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UNIVERSIDAD
NACIONAL DE
SAN MARTÍN
FACULTAD CIENCIAS
DE LA SALUD
E.P OBSTETRICIA
IV CICLO - 2022
INTEGRANTES:
• Campos Sánchez Karen
Yamíly
• García Santa Cruz Yessi
Jaquelin
• Quispe Quispe Liz
Marilin
• Requejo Sánchez Rocío
del Pilar
• Sangama Espinoza
Enma Verónica
• Vásquez Pérez María
Esther
Blga. Mcblga. Dra. Yoni
Meni Rodríguez Espejo
ÍNDICE
- I. INTRODUCCIÓN
- II. OBJETIVO
- III. METODOLOGÍA
- IV. DESARROLLO
- 4.1. Técnicas para diagnosticar micosis superficiales.
- 4.2. Pruebas de diagnóstico para micosis subcutáneas................................................
- 4.3. Técnicas de diagnóstico microbiológico para las micosis oportunistas.
- 4.4. Técnicas para identificar micosis sistémicas.
- responsables de las micosis oportunistas. 4.5. Estudio de las pruebas y técnicas de diagnóstico para identificar los hongos
- sistémicas y superficiales. 4.6. Diferencias entre las técnicas de diagnóstico microbiológico de micosis
- V. CONCLUSIONES
- VI. ANEXOS
- VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
IV. DESARROLLO
4.1. Técnicas para diagnosticar micosis superficiales. Estas tecnicas son importantes ya que se usan para poder identificar las afecciones que son producidas por los hongos (Levaduras. Dermatofitos), algunos pertenecientes al género Epidermophyton, Microsporum y Trichophyton. que afectan a los tejidos queratinizados como la capa cornea de la piel, el cabello, las uñas y las mucosas. Y así de esta manera poder identificar el agente causal. Existe 3 tipos de técnicas ´para identificarlas ( 1 ): A. Examen microscópico directo para las micosis superficiales El hidróxido de potasio al 10%, es una solución que disuelve la queratina y se utiliza para muestras clínicas con abundantes células y restos celulares, sin afectar la morfología de los elementos fúngicos, permitiendo una mejor visualización de los mismos. Consta de 4 pasos ( 2 ):
- Toma de muestra en el paciente: uñas, pelo o cabello, piel, secreciones (vaginal, óptica, heridas).
- Preparación de la disolución.
- Preparación de la muestra. Uñas:
- Colocar una toalla y utilizar guantes estériles, si es posible. (2)
- Obtener las escamas raspando con un bisturí bajo la lámina ungueal despegada y llegando a la zona dolorosa.
- Cortar con una tijera fina y curva o con cortaúñas los fragmentos de la uña afectada.
- En el caso de la onicomicosis blanca superficial se ha de hacer rascando la superficie ungueal.
- Recoger el material obtenido en una placa de Petri o en un recipiente estéril. Figura 1. Preparación de la muestra. Fuente: Granados, P. ( 2016 ).
Pelos:
- Se realiza utilizando tijeras o pinzas de depilar limpias (2).
- En el caso de pelos arrancar con pinzas los que se encuentren rotos, de tres a cuatro, raspando también las lesiones escamosas ( 2 ).
- Recolectar la cantidad suficiente de material patológico, según el tipo de lesión observada: Piedra blanca o piedra negra, tiñas del cuero cabelludo o barba, tiñas microspóricas, Kerion de Celso, tiñas tricofíticas, tiña fávica ( 2 ). Piel (escamas): Lesiones descamativas (tiña corporis) se deben recoger las escamas de las zonas afectadas, raspando el borde activo con hoja de bisturí o sindesmótomo. (2)
- Lesiones satélites (candidiasis) tomar de dichas lesiones de ser posible las más jóvenes.
- Pitiriasis versicolor: se debe raspar de cualquier parte de la superficie hiper/ hipopigmentada.
