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“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ”
UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO
FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CURSO:
• BIOLOGIA PRACTICA.
TEMAS:
• ESTRUCTURA DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
• CÉLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS
• PREPARADOS EN SECO Y EN FRESCO.
INTEGRANTES:
• ALFARO ARROYO, NAMIE FERNANDA.
• AMBROCIO VASQUEZ, LUCERO.
• CIPRIANO MEJIA, CRISTAL ASHLY.
• PAUCAR CAMACHO, ROBINSON.
• ROJAS MIJAHUANCA, DAYAN NICOLE.
• VALLES BAZÁN, LEYLA CAROLIN.
DOCENTES:
• MOYA FERNANDEZ, WALTER.
• CABRERA SALINAS, JESUS ORLANDO.
TRUJILLO – PERÚ
CIENCIAS AGRARIAS
I. INTRODUCCIÓN
1. LA CÉLULA
Una célula es la unidad de vida más pequeña, anatómica y funcional de los seres vivos. Las células pueden aparecer aisladas o agrupadas formando organismos pluricelulares. En ambos casos la célula es la estructura más simple a la que consideramos viva. Hoy se reconocen tres linajes celulares presentes en la Tierra: las arqueas y las bacterias, que son procariotas unicelulares, y las células eucariotas, que pueden ser unicelulares o formar organismos pluricelulares. Las procariotas (anterior al núcleo) no poseen compartimentos internos rodeados por membranas, salvo excepciones, mientras que las eucariotas (con núcleo verdadero) contienen orgánulos membranosos internos. Uno de los compartimentos membranosos de las células eucariotas es el núcleo. Todas las células se parecen y responden a un patrón común por más diversas que sean. Las células de organismos pluricelulares son diferentes en su función, por ser distintas estructuralmente, pero todas concuerdan con un patrón común. Por ejemplo, aquellas especializadas en las síntesis de lípidos, tendrán mayor desarrollo del retículo endoplasmático liso y serán distintas de las neuronas especializadas en la trasmisión de impulsos nerviosos, cuya especialización es tan grande que pierden su capacidad de reproducirse. A pesar de las semejanzas y diferencias entre las células y que todas cumplen con los postulados en la Teoría Celular, se distinguen dos grandes tipos de células: PROCARIOTAS (sin núcleo verdadero) y EUCARIOTAS (con núcleo). Principales características comunes entre células eucariotas y procariotas: ✓ En ambos tipos celulares el ADN es el material genético. ✓ Ambos tipos celulares posen membranas plasmáticas como limite celular. ✓ Poseen ribosomas para la síntesis proteica. ✓ Poseen un metabolismo básico similar. ✓ Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras. Las eucariotas son organismos cuyas células poseen un sistema de endomembranas (membranas internas) muy desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan Organelas donde se llevan a cabo numerosos procesos celulares. De hecho, el más sobresaliente de estos Organelas es el núcleo , donde se localiza el ADN. Justamente, el termino eucarionte, significa núcleo verdadero (eu: verdadero, carionte: núcleo). Por lo tanto, las células eucariotas, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por membranas. De esta forma es más eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una pequeña parte del volumen celular total. Además de la cadena respiratoria están altamente organizados gracias a la localización de las enzimas en diferentes estructuras de membrana. Por otra parte, las membranas también impiden la aparición de sustratos en forma inespecífica en distintas regiones de la célula, ya que actúan como barrera selectiva. En cuanto al tamaño, podemos decir que en promedio una célula eucarionte es diez veces mayor que la célula procarionte. En cuanto al material genético, podemos decir que el ADN eucariota posee una organización mucho más compleja que el ADN procarionte.
2. PREPARADOS EN SECO Y EN FRESCO
“Los preparados en fresco o en seco son métodos de análisis que nos van a permitir, gracias al microscopio y otras herramientas de laboratorio, la visualización de una complejidad de elementos que a simple vista no son captados por el ojo humano. Desde la invención del primer microscopio, sé tenía una idea de la existencia de organismos cuantiosamente pequeños, pero con el tiempo surgió algo más sofisticado. El microscopio “óptico”. Ahora si era posible visualizar subestructuras, líquidos e incluso la verdadera forma del objeto en observación; cosas que no se podían apreciar con verdadera exactitud antiguamente. Pero no solo este instrumento ayudaba en la visualización de elementos muy pequeños. Había que valerse de ciertos procedimientos que permitieran una mejor proyección de la imagen en la lente del microscopio. Uno de ellos vendría hacer los preparados, ya se sean en fresco o en seco, y que iban a jugar, por separado, un papel preponderante una investigación microscópica” 2.1 VORTICELLA EN FRESCO (AGUA DESTILADA) DEFINICIÓN Es un microorganismo conocido como Vorticella que es un género de protozoos. Son microorganismos unicelulares ciliados de agua dulce que viven en solitario o en grupos, y se fijan al sustrato con un pedúnculo contráctil, es decir una especie de filamento. OBSERVACIÓN Su boca está rodeada por una corona de cilios (como pelitos), con los cuales forma una corriente de agua que arrastra las bacterias que come y que posteriormente son dirigidas en vacuolas digestivas. Ocasionalmente, pueden contraer violentamente su cuerpo ante estímulos externos. También aparece las amebas que es un protozoo caracterizado por su forma cambiante, puesto que carece de pared celular. La ameba es un organismo de nutrición heterótrofa, pues de alimenta de toda clase de plantas y animales microscópicos, de bacterias y de otras células.
