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Control de Crecimiento Microbiano: Dinámica, Agentes Físicos y Químicos - Prof. Hernández , Apuntes de Microbiología

Este documento aborda el tema del control de crecimiento microbiano, incluyendo la dinámica de crecimiento de poblaciones microbianas y objetivos de control. Se detallan diferentes métodos físicos y químicos de control, como la esterilización por calor, refrigeración y uso de agentes químicos. Se mencionan diversos agentes antimicrobianos, como oxido de etileno, aldehídos, fenol y compuestos fenólicos, alcohols, halógenos, metales pesados y especies reactivas del oxígeno.

Tipo: Apuntes

2020/2021

Subido el 09/05/2021

SaraValero_94
SaraValero_94 🇪🇸

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Tema 6: dinámica y control del crecimiento (agentes
físicos y químicos y métodos físicos de control).
Curva de crecimiento de una población microbiana
Un microorganismo no crece en tamaño sino en población. Fases:
1. Latencia: no aumenta un numero de viables con respecto del tiempo. Periodo
de adaptación de los microorganismo al medio y condiciones de cultivo, previo
al crecimiento.
2. Fase exponencial: fase durante la cual la población microbiana crece a ritmo
constante y máximo, duplicando su número de células a tiempos constantes.
3. Fase estacionaria: periodo durante el cual el número de células viables del
cultivo permanece constante
4. Fase de muerte: periodo de disminución del número de células viables.
Fundamento y conceptos: terminología relativa al control del
crecimiento microbiano.
Objetivos del control del crecimiento microbiano: mecanismos que permitan eliminar
los microorganismos, inhibir su crecimiento o destruirlos.
TERMINOLOGÍA RELATIVA AL CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
PROCESOS:
Esterilización: eliminación o destrucción de todos los microorganismos
celulares y acelulares viables , incluidas sus formas de resistencia, de un objeto
o hábito.
Desinfección: Eliminación, inhibición o destrucción de microorganismos
dañinos (células vegetativas) presentes en objetos y ambientes.
Saneamiento o higienización: Reducción de la población microbiana a niveles
seguros, según las normas de salud pública.
Antisepsia: Inhibición o destrucción de microorganismos sobre la superficie de
seres vivos.
Quimioterapia: Uso de agentes químicos para inhibir o destruir
microorganismos dentro de los tejidos del hospedador.
AGENTES ANTIMICROBIANOS: agentes que inhiben el crecimiento de los
microorganismos o los destruyen (esterilizantes, desinfectantes, productos de
saneamiento o higienizantes y antisépticos).
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Tema 6: dinámica y control del crecimiento (agentes

físicos y químicos y métodos físicos de control).

Curva de crecimiento de una población microbiana

Un microorganismo no crece en tamaño sino en población. Fases:

  1. Latencia: no aumenta un numero de viables con respecto del tiempo. Periodo de adaptación de los microorganismo al medio y condiciones de cultivo, previo al crecimiento.
  2. Fase exponencial: fase durante la cual la población microbiana crece a ritmo constante y máximo, duplicando su número de células a tiempos constantes.
  3. Fase estacionaria: periodo durante el cual el número de células viables del cultivo permanece constante
  4. Fase de muerte: periodo de disminución del número de células viables.

Fundamento y conceptos: terminología relativa al control del

crecimiento microbiano.

Objetivos del control del crecimiento microbiano: mecanismos que permitan eliminar los microorganismos, inhibir su crecimiento o destruirlos. TERMINOLOGÍA RELATIVA AL CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO PROCESOS:  Esterilización: eliminación o destrucción de todos los microorganismos celulares y acelulares viables , incluidas sus formas de resistencia, de un objeto o hábito.  Desinfección: Eliminación, inhibición o destrucción de microorganismos dañinos (células vegetativas) presentes en objetos y ambientes.  Saneamiento o higienización: Reducción de la población microbiana a niveles seguros, según las normas de salud pública.  Antisepsia: Inhibición o destrucción de microorganismos sobre la superficie de seres vivos.  Quimioterapia: Uso de agentes químicos para inhibir o destruir microorganismos dentro de los tejidos del hospedador. AGENTES ANTIMICROBIANOS: agentes que inhiben el crecimiento de los microorganismos o los destruyen (esterilizantes, desinfectantes, productos de saneamiento o higienizantes y antisépticos).

Objetivo del control de crecimiento bacteriano: eliminar los microorganismos, inhibir su crecimiento o destruirlos. Sufijos: cida: mata al organismo statico: inhibe su crecimiento. Factores que afectan a la eficiencia de un antimicrobiano:

  1. Tamaño de la población.
  2. Composición de la población.
  3. Concentracción o intensidad del agente microbiano: a mas concentración mas eficacia (normalmente).
  4. Duración de la exposición al agente microbiano.
  5. Temperatura: temperatura a la que esta lo que queremos esterilizar, a mas temperatura mas eficacia.
  6. Ambiente local: sitio donde esta lo que queremos esterilizar con unas condiciones físicas determinadas. Cuanto mas materia orgánica mas dificultad para hacerlo.

