. ¿Cómo lo aprendí? Principalmente, mediante la lectura de la primera unidad del libro de histología de Ross, técnicas histológicas, aunque también investigue por mi cuenta algunos términos desconocidos para mí, así como buscando diferentes imágenes para tener mas referencia visual de lo que estaba leyendo,