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Ejercicios capítulo 16, Apuntes de Biología Molecular

Ejercicios de B. Molecular del cap 16

Tipo: Apuntes

2020/2021
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Subido el 21/05/2021

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UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA
89
ÁREA BIOLÓGICA BIOMÉDICA
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE
LA SALUD
TITULACIÓN – MEDICINA
SECCIÓN PRECLÍNICA
BIOLOGÍA MOLECULAR
TRABAJO GRUPAL
POR:
Yeleny Bermeo
David Quezada
Mercedes Toscano
TEMA:
EJERCICIOS DE INTEGRACIÓN CAPÍTULO 16
BIOLOGÍA
MOLECULAR
Stefania Cevallos
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¡Descarga Ejercicios capítulo 16 y más Apuntes en PDF de Biología Molecular solo en Docsity!

UNIVERSIDAD TÉCNICA PARTICULAR DE LOJA

89

ÁREA BIOLÓGICA BIOMÉDICA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE

LA SALUD

TITULACIÓN – MEDICINA

SECCIÓN PRECLÍNICA

BIOLOGÍA MOLECULAR

TRABAJO GRUPAL POR:  Yeleny Bermeo  David Quezada  Mercedes Toscano TEMA: EJERCICIOS DE INTEGRACIÓN CAPÍTULO 16

BIOLOGÍA

MOLECULAR

Stefania Cevallos

1. La enfermedad de Parkinson (EP) se considera la segunda enfermedad neurodegenerativa en cuanto a prevalencia, y afecta de 1 a 2% de las personas en edad madura. Es de origen multifactorial, por interacción de factores ambientales y uno o más genes que confieren susceptibilidad. Los pacientes con esta afección presentan un 80% de muerte neuronal; y se ha observado que en el citoplasma de las neuronas sobrevivientes hay inclusiones proteicas de α-sinucleína, codificadasinucleína, codificada por el gen SNCA , conocidos como cuerpos de Lewy. Diversos polimorfismos en este gen se han relacionado con EP dominante, esporádica y en otras formas de demencia, con alteraciones en los cuerpos de Lewy, por lo que se propone que estos polimorfismos pueden afectar la agregación proteica e influir en el desarrollo de EP (Ramírez-sinucleína, codificadaJirano L.J., 2006). Para estudiar la posible vinculación del polimorfismo, 116C-sinucleína, codificadaG, se requiere la búsqueda del genotipo en pacientes con EP y en individuos sanos, mediante la técnica de PCR y la posterior digestión con enzimas de restricción de los productos de PCR. El fragmento del gen en el cual se encuentra la parte polimórfica de la α- sinucleína es: 91 ↓ 5’- CGCGGAAGTG AGGTGCGTCG GGGCTGCAGC GCAGACCCCG GCCCGGCCCC TCCGAGAGCG TCCT- GGGCGC TCCCTCACGC CTTGCCTTCA AGCCTTCTGC - 3’

Iniciadores, ARN, PCR en tiempo real, constitutivo, curva estándar ADN polimerasa, transcriptasa inversa, uracil-n- glicosilasa, punto final, electroforesis, desnaturalización, ADNc

  1. De una reacción de retrotranscripción in vitro se obtiene: ADNc
  2. Extracción de ARN de la muestra es el primer paso para la realización de una RTPCR
  3. Por la acción de la transcriptasa inversa se obtiene una molécula de ssADNc1.
  4. La transcriptasa inversa utiliza las cadenas sencillas de ADNc como molde para la síntesis de moléculas de cadena doble
  5. El ARN se inserta en vectores de clonación y se someten al proceso de clonación.
  6. Los iniciadores son los reactivos clave para una PCR especifica.
  7. La PCR en tiempo real es una modalidad de PCR que emplea sondas TaqMan.
  8. Se denomina gen constitutivo a aquel cuya expresión no se modifica con las condiciones experimentales.
  9. La PCR cuantitativa requiere forzosamente la interpolación de las muestras contra una electroforesis
  10. La modalidad de punto final presenta el inconveniente de que la diferente cantidad de material de inicio da lugar a la misma cantidad de producto final debido a la saturación.
  11. A la temperatura de desnaturalización se destruyen estructuras secundarias del ADNc y corresponde a los 95°C.
  12. La enzima uracil – n – glicosilasa elimina los residuos de uracilo del ADNss o ADNds previniendo que amplicones sirvan de molde en una PCR posterior.
  1. La visualización del producto de amplificación se realiza mediante una electroforesis. 3. La PCR para la detección del genoma del VHB genera un amplicón de 325pb. Interprete el siguiente gel obtenido tras procesar el suero de tres pacientes sospechosos de portar la infección. a) ¿Cuál paciente(s) porta el genoma del VHB en su sangre? Es el paciente 2 b) ¿Cuál paciente(s) es negativo a la infección? Los pacientes 1 y 3 c) ¿Cómo interpreta el hecho de que la banda de P1 sea más intensa que la de P3? La cantidad de producto amplificado es mayor en la banda del paciente 1 que en la del paciente 2. ANEXO