Métodos y agentes físicos del control: temperatura, filtración y

radiaciones.

 Temperatura: calor

Esterilización por calor húmedo

  • Modo de acción: desnaturaliza proteínas, degrada ácidos nucleicos y desintegra membranas (mayor eficacia al aumentar la temperatura).
  • Parámetros que miden la eficacia: o Tiempo de reducción decimal (D): tiempo necesario para reducir la población diez veces (90%). Ej: endosporas de Clostridium botulinum, población 10^12 , D 121 =0,204min. o Tiempo de muerte térmica: tiempo más corto requerido para matar todas las células a una temperatura determinada. Esterilización por calor húmedo autoclave. PASTEURIZACIÓN (no es esterilización!!!!! Es una higienizacion): destruccion de microorganismos por calor humedo a temperaturas controladas por debajo del punto de ebullición del agua.
  • Proceso No esterizante que destruye patógenos y reduce la carga total de microorganismos presentes.
  • Se usa con bebidas termolábiles como leche y cerveza.
  • La leche se pasteuriza de dos maneras:  Metodo tradicional: 30 minutos a 62,8 grados.  Métodos de alta temperatura y tiempo corto: 15 segundos a 72 grados. La industria láctea también esteriliza la leche a temepratura (UHT) Esterilización por calor seco:
  • Modo de acción: la muerte microbiana se produce por oxidación de los componentes celulares y desnaturalizacion de proteínas.

 Filtración

Se utiliza para desinfectar y esterilizar aire y soluciones termosensibles. Filtración de líquidos: filtros de membrana  Finas láminas (grosor alrededor de 0,1 mm) porosas de materiales poliméricos resistentes: acetato o nitrato de celulosa, policarbonato....  Tamaño del poro para retener bacterias: 0,2-0,4 micrometros (no efectivos para virus ni para micoplasmas). Filtros de aire: filtros hepa  Mascarilas, tapones de algodón de tubos y matraces.  Cabinas de flujo laminar: filtros de alta eficacia de retención de partículas de aire (HEPA, high-efficiency particulate air).

Agentes químicos de control: esterilizantes, desinfectantes y

antisépticos

AGENTES ESTERILIZANTES

Oxido de etileno:  Modo de acción: desnaturalización de proteínas por alquilación (sustitución de los hidrógenos de grupos –SH, -COOH y –OH por grupos alquilo –CH 2 -CH 2 -CH 2 OH).  Propiedades: microbicida y esporicida, muy penetrante, tóxico. Requiere esterilizadores especiales.  Usos: esterilización de material termosénsible, como pacas Petri, jeringas desechables, suturas, catéteres, válvulas del corazón...  Aldehídos:  Modo de acción: inactivación de proteínas, ácidos nucleicos y peptidoglucano, mediante alquilación y formando puentes cruzados.  Propiedades: microbicidas y esporicidas, tóxicos e irritantes.  Usos: o Fromaldehído: desinfectante muy eficaz de superficies de solución, esterilizante en forma gaseosa. o Glutaraldehído: desinfección de material de laboratorios y hospitales(solución al 2%, microbicida en 10 min, esporicida en 12 horas). AGENTES DESINFECTANTES Y ANTISÉPTICOSFenol y compuestos fenólicos:  Modo de acción: desnaturalización de proteínas y alteración de membranas celulares.  Propiedades: bactericidas, fungicidas, viricidas, estables, eficaces en presencia de materia orgánica.  Usos: o Desinfectantes: superficies de laboratorios y hospitales, industria teextil y la industria de la madera y el papel. o Antisépticos: (hexaclorofeno, triclosan, clorhexidina): jabones, lociones, cosméticos, desodorantes, dentífricos, colutorios.  En cirugía, lavado de manos, preparación de piel de pacientes. No recomendado en heridas abiertas o piel inflamada.  Desventajas: corrosivo, olor desagradable e irritación cutánea.  Alcoholes:

 Modo de acción: desnaturalización de proteínas y disolución de lípidos de membranas.  Propiedades: bactericidas, fungicidas y viricidas (solo virus con envoltura lipídica).  Usos: (soluciones acuosas al 70%): o Desinfectantes: superficies e instrumental de laboratorios y hospitales. o Antisépticos: lavado de la piel antes de las inyecciones. No son recomendables en heridas abiertas.  Halógenos: YODO (I 2 , sales de yodo y yodofósforos)  Modo de acción: oxidación de componentes celulares e inactivación de proteínas.  Propiedades: bactericidas, fungicidas y viricidas. o Antisépticos: lavado preoperatorio (Wescodney), tratamiento de heridas (Betadine). o Desinfectantes: hospitales y laboratorios (Wescodney). CLORO (Cl 2 , hipoclorito sódico y cálcico)  Modo de acción: oxidación de componentes celulares (ácido hipocloroso ClOH).  Propiedades: bactericidas y fungicidas, acción rápida, se inactivan por materia orgánica--> formación de compuestos organoclorados (algunos cancerígenos), irritan la piel, corrosivos.  Usos: o Desinfectantes: superficies de laboratorios, hospitales, hogares, etc.. Suministros de agua, piscinas.  Metales pesados (iones de Ag, Hg, Cu y Zn)  Modo de acción: sobre proteínas, desnaturalizándolas (a menudo por combinación con grupos –SH) o prepicipándolas.  Propiedades: microbicidas y microbiostáticos. Se inactivan en presencia de materia orgánica.  Usos: o Desinfectantes: Plata: solución de nitrato de plata al 1% utilizada para prevenir en neonatos gonorrea oftálmica (en muchos hospitales sustituida por eritromicida); sulfadiacina de plata en quemaduras. Mercurio: combinado con compuestos orgánicos se aplica a la piel y mucosas. Cinc: en colutorios bucales, utilizado como cloruro de cinc.  Especies reactivas del oxígeno (ozono y peóxidos) Modo de acción: oxidación de componentes celulares (proteínas)  Ozono: o Propiedaes: antimicrobiano muy eficaz se inactiva en presencia de materia orgánica. o Usos: antiséptico: desinfectante del agua (complemento y sustitución del cloro).

