MICROSCOPIO ELETTRONICO
Il MICROSCOPIO ELETTRONICO sfrutta un fascio di elettroni monocromatico, caratterizzati da un’elevata
frequenza e quindi una bassa lunghezza d’onda, in modo da aumentare il potere di risoluzione d
aumenta man mano che si riduce la lunghezza d’onda.
In questo modo si riesce ad entrare nel nucleo della cellula e visualizzare le strutture interne.
I due microscopi elettronici usati in ambito biologico sono:
TEM(ha d=100 volte maggiore dell’ottico)= MICROSCOPIO ELETTRONICO A TRASMISSIONE, esso
visualizza le immagini in tempo reali (come l’ottico) e non punto per punto. visualizza l’immagine
in tempo reale.
SEM (ha d=20 volte maggiore dell’ottico)= MICROSCOPIO ELETTRONICO A SCANSIONE, esso
ricostruisce l’immagine punto per punto. non visualizza l’immagine in tempo reale, ma viene
ricostruita.
Questi due microscopi hanno sia cose in comune e sia diversità:
…diversità…
•il TEM analizza le parti interne del campione (solo fettine), mentre il SEM (solo strutture) analizza le parti
esterne del campione(dando immagini più belle).
Il tem dato che è molto grande non è dotato di movimento perciò per focalizzare utilizza variazioni del
campo elettromagnetico che in ambito biologico sono di 1000 kilovolt.
•il TUBO OTTICO (=percorso che attraversano gli elettroni, è diverso; nel TEM è di circa 3mt, mentre nel
SEM è di circa 50cm.
•nel TEM il campione viene tagliato in maniera molto sottile (50-100 nm di spessore), il fascio di elettroni
lo attraversa e vengono proiettati su uno schermo fluorescente da un oblò (posto a 45°) in questo modo si
va ad eccitare lo SCHERMO FLUORESCENTE(=posto alla base del microscopio) che si illumina di luce propria
quando colpito dagli elettroni, e ci restituisce con ombre quello che la luce ha incontrato attraverso il
campione. in particolare gli elettroni quando colpiscono il campione vengono deviati e creano sfumature
di grigio che ci permettono di capire di che struttura si tratta.
Nel SEM quando il fascio primario di elettroni arriva sul campione, generano nel campione dei propri fasci
elettromagnetici creando elettroni secondari, retodiffusi(provengono dalla parte più bassa del campione),
raggi x ecc. si originano in seguito alla collisione degli elettroni con gli atomi che compongono il
preparato.
Il SEM ha poi dei COLLETTORI che raccolgono gli elettroni e li rielaborano elettronicamente creando un
immagine rielaborata. l’immagine quindi è ricostruita punto per punto in base agli elettroni che arrivano
al collettore(rivelatore).
Essi sono posti a diversa altezza e in base all’altezza in cui si trovano raccolgono diverse tipologie di
elettroni o di radiazioni e in base al tipo di elettrone/radiazione raccolta, essa CORRISPONDE A UNA
DIVERSA PROFONDITÀ DEL CAMPIONE. immagini tridimensionali con una certa profondità.
•nel TEM il potere di risoluzione è di 0,2-1mm con 200/500mila ingrandimenti massimi virtuali.
Nel SEM la risoluzione è maggiore del tem, con 20/100mila ingrandimenti massimi virtuali.
…in comune…
•SORGENTE è un fascio di elettroni che proviene da un FILAMENTO DI TUNGSTENO(sostituito da un
puntino di esacloruro di lantanio) o di CRISTALLO. l’anodo(+) stacca gli elettroni dalla sorgente e li
immette nel vuoto che vengono attratti dal catodo(-).
COME VIAGGIANO GLI ELETTRONI??
La corrente non viene trasmessa nell’aria in quanto le particelle di gas sospese devierebbero questa
corrente.