- Intertrigo candidiásico: se debe recoger el material con hisopo estéril seco o húmedo. Figura 2. Pelo y piel (cuero cabelludo). Fuente: Granados, P. ( 2016 ). Secreciones: vaginal, otica, heridas. Ayuda en el diagnóstico de una infección bacteriana producida por un sobrecrecimiento de gardnerella vaginalis (la bacteria más común en la vagina), sin embargo, en algunas condiciones presenta condiciones aumenta su cantidad anormalmente produciendo problemas, como un aumento del flujo vaginal y cambio en el olor. El olor fétido es causado por la volatización de las aminas (trimetilamina, putrescina, cadaverina) ( 2 ).
B. Examen con luz dewood para identificar las micosis superficiales La luz de Wood, o luz negra, es un subtipo de radiación ultravioleta (UV) tipo A de onda larga generada por una lámpara de mercurio de alta presión con un filtro opaco especial, generalmente de cobalto-níquel, por el que solo puede atravesar la longitud de onda comprendida entre 320 y 400 nm con un pico a 365 nm, penetrando hasta la dermis media ( 4 ). Dicha luz ultravioleta, es invisible para el ojo humano. Sin embargo, iluminando ciertas sustancias con UVA de onda larga, se provoca la emisión de luz visible de diversos colores. Dicho fenómeno se denomina fluorescencia ( 4 ). La piel sana tiene muy poca fluorescencia, ya que la melanina absorbe la mayor parte de la onda y apenas emite luz visible. Pero en algunos tipos de alteraciones de la piel, se puede observar fluorescencia con la luz de Wood, y así, apoyar o no el diagnóstico de ciertas enfermedades ( 4 ). Toma de muestra: Escamas: En las lesiones descamativas, deben recogerse las escamas de las zonas afectas con fluorescencia positiva (pitiriasis versicolor o eritrasma) o con fluorescencia negativa (candidiasis y dermatofitosis), raspando su borde activo con un escalpelo desechable, ya que dicho borde es el que más probablemente contenga elementos fúngicos viables ( 5 ). Pelos: Dependiendo del tipo de lesión observada, los pelos deben recogerse mediante diversas técnicas:
- En la Piedra blanca o la Piedra negra, ambas confinadas a la vaina del pelo, se debe cortar la porción suprafolicular de los pelos enfermos ( 5 ).
- En las tiñas del cuero cabelludo, es importante recoger los pelos parasitados arrancándolos con la raíz intacta, ya que cortar los pelos es menos eficaz (5). Uñas: En las onicomicosis, la toma de muestras varía en función del tipo de lesión clínica:
- Onicomicosis distal y lateral subungueal o uña en “médula de junco”: la lesión comienza en el epitelio del lecho ungueal del borde libre de la uña y va extendiéndose hacia la parte más profunda (ventral) de la tabla ungueal y proximalmente hacia la matriz (5).
- Onicomicosis proximal subungueal: comienza en la porción ventral del pliegue proximal de la uña y luego invade el área proximal de la tabla ungueal y eventualmente la matriz ( 5 ).
- La onicomicosis blanca superficial se manifiesta como una mancha blanca lechosa en un punto cualquiera de la superficie de la uña que se va extendiendo progresivamente (5). Antes de realizar la toma de muestras de una micosis superficial es aconsejable examinar las lesiones de la piel (sospechosas de pitiriasis versicolor o eritrasma) y cuero cabelludo (dermatofitosis) en una habitación completamente oscura bajo la luz de Wood (luz ultravioleta de 365 nm de longitud de onda, que pasa a través de un filtro de cristal que contiene óxido de níquel) (5). La piel normal muestra un color azul, mientras que en infecciones bacterianas como el eritrasma, emite fluorescencia rojo coral. En micosis como la pitiriasis versicolor, las áreas afectas emiten una fluorescencia brillante verdosa amarillenta (pudiendo poner de manifiesto lesiones no perceptibles a simple vista) ( 5 ). 4.2. Pruebas de diagnóstico para micosis subcutáneas. Los hongos que ocasionan las micosis subcutáneas residen por lo general en la tierra o en la vegetación. Estos penetran en la piel o en tejido subcutáneo por inoculación traumática del material contaminado. Por ejemplo, una cortadura o abrasión superficiales pueden introducir algún moho del entorno capaz de infectar la dermis expuesta ( 6 ).