2.2 ROTÍFERO (AGUA DESTILADA)
DEFINICIÓN
Son organismos microscópicos, acuáticos y semiacuáticos. Juegan un papel fundamental en la cadena trófica alimentaria de los ecosistemas acuáticos tanto dulce como salado. OBSERVACIÓN Se alimentan de detritos orgánicos particulados, bacterias, algas unicelulares y protozoos. Comen partículas de hasta 10 micrómetros de tamaño. Al igual que los crustáceos, los rotíferos contribuyen al reciclaje de nutrientes. 2.3 CILIADOS (AGUA ESTANCADA) DEFINICIÓN Son protistas ciliados con forma ovalada, habituales en aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. Son probablemente los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por la ciencia. OBSERVACIÓN Se observa los movimientos de sus cilias y se forman vacuolas nutritivas y los residuos son expulsados por las vacuolas fecales. 2.3.1 CANDIDA ALBICANS (SECRECIÓN VAGINAL) DEFINICIÓN Se trata de un hongo presente de forma habitual en la flora intestinal y vaginal de la mujer que produce infección cuando se reproduce de forma acelerada.
COLORACIÓN DE CÉLULAS ANIMALES (MUCOSA LABIAL)
El compuesto de la mucosa bucal está constituido por celular de un contorno irregular, prácticamente incoloras a la luz blanca, por lo que, para su observación es preciso realizar un proceso previo de tinción, en este caso son azul de metileno, que permitirá observar un citoplasma granulado y un núcleo claramente diferenciado. La preparación se muestra una visión parecida a un mosaico formado por células planas, poligonales, más o menos irregulares; abundan las células aisladas, en cutas caras se perciben los trazos de inserción de unas células con otras. II. OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL: ➢ Identificar la presencia de células eucariotas y procariotas a través del microscopio óptimo. OBJETIVOS ESPECÍFICOS: ➢ Reconocer la estructura y funcionamiento del microscopio óptico. ➢ Identificar y diferenciar los preparados frescos y preparados secos. ➢ Observar e identificar las características comunes y diferenciales de las células eucariotas y procariotas. ➢ Conocer los métodos y técnicas de las coloraciones comunes. ➢ Reconocer la importancia de diferenciar las bacterias Gram positivas y Gram negativas.
III. RESULTADOS:
3.1. PREPARADOS EN FRESCO:
3.1.1. OBSERVACIONES MICROSCÓPICAS DE LA LETRA “E”
3.1.2. OBSERVACIÓN DE ORGANISMOS UNICELULARES DE VIDA
LIBRE.
