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Biotecnologia
Tipo: Ejercicios
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Práctica 2
DNA polimórfico amplificado al azar (RAPD)
CUESTIONARIO PREVIO (Entregar junto con la bitácora al inicio de la práctica)
El polimorfismo genético se define por la existencia de varios alelos (formas diferentes de un mismo gen) en una población. Este fenómeno resulta de mutaciones genéticas. Hablamos de polimorfismo (que viene de las palabras griegas "poli" -múltiples- y "morfismo" -forma-) cuando estas formas representan al menos al 1% de la población. El polimorfismo es uno de los elementos de la diversidad genética que responde a menudo a la necesidad de adaptación a un ambiente determinado
o especies diferentes. En especies para las que no se cuenta con suficientes
datos genómicos previamente publicados, o bien para las cuales se quiere
obtener información genética de manera rápida y relativamente económica, se pueden emplear marcadores moleculares inespecíficos. Estos marcadores usan iniciadores (también llamados oligonucleótidos o primers) que amplifican al azar diferentes regiones en el genoma y generan un patrón de productos de PCR o huella genética (Wolfe y Liston
aleatorias no-palindrómicas, con un contenido de G + C entre 50 y 80%, (Lynch y Milligan 1994). La secuencia del iniciador es elegida a priori de manera arbitraria y sólo se utiliza un iniciador por reacción, que actuará al mismo tiempo como iniciador sentido y antisentido. Los fragmentos obtenidos se visualizan como un patrón de bandeo característico del individuo y cada banda observada se considera un locus
Actualmente existe una gran cantidad de iniciadores de RAPDs reportados que se encuentran disponibles para realizar ensayos en nuevas especies de interés.
Cuando se desea trabajar con una especie para la cual no existen trabajos publicados con estas técnicas, se recomienda investigar los iniciadores utilizados en el mismo género o la misma familia a la que pertenece la especie de interés. Cuando esto no sea posible, se recomienda utilizar iniciadores universales desarrollados para diversos organismos como por ejemplo la serie No. 9 de la Unidad de Servicios de Proteínas y Ácidos Nucleicos (NAPS) de la Universidad de Columbia Británica, Vancouver, Canadá, para ISSRs; o la serie OP-A y OP-B de Operon Technologies, Estados Unidos, para RAPDs.
Práctica 3
Degradación de contaminantes: cinéticas de crecimiento y degradación.
Actividades Previas
Debido a su persistencia, toxicidad y capacidad de bioconcentración en las aguas, el suelo, los alimentos, los animales (terrestres y marinos) y el hombre.
Método espectrofotométrico: Se basan en la existencia de una relación directa entre el número total de microorganismos presentes en una muestra y su valor de turbidez. Tras la determinación de la turbidez de la suspensión celular mediante espectrofotometría, el resultado se expresa en unidades de absorbancia.
Actividades Previas
Metanógenicas
No se obtendrían los mismos resultados, ya que las bacterias que actúan en la producción tienen una temperatura ideal para su producción al bajar o aumentar la temperatura se estaría modificando las condiciones en las que este organismo trabaja y a temperaturas tan drásticas podría hasta inhibir completamente la actividad de la bacteria.
Se debe a la producción del gas en el dispositivo, ya que como se encuentra sellado, no libera ningún tipo de gas provocando acumulación en este y por consiguiente una ligera presión.
Como la bacteria sigue produciendo gas, y al mismo tiempo presión en el dispositivo, es necesario liberar CO2, para evitar alguna explosión y para calcular una producción de metano ideal.
Ventajas energéticas: Es una fuente de energía renovable, de uso eficiente y de generación distribuida en el desarrollo rural.
Ventajas ambientales: La descontaminación de residuos y reducción contaminantes del suelo, aire y agua.
Ventajas agrícolas: Es un fertilizante natural, genera un efluente rico en nutrientes como el nitrógeno, fósforos, potasio o magnesio.
Ventajas sociales: Es un auto combustible de energía, ideal para el desarrollo de proyectos energéticos de comunas rurales aisladas de los servicios de distribución eléctrica convencional.