- Esporotricosis linfocutanea: Sporothix schenckii ( 6 ).
- Cromoblatomicosis: Fonsecaea, Exophiala, Cladosporium, Cladophialphora, Rhinocladiella y Phialophora ( 6 ).
- Micetoma eumitcotico: Phaeoacremonium, Curvularia, Fusorium, Medurella, Mediacopsis, Niogrograna, Trematosphaeria, Exophiala, Falciformispora y Scedosporium/Pseudallescheria ( 6 ).
- Entomoftoromicosis subcutánea: Entomophthorales (Conidiobolus coronatus) y Basidiobolales (Basidiobolus ranarum) ( 6 ).
- Feohifomicosis subcutánea: Exophiala, Alternaria, Curvularia y Phaeoacremonium ( 6 ).
Se han desarrollado inmunoensayos para el diagnóstico de las micosis, logrando así la detección de anticuerpos en muestras de sueros de pacientes con esporotricosis. La respuesta inmunológica del paciente con micetoma eumicotico ha sido estudiada usando diversos métodos serológicos e inmunológicos, como, por ejemplo: ELISA ( 8 ). Inmunotransferencia o western blot: Es un sistema rápido y muy sensible para la detección y caracterización de proteínas que se basa en la especificidad de reconocimiento entre antígeno y anticuerpo. Implica la separación por electroforesis por el sistema SDS-PAGE y una transferencia cuantitativa e irreversible a una membrana de PVDF de las proteínas de una mezcla compleja (lisado total celular) ( 9 ). Los antígenos que se han transferido a la membrana son reconocidos por anticuerpos monoclonales o policlonales específicos de ellos. Se pueden diagnosticar micosis como: Esporotricosis linfocutanea, Cromoblatomicosis y Micetoma eumitcotico ( 9 ). Intradermorreacción: La intradermoreacción con esporotricina, se practica con la fracción metabólica polisacárido obtenida del S. schenckii, se inyecta intradermicamente en el antebrazo o la espalda una décima de mililitro del antígeno. La lectura se realiza a las 24 a 48 horas ( 9 ). Resultados: Una zona indurada de 5 mm. de diámetro se considera positiva, es una reacción negativa cuando no hay reacción o solamente eritema. Ejemplo: Esporotricosis ( 9 ). Inmunoelectroforesis: Con esta técnica se ha logrado identificar la localización de los antígenos específicos de la mayoría de los hongos patógenos, y sirve para corroborar la "banda de identidad: de la I.D., por medio de la localización de la banda. Es un procedimiento en el cual la difusión de los reactivos inmunológicos es precedida por a la separación electroforética de diferentes componentes proteicos del preparado antigénico. Ejemplo: Esporotricosis ( 9 ). Cultivo: Son el mejor método para establecer el diagnóstico. Se realiza del material obtenido del exudado de las lesiones, escamas, fragmentos de tejidos o expectoración. Se recomienda la utilización de agar Sabouraud y micosel agar, incubados a 28 oC. Las colonias aparecen en un tiempo promedio de 5 a 8 días ( 9 ). Resultados: Crecimiento de hongo DEMATIÁCEO, forma filamentosa en medio de agar Sabouraud. En el cultivo, crecieron colonias de color gris oscuro a negras, con aspecto velloso y de superficie elevada, que correspondían a un hongo dematiáceo (Phialophoraverrucosa) ( 9 ).
PCR: este proceso se lleva a cabo mediante ciclos alternados de temperaturas altas y bajas, que permiten separar las hebras de ADN formadas entre si tras cada fase de replicación y, la unión nuevamente de estas hebras con la polimerasa para que vuelvan a duplicarse. Todo el proceso de la PCR está automatizado mediante un aparato llamado termociclador, el cual permite calentar y enfriar los tubos de reacción controlando la temperatura necesaria para cada etapa de la reacción ( 9 ). Resultados: Utilizando las diluciones del ADN se obtuvