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Maria Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación Guía 115
ADN, ARN E INFORMACIÓN
LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Los ácidos nucleicos fueron descubiertos en 1869 por Miescher, en el pus de los vendajes de heridas, pero su papel en la herencia y control de la actividad celular solo comenzó a esclarecerse a mediados del siglo XX con la propuesta de J. D. Watson y F. Crick (1953) de un modelo helicoidal para la molécula de ADN.
La doble hélice representa, sin duda, un marco fundamental en la historia de la Biología Molecular. En las dos décadas siguientes fueron esclarecidos el código genético y los mecanismos de transmisión de la información dentro de la célula.
En la enseñanza de Biología o Ciencias, este tema permite dar a los alumnos la posibilidad de entender y acompañar los avances posteriores de la Biotecnología.
Desde el punto de vista químico, los ácidos nucleicos son macromoléculas formadas por unidades de nucleótidos. Un nucleótido resulta de la asociación de tres tipos de elementos: una molécula de ácido fosfórico, un azúcar de cinco carbonos (ribosa o desoxirribosa) y una base nitrogenada: adenina, citosina, guanina, timina o uracilo. Mediante la unión entre el ácido fosfórico de un nucleótido y la base nitrogenada de otro se forman cadenas.
En las células procariotas, existe una molécula grande y circular de ácido desoxirribonucleico (ADN) formando un cromosoma y una o dos moléculas de ADN de estructura circular, llamadas plásmidos. En las células eucariotas, varias moléculas lineales de ADN dentro del núcleo celular forman los cromosomas. Estos también se encuentran en cloroplastos y mitocondrias.
Además de ADN, la célula cuenta con ácidos nucleicos en que el azúcar desoxirribosa es sustituido por ribosa y la timina por uracilo. Ya sea en el núcleo o en el citoplasma, los ácidos ribonucleicos (ARN) cumplen diversas funciones, tanto en la síntesis de proteínas como en la regulación de la expresión de los genes. En este texto sólo nos referiremos a un tipo de ARN, el ARN mensajero (ARNm).
LA REPLICACIÓN DE LA INFORMACIÓN (del ADN al ADN)
En el modelo de Watson y Crick, la doble hélice está formada por dos cadenas de nucleótidos formando una figura parecida a una escalera de cuerda, torcida en forma helicoidal. En dicha escalera, el ácido fosfórico o el azúcar son las partes verticales (pasamanos) y las bases nitrogenadas son los escalones (Figura 1).
Figura 1. La composición del ADN (^) Esqueleto de azúcar-fosfato
Bases
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Las uniones entre las bases ocurren siempre del mismo modo: la adenina (a) se une a la timina (t), y la citosina (c) a la guanina (g). Cuando en una cadena la secuencia de bases es agtacg, en la otra cadena será tcatgc. La regla de complementariedad de las bases (a- t y c-g) permite que cada cadena sirva de molde para la síntesis de una nueva molécula (Figura 2). La auto-duplicación del ADN permite que, en el momento de la división celular, cada una de las dos células hijas reciba una copia del material genético, con las instrucciones necesarias para la construcción y el funcionamiento del individuo. Pequeños errores en la replicación del ADN introducen cambios en la secuencia y, por consiguiente en la información genética. Su frecuencia aumenta en presencia de algunos agentes químicos y físicos como la luz ultravioleta y los rayos X.
LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN (del ADN al ARN) El funcionamiento de una célula depende en gran medida de las proteínas. Estas cumplen un papel fundamental para los seres vivos, ya sea como componentes estructurales, o bien como sustancias de reserva. También pertenecen al grupo de las proteínas las enzimas, moléculas de acción catalítica, y los anticuerpos, moléculas que participan en la defensa del organismo. Las proteínas están formadas por 20 aminoácidos diferentes, la unión de varios aminoácidos forma una cadena peptídica que se caracteriza no solo por el número y el tipo de aminoácidos que la componen, como también por la secuencia en que se encuentran. De dicha estructura dependerá la configuración espacial de la molécula y su función. ¿Cómo puede un segmento de ADN determinar la secuencia de una proteína? El código es simple, a cada triplete de bases corresponde un aminoácido. Cambios en la secuencia de bases del ADN pueden tener como consecuencia la sustitución de un aminoácido por otro. La célula “prende” y “apaga” los genes de acuerdo con sus necesidades. Cuando un gen se activa, la información no pasa directamente del ADN a los aminoácidos, siendo necesaria la intervención de un intermediario, que es el ARN mensajero (ARNm). Obsérvese, que además de la diferencia citada en relación al azúcar, el ARNm es una molécula de única cadena y de menor longitud que el ADN. El ARNm es sintetizado como una cadena complementaria de una de las hebras (hebra molde), de modo que en la secuencia la única diferencia con la hebra codificante es la sustitución de timina por uracilo. Una vez transcripta la información, el ARNm la lleva al citoplasma para el encuentro con la maquinaria celular responsable del montaje del péptido.