AGUA ESTANCADA
Observación Vorticella sp^ (protozoario) Coloración Sin coloración Aumento Observación Rotíferos Coloración Sin coloración Aumento
4X. 10X= 40X
Objetivo Ocular
10X. 10X= 100X
Objetivo Ocular
40X. 10X= 400X
Objetivo Ocular
100X. 10X= 1000X
Objetivo Ocular 10 X. 10X= 10 0X Objetivo Ocular 40 X. 10X= 40 0X Objetivo Ocular
3.2. PREPARADOS EN SECO:
3.2.1. COLORACIÓN SIMPLE DE CÉLULAS EPITELIALES:
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS ANIMALES
Observación Células vegetales Muestra Catáfila de cebolla Coloración Azul de metileno Aumento Observación Células epiteliales planas Muestra Mucosa labial Coloración Azul de metileno Aumento Observación Células epiteliales planas Muestra Mucosa labial Coloración Safranina Aumento
10 X. 10X= 10 0X
Objetivo Ocular 100 X. 10X= 100 0X Objetivo Ocular 10 X. 10X= 10 0X Objetivo Ocular
3.2.2. COLORACIÓN DIFERENCIAL DE GRAM: OBSERVACIÓN DE
CÉLULAS PROCARIOTAS
Observación Bacterias Gram positivas y Gram negativas Muestra Sarro dental Coloración Gram Aumento Observación Bacilos Gram positivos Muestra Mucosa vaginal Coloración Gram Aumento
100 X. 10X= 100 0X
Objetivo Ocular 100 X. 10X= 100 0X Objetivo Ocular
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
https://www.diferenciador.com/celula-eucariota-y-celula- procariota/#:~:text=La%20c%C3%A9lula%20eucariota%20tiene%20una, est%C3%A1%20esparcido%20en%20el%20citoplasma.&text=C%C3%A lula%20con%20un%20n%C3%BAcleo%20definido,que%20contiene% el%20material%20gen%C3%A9tico. https://core.ac.uk/download/pdf/154797545.pdf https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/6-optico.php https://seleccionesavicolas.com/pdf-files/2012/2/6536-diferenciando- bacterias-gran-y-gram.pdf https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii- 3 - gram.htm#:~:text=El%20citoplasma%20de%20las%20c%C3%A9lulas,ba cterias%20de%20pared%20Gram%20negativa). http://132.248.48.64/repositorio/moodle/pluginfile.php/1729/mod_resource /content/3/contenido/index.html#:~:text=Por%20medio%20de%20la%20ti nci%C3%B3n,se%20utilizan%20durante%20la%20tinci%C3%B3n. VII. ANEXOS (CUESTIONARIO) 1) Aparte del tamaño del objeto observado, ¿Qué otras diferencias notas en las 4 imágenes? Se observa que el lente al ser más grande tiene mayor vista y mayor acercamiento hacia las muestras. Por tanto, se pueden apreciar con mejor detalles. Sin embargo, con el objetivo de 100X, no se puede observar el preparado, ya que contiene agua y aceite de cedro provocando combinarse. 2) ¿Qué es poder de resolución? El poder de resolución es la distancia mínima a la que se pueden discriminar dos puntos. Este límite viene determinado por la longitud de onda de la fuente de iluminación, en este caso la luz visible. 3) ¿Qué características presentan los preparados en fresco?
- Técnica fácil de realizar que detecta la presencia de bacterias y su movilidad.
- La muestra está sumergida en líquido y no existe ninguna sustancia entre la lente frontal del objetivo y el preparado.
- La sustancia se encuentra fija en el portaobjeto.
4) ¿Qué ventajas y desventajas presentan este tipo de preparados?
- Ventajas: Permite observar la movilidad, tamaño, forma de agrupación de los microorganismos en su estado natural.
- Desventajas: La observación es difícil por el continuo movimiento de los organismos y por la escasa diferencia entre los índices de refracción del medio y los microorganismos. No hay buen contraste. 5) ¿Qué diferencias encuentras entres los preparados en fresco y e seco?
- Los preparados en seco requieren que la sustancia a observar se encuentre fija a la lámina portaobjeto. Este proceso de fijación consta de los siguientes pasos: extensión, frotis, fijación propiamente dicha y coloración diferencial. Se pueden observar bajo las 4 resoluciones.
- Los preparados en fresco constan de los siguientes pasos: extensión, frotis, fijación y coloración simple. No se pueden observar bajo la resolución de 100x, a excepción de que se use aceite de cedro el cual aumenta la resolución de un microscopio mediante la inmersión del lente objetivo y el espécimen en un aceite transparente de elevada refracción. 6) ¿Qué ventajas y desventajas tiene la coloración diferencial respecto a la coloración simple?
- Ventajas:
- Es un método rápido y sencillo.
- Permite observar la forma, el tamaño y la agrupación de microorganismos.
- Permite diferenciar bacterias Gram positivas de Gram negativas.
- Permite saber si la microbiota es mixta o monoespecífica.
- Desventajas:
- Algunas bacterias pueden no tomar la coloración de Gram.
- Tiñe débilmente bacterias sin pared celular. 7) ¿Cómo explica que algunas bacterias se colorean con el cristal violeta y otras, con la safranina? El citoplasma de las células que han perdido el cristal violeta se tiñen con otro colorante (safranina). La diferencia de color se relaciona con el tipo de pared bacteriano: células de color violeta (bacterias de pared Gram positivas) y células de color rosa (bacterias de pared Gram negativa). En realidad la diferencia de color no es específica de la pared bacteriana: todas las células sin pared (como las animales) pierden fácilmente el cristal violeta (se verán de color rosa). Todas las células con pared gruesa (como las de hongos) se verán de color violeta. La correlación entre el color y el tipo de pared solo tiene sentido con células bacterianas (salvo excepciones).