CLASIFICACIÓN DE LOS ANTIMICROBIANOS (ANTIBACTERIANOS)

Criterios de clasificación:Estructura: glucídicos (estreptomicina, vancomicina), macrólidos (eritromicina), quinonas (tetraciclina), β-lactámicos (penicilina), peptídicos (bacitracina), quinolonas (ácido nalidíxico).  Origen: Agentes sintéticos (análogos de factores de crecimiento, sulfamidas, quinolonas) y naturales (producidos por hongos y bacterias: penicilinas, macrólidos tetraciclinas…) = ANTIBIÓTICOS.  Dianas terapéuticas - mecanismo de acción: inhibidores de la síntesis de pared celular proteínas o lípidos, y de la replicación o transcripción del DNA.

  1. INHIBIDORES DE LA SÍNTESIS DE LA PARED CELULAR: (examen quimioterapia, diana general y diana terapeutica especifica. )  Betta-lactámicos: actúan a nivel de membrana e impiden la unión de nuevas unidades y crecimiento tridimensional. Se unen e inhiben ñas enzimas que forman el enlace cruzado entre tetrapéptidos.  Penicilinas  Cefaloporinas  Carbapenems  Monobactámicos  Glucopéptidos: interfieren en la membrana concretamente en el transporte mediante transportadores lipídicos. Se unen la redisuo terminal D-Ala-D-Ala e impide su incorporación al peptidoglicano en crecimiento.  Vancomicina  Teicoplanina  Cicloserina: actúan en el citoplasma durante la síntesis de precursores. Inhibe la incorporación de D-ala a los precursores.

 Bacitracina: actúan a nivel de membrana durante el transporte por transportadores lipídicos. Evitan la defosforilación del transportador lipídico lo que impide su regeneración.

  1. INHIBICIÓN DE SÍNTESIS DE PROTEÍNAS  AMINOGLICOSÍDICOS (Streptomyces, Micromonospora, Bacillus ) Modo de acción: se une irreversiblemente a la subunidad 30S e inhibe el complejo de iniciación funcional Formil-metionil-RNA transferasa. Kanamicina, Gentamicina, Estreptomicina...  TETRACICLINAS (Streptomyces) Modo de acción: se une a la subunidad 30 S e impide la entrada del aminoacil-RNA transferasa al locus A del ribosoma. La unión es reversible: BACTERIOSTÁTICO. Tetraciclina, Oxitetraciclina, Clortetraciclina...  CLORANFENICOL (Streptomyces venezuelae) Modo de acción: se une a la subunidad 50 S e inhibe la formación del enlace peptídico entre aminoácidos.  MACRÓLIDOS (LINCOSAMIDAS Y ESTREPTOGRAMINA) (Streptomyces ) Modo de acción: se unen a la subunidad 50S e inhiben la transpeptidación y la translocación. Muchos de estos antibioticos son bacteriostaticos, inhiben el crecimiento mientras esta presente si no está el microorganismo sigue creciendo.
  2. ANTIBACTERIANOS QUE AFECTAN AL METABOLISMO DE ÁCIDOS NUCLEICOS:
    1. Inhibición de síntesis de precursores (Sulfamidas y trimetroprim)  Sulfamidas: inhibidores competitivos del ácido p-Aminobenzoico.  Trimetroprim: inhibe por competición la acción de la dihidrofolato reductasa. Las sulfamidas y el trimetropilson inhibidores competitivos por sustrato de enzimas de la ruta del ácido folico.
    2. Inhibición de la replicación  Quinolonas y fluoroquinolonas: inhiben la topoisomerasa II y IV. Son muy obsoletos, no se usan casi solo para infecciones de orina leves.
    3. Inhibidores de la RNA polimerasa.  Rifampicina: es exclusivo para el tratamiento de tuberculosis. Agentes antivirales (no entran para este primer examen, sino detrás de cada tipo de virus). INTERFERONES: proteínas producidas por células de organismos vertebrados en respuesta a diversos inductores. Algunos interferones se producen como respuesta a la infección por virus y tienen propiedades antivirales. Antifúngicos (se veran cuando demos hongos).