LA TRADUCCIÓN DE LA INFORMACIÓN (del ARNm a proteína) La traducción del lenguaje de los ácidos nucleicos al lenguaje de las proteínas permite el montaje de la cadena de aminoácidos en un cierto orden. De este modo, se establece en la célula un flujo de información genética que sigue una dirección única: del ADN al ARN, del ARN al péptido. Una excepción a esta regla son los retrovirus, cuyo material hereditario es el ARN, porque cuentan con una enzima (transcriptasa reversa) que les permite transcribir la información en sentido ARN-ADN.
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Figura 2. La duplicación del ADN y la formación de dos moléculas-hijas de secuencia semejante a la molécula-madre.
ADN
Replicación de la
molécula-madre
Moléculas hijas
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Figura 3. La formación de una molécula de ARNm complementaria a una de las cadenas (cadena molde).
ADN
Síntesis del ARNm
ARNm
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ACTIVIDAD PRÁCTICA: MODELO PARA ARMAR
En esta guía de actividades, el/la Profesor/a encontrará un modelo para armar ilustrando diversos aspectos relacionados con el flujo de la información genética. Su simplicidad es adecuada para el último segmento de Enseñanza Fundamental y el inicio de Enseñanza Media. Este modelo permite representar la replicación de la información genética (ADN-ADN), así como su flujo en dos etapas: la transcripción (ADN-ARN) y la traducción (ARN-péptido). También posibilita abordar los conceptos de mutación génica y la síntesis artificial de ADN. El modelo consta de 3 hojas con nucleótidos de ADN (30 adeninas, 30 timinas, 30 citosinas y 30 guaninas) para representar la replicación del ADN. Para mostrar la transcripción y la traducción de la secuencia presentada basta agregar una hoja con nucleótidos de ARN ( adeninas, 10 uracilos, 10 citosinas y 10 guaninas) y otra con los 20 aminoácidos. Dependiendo del número de alumnos y del plano del aula, se tendrá que ajustar el número de piezas. El esqueleto del azúcar-fosfato no se encuentra representado aquí, pero puede ser agregado fácilmente con palitos, dos reglas o tiras finas de cartulina. Dirigidas al alumno, las cuatro hojas para colorear son una opción para complementar la fijación del aprendizaje. Las guías de trabajo fueron elaboradas sobre la secuencia génica correspondiente a los primeros aminoácidos de la cadena de la beta-globina humana, uno de los componentes de la hemoglobina (HbA). Las respuestas a la mayoría de las preguntas se encuentran en rojo. Instrucciones generales Imprimir las hojas en papel con cierto gramaje. Cortar las piezas de nucleótidos de ADN o ARN por los bordes. Cortar las piezas de aminoácidos siguiendo las líneas externas (rectángulos). Guardar separadamente en frascos o sobres.
Bibliografía Esta actividad está basada en la secuencia de los primeros aminoácidos de la cadena de beta- globina humana, uno de los componentes de la hemoglobina (HbA), tomada de la base de datos del National Center of Biotechnology, obtenida durante el mes de mayo 2014. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/CCDS/CcdsBrowse.cgi?REQUEST=CCDS&DATA=CCDS7753,
DNA (hebra molde) (^) cac gta gac tga gga ctc ctc ttc aga DNA (hebra codificadora) (^) gtg cat ctg act cct gag gag aag tct ARNm (^) gug cau cug acu ccu gag gag aag ucu Aminoácidos V H L T P E E K S
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GUÍA 1. LA REPLICACIÓN DE LA INFORMACIÓN (ADN -- ADN)
Material: nucleótidos de ADN Procedimiento
- Armar las dos hebras o cadenas complementarias de ADN (molécula madre), una de ellas con la secuencia génica correspondiente a los primeros aminoácidos de la cadena de la beta-globina humana, uno de los componentes de la hemoglobina HbA. cac gta gac tga gga ctc ctc ttc aga gtg cat ctg act cct gag gag aag tct
- Separar ambas hebras y construir la cadena complementaria de cada una de ellas, como se indica en la figura 2.
- Comparar la secuencia de bases en la molécula madre y en las moléculas hijas.
- En la hoja correspondiente pintar con diferentes colores las cadenas originales de la molécula madre y las cadenas recientemente sintetizadas. Cada una de las moléculas hijas estará formada por cadenas de colores diferentes (duplicación semi- conservativa).
- Discutir la importancia de este proceso en la transmisión de la información genética de una célula a otra.
