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En este informe se presenta la Tinción de Gram y otras técnicas tintoriales utilizadas en microbiología para el diagnóstico de bacterias, parásitos y hongos. Se describe el objetivo de cada técnica, los reactivos empleados y los resultados obtenidos. La Tinción de Gram, desarrollada por Christian Gram en 1884, permite distinguir bacterias Gram positivas de bacterias Gram negativas. Se utiliza el cristal violeta, el Lugol y la safranina. Otros procedimientos mencionados son la Tinción de Ziehl-Neelsen para bacterias ácido resistentes y la Tinción de esporas para bacterias esporuladas.
Tipo: Resúmenes
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El presente informe se realizó con la finalidad de dar a conocer información acerca de la Tinción de Gram y diferentes reactivos de tinción , la cual es una técnica de laboratorio que ayuda al reconocimiento de microorganismos como lo son las bacterias, gracias a esto es posible identificarlas más rápidamente en una infección y seleccionar qué tipo de antibiótico es el más adecuado para su respectivo tratamiento. La técnica consiste en añadir colorantes a una muestra que contenga bacterias, luego estos colorantes teñirán la pared de las bacterias de color morado, como siguiente paso se realiza un lavado del según lo que observemos determinaremos a qué tipo de bacteria pertenece. Si se trataría de una bacteria Gram positiva o de una bacteria Gram negativa. Hay una gran variedad de tinciones que se han ido desarrollando para la detección de los diferentes agentes infecciosos como bacterias, parásitos y hongos. La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico, Existen otras técnicas tintoriales específicas de gran utilidad, como la tinción de Ziehl-Neelsen, que se utiliza para el diagnóstico de bacilos ácido alcohol resistentes, o la tinción del azul de metileno también se utiliza como un complemento de la tinción de Gram, especialmente para la tinción de bacterias Gram-negativas, tales como Haemophilus influenzae y especies de Neisseria.. En general, las diferentes tinciones que se utilizan en el laboratorio de microbiología, son técnicas sencillas, rápidas y que aportan información fundamental para el diagnóstico y tratamiento oportuno de múltiples patologías de origen infeccioso.
Realizar la tinción Gram de coloración bacterianas y evaluar su comportamiento en las bacterias. Distinguir bacterias Gram (+) de las bacterias Gram (-). Reconocer algunas formas bacterianas observadas en el microscopio. Adquirir destreza en la prelación de frotis bacterianos
El Lugol o disolución de Lugol es una disolución de yodo molecular y yoduro potásico en agua destilada. Se preparó por primera vez en 1829 y recibe su nombre en honor al médico francés Jean Guillaume Auguste Lugol. Se emplea en microbiología en la tinción de Gram para retener el colorante cristal violeta, también se utiliza como contraste visual en parasitología; se utiliza esta solución como indicador en la prueba del yodo, que sirve para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por presentar distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula de polisacárido. SAFRANINA La safranina O es un colorante biológico también conocido como dimetil safranina y rojo básico 2, se utiliza en la Tinción de Gram para proporcionar un color violeta más intenso a las bacterias Gram+ y tiñe de rosa a las bacterias G-. CRISTAL VIOLETA En la forma pura, el cristal violeta se presenta como cristales de color azul verdoso brillante. Su punto de fusión está entre 194°-189°C. El violeta de metilo 10B es conocido como violeta de genciana y es el ingrediente activo en el colorante de Gram, usado para clasificar bacterias.
La tinción de Ziehl Neelsen (ZN), es una técnica de coloración de microorganismos para la identificación de patógenos, como Mycobacterium tuberculosis causante de la tuberculosis, que requiere de tres soluciones: Carbol Fucsina Fenicada (Fucsina Básica), Azul de Metileno y alcohol acido. La tinción ZN se fundamenta en la estructura de las paredes celulares de las micobacterias que contienen lípidos y otros ácidos grasos (ácidos micólicos) de elevado peso molecular, que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos calientes, por lo que se denominan bacterias ácido resistentes o ácido-alcohol resistentes.
La fucsina fenicada o carbofucsina es un tinte rojo fenólico soluble en los distintos materiales lipoidales que constituyen la mayor parte de la pared celular micobacteriana, por lo que penetrará la pared de estas bacterias y quedará retenido. El calor hace que la fucsina fenicada traspase la pared lipoidal y llegue al citoplasma. Se utiliza en la tinción microbiológica Ziehl-Neelsen para la investigación de micobacterias. La solución de carbolfucsina Ziehl Chem-Lab es una tinción bacteriológica especial utilizada para identificar organismos acidorresistentes que resisten a la tinción por métodos ordinarios. AZUL DE METILENO El azul de metileno es un colorante de naturaleza orgánica con múltiples funciones. También es conocido con el nombre de cloruro de metiltionina. Es el colorante de contraste en la técnica de coloración de Ziehl Neelsen. Todo lo que no es ácido- alcohol resistente se decolora con el alcohol ácido y se contra tiñe con el azul de metileno. COLORACION DE ESPORAS La tinción de esporas bacterianas, también llamada tinción Schaeffer-Fulton, es utilizada ampliamente para la identificación de bacterias esporuladas, generalmente pertenecientes a los géneros Bacillus y Clostridium, algunas de las cuales son patógenas por naturaleza. Sin embargo, debido a su resistencia característica, en muchos casos las endosporas bacterianas resisten la coloración, dificultando la percepción de las mismas. La pared de las esporas es relativamente impermeable, sin embargo, los colorantes (verde de Malaquita) pueden penetrarla si se calienta la preparación. Luego se lava con agua, y se utiliza un colorante contrastante (safranina) el cual tiñe a la célula vegetativa.
En conclusión esta practica nos ayudo a reconocer los diferentes reactivos que tiene cada tinción como la tinción de gran, que tiene como reactivos el Lugol, cristal violeta y la safranina o la tinción de ziehl neelsen y la coloración de esporas tienen como reactivos la carbofucsina, azul de metileno y alcohol acido continuamos con el verde maquita y la safranina pero no solo eso si no que también nos sirvió a saber que tipo de tinción nos ayudara a reconocer los diferentes tipos de bacterias, hongos, paracitos etc. BIBLIOGRAFIA Dr. Jatin, M. 2011 medline plus información de la salud tinción de Gram [05 dic. 2014] pag. 2 UNP. (02 de 2017). Microbiologia general. Obtenido de http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microgeneral/wp-content/uploads/2017/02/03- COLORACIONES.pdf De Naranjo, P.. J., Rodríguez, G., RodríguezA., J. y Caldas, ML (1988). Lacoloración de Ziehl-Neelsen en histopatologiaBiomédica , 8 (3–4), 84.https://doi.org/10.7705/biomedica.v8i3-4. Microbiología, P. Delaware. (2016). PRÁCTICA10 – TINCIÓN DE ZIENS– NEELSEN. –Prácticas de Microbiología. recuperareducar9 de agosto de 2020, desdehttps://fiestadelosmicroorganismos.wordpress.com/2016/12/15/practica- 10-tincion-de-ziehl-neelsen/ (S/f). Unam.mx. Recuperado el 6 de noviembre de 2022, de https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/publicaciones/libros/ cbiologicas/libros/Tinciones.pdf (S/f-b). Uvigo.es. Recuperado el 6 de noviembre de 2022, de https://mmegias.webs.uvigo.es/descargas/tecnicas-tincion.pdf