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Técnicas Histológicas: Fundamentos Generales y Preparación de Tejidos, Resúmenes de Histología

Técnicas histologicas - Fundamentos generales - preparación histológica de tejidos

Tipo: Resúmenes

2022/2023

A la venta desde 13/11/2023

martina-gomez-20
martina-gomez-20 🇦🇷

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Técnicas histológicas
Semana 14 - MMF1 !
————— Fundamentos generales - preparación histológica de tejidos —————
Pasos: !
——— Obtención de muestras
Necropsia (autopsia)
Sujeto muerto - obtengo bloque visceral y encéfalo
Biopsia
Sujeto vivo - trozo de tej para estudiarlo en microscopio y tener diag histopatológico
Piezas quirúrgicas
Tej extraído de intervención quirúrgica (tumores - org inflamados)
Método
Proceso
Producto / instrumento
Fijación
-Químico: inmersión en formol
diluido al 10%!
-Físico: congelación
Reducción -
macroscopía
Fijación
Formol diluido al 10%
Deshidratación
Alcohol etílico en concentraciones
crecientes
Aclaramiento
Pasarlo x xilol
Impregnación
Baños sucesivos de parafina
fundida
Inclusión
TACO !
Corte -
microtomo
Micrótomo (aparato equipado con
una hoja acero)
Método
1
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Técnicas histológicas

Semana 14 - MMF

————— Fundamentos generales - preparación histológica de tejidos —————

• Pasos:

——— Obtención de muestras Necropsia (autopsia) Sujeto muerto - obtengo bloque visceral y encéfalo Biopsia Sujeto vivo - trozo de tej para estudiarlo en microscopio y tener diag histopatológico Piezas quirúrgicas Tej extraído de intervención quirúrgica (tumores - org inflamados) Método Proceso Producto / instrumento

Fijación

  • (^) detiene autolisis (cel se autodestructivo x falta de oxigeno y produciendo daños irreversibles)
  • (^) Preserva el tejido —> mantener morfología del tej
  • (^) Formol: interrumpir procesos de degradación que aparecen tras la muerte celular, trata de conservar la arquitectura y composición celular lo + próxima posible a como se encontraba en el organismo vivo - (^) Químico: inmersión en formol diluido al 10% - (^) Físico: congelación

Reducción -

macroscopía

  • (^) Describo pieza que se observa (superficialmente y luego en cortes seriados), peso, medidas
  • (^) Seleccionó pieza a reducir
  • (^) Sector para colocar en cassettes de procesamiento

Fijación Devuelta se busca interrumpir proceso de degradación^ Formol diluido al 10%

Deshidratación

  • (^) Se elimina completamente el agua de la muestra para que se pueda beber el tejido en medios de inclusión que no sean hidrosolubles (alcohol etílico)
  • (^) Se pasa muestra de un alcohol al otro para deshidratar Alcohol etílico en concentraciones crecientes

Aclaramiento

Se consigue la sustitución del agente deshidratante x sustancia miscible con el medio de inclusión Pasarlo x xilol

Impregnación

  • (^) Rellenar o infiltrar la muestra histológica con el medio que se va a usar para la imbibicion del tejido
  • (^) Rellenar muestra histológica con parafina Baños sucesivos de parafina fundida

Inclusión

  • (^) Coloco tejido en casquete y coloco parafina líquida para formar bloques
  • (^) Bloque sólido —> TACO —> fragmento del tejido más medio de inclusión

TACO

Corte -

microtomo

  • (^) TACO se coloca orientado en el micrótomo
  • (^) Se obtienen cortes delgados (grosor para microscopía óptica varía entre 5 – 10 micrómetros (1milímetro = 1000 micrómetros)) Micrótomo (aparato equipado con una hoja acero) Método

Recuperación

del cierre y

pegado

  • (^) Cortes se colocan sobre portaobjetos (a veces cubierto con capa de albúmina o gelatina)
  • (^) Se los coloca el calor para desparafinar el corte y que permanezca pegado el vidrio Agua y calor

Aclaramiento -

desparafinacion

  • Extracción completa de la parafina con xilol Xilol

Rehidratación

  • (^) Desplazar el xilol del corte por agua
  • (^) Paso muestra por alcoholes en concentraciones decrecientes
  • (^) Deshidrató y rehidratado con alcohol Alcoholes en porcentajes decrecientes

Tinción -

coloración

  • Colorantes histológicos en su mayoría en solución acuosa Coloración de rutina:
  • (^) hematoxilina (basofilos) básico
  • (^) Eosina (acidofilas) acido

Presentación

Método Proceso Producto / instrumento ——— Técnicas histológicas Histoquímicas

  • (^) las que supongan una reacción química en la que intervienen moléculas pertenecientes al propio tejido
  • (^) La + utilizada —> reacción de PAS (Periodic Acid Schiff)
  • (^) Se utiliza para la detección de hidratos de carbono, libres o conjugados, cuando están en cantidades relativamente grandes en los tejidos Histoenzimática
  • (^) capacidad que tienen enzimas del tejido de mantener funcional su centro activo tras el proceso de fijación
  • (^) Estas enzimas y las células que los tienen se ponen de manifiesto mediante —> reacción enzimática —> los convierte de unos sustratos solubles e incoloros en productos insolubles y coloreados
  • (^) Sustratos —> específicos para el enzima y los productos se depositan en el lugar donde se produjo la reacción Inmunohistoquímica
  • (^) grupo de técnicas de inmunotinción que permiten demostrar variedad de antígenos presentes en las células o tejidos utilizando anticuerpos marcados
  • (^) técnicas se basan en: la capacidad de los anticuerpos de unirse específicamente a los correspondientes antígenos
  • (^) Reacción visible sólo si el anticuerpo está marcado con una sustancia que absorbe o emite luz o produce coloración.
  • (^) Se basa en la especificidad de una reacción entre un antígeno y un anticuerpo que está conjugado ya sea con un colorante fluorescente o partículas de oro