GUÍA 2. LA TRANSCRIPCIÓN DE LA INFORMACIÓN (ADN--ARNm) Material: nucleótidos de ADN y de ARN Procedimiento
- Armar la molécula de ADN como en la guía anterior diferenciando la hebra molde de la hebra codificante. Hebra molde cac gta gac tga gga ctc ctc ttc aga Hebra codificante gtg cat ctg act cct gag gag aag tct
- Separar las dos hebras para construir la secuencia de ARN mensajero (ARNm) complementaria a la hebra molde de ADN. El ARNm está constituido por una única cadena. Hebra molde cac gta gac tga gga ctc ctc ttc aga ARNm gug cau cug acu ccu gag gag aag ucu
- Destacar la sustitución de t por u en el ARN y comparar las secuencia de ARNm y de la cadena codificante. Observar que el producto génico sería diferente si el ADN fuera leído en otro sentido.
- Separar el ARNm y volver al unir las dos cadenas de ADN.
- En la hoja correspondiente colorear ambas cadenas de ADN con un color y el ARNm de otro. Insistir en el significado del término transcribir que significa “escribir nuevamente (un determinado contenido) en otro lugar; trasladar, copiar, reproducir”.
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GUÍA 5. SIGUIENDO EL CAMINO INVERSO (la síntesis de ADN en el laboratorio) Una de las formas de sintetizar actualmente ADN en el laboratorio es mediante máquinas automatizadas, especialmente diseñadas. Después de una revisión del flujo de la información genética, construir el péptido CYIQNCPLG, correspondiente a la hormona oxitocina, también llamada hormona del amor. Esta hormona cumple varias funciones relacionadas con el parto, el cuidado de la cría y el desarrollo del apego y de la simpatía entre personas, además de producir miedo a lo desconocido.
- ¿Cuál sería la secuencia de ARNm correspondiente? ¿Existe más de una posibilidad? Si quisiéramos sintetizar el ADN correspondiente, ¿cuál sería la secuencia de nucleótidos escogida?
- Comparar la secuencia de aminoácidos de la oxitocina con la de la hormona antidiurética vasopresina, que es CTPQNCPRG. ¿Cuáles serían las diferencias mínimas en las secuencias codificantes de ADN de las mismas?
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MATERIAL COMPLEMENTARIO
Tabla. El código genético El codón UCA (primera base U, segunda base C, tercera base A) corresponde a serina (S o Ser).
Abreviaturas: nombre del aminoácido (nombre en las nomenclaturas de 1 o de 3 letras). La nomenclatura de 1 letra es usada en genómica y la de 3 letras en los estudios bioquímicos).
Ácido Aspártico (D o Asp); Ácido Glutámico (E o Glu); Alanina (A= Ala); Arginina (R= Arg); Asparragina (N o Asn); Cisteína (C o Cys); Fenilalanina (F o Phe); Glicina (G o Gly); Glutamina (Q o Gln); Histidina (H o His); Isoleucina (I o Ile) ; Leucina (L o Leu); Lisina (K o Lys); Metionina (M o Met); Prolina (P o Pro); Serina (S o Ser); Tirosina (Y o Tyr); Treonina (T o Thr); Triptofano (W o Trp); Valina (V o Val).
Primera Base
Segunda Base Tercera Base Uracilo (U) Citosina (C) Adenina (A) Guanina (G)
Uracilo (U)
F (Phe) F (Phe) L (Leu) L (Leu)
S (Ser) S (Ser) S (Ser) S (Ser)
Y (Tyr) Y (Tyr)
C (Cys) C (Cys)
W (Trp)
(U)
(C)
(A)
(G)
Citosina (C)
L (Leu) L (Leu) L (Leu) L (Leu)
P (Pro) P (Pro) P (Pro) P (Pro)
H (His) H (His) Q (Gln) Q (Gln)
R (Arg) R (Arg) R (Arg) R (Arg)
(U)
(C)
(A)
(G)
Adenina (A)
I (Ile) I (Ile) I (Ile) M (Met)
T (Thr) T (Thr) T (Thr) T (Thr
N (Asn) N (Asn) K (Lys) K (Lys)
S (Ser) S (Ser) R (Arg) R (Arg)
(U)
(C)
(A)
(G)
Guanina (G)
V (Val) V (Val) V (Val) V (Val)
A (Ala) A (Ala) A (Ala) A (Ala)
D (Asp) D (Asp) E (Glu) E (Glu)
G (Gly) G (Gly) G (Gly) G (Gly)
(U)
(C)
(A)
(G)
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MATERIAL COMPLEMENTARIO
La formación de una molécula de ARNm complementario a una de las cadenas (hebra molde).
ADN
Síntesis del ARNm
ARNm
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MATERIAL COMPLEMENTARIO
La traducción, del lenguaje de los ácidos nucleicos al lenguaje de las proteínas.
Codón 1 Codón 2 Codón 3 Codón 4 Codón 5 Codón 6 Codón 7
V H L T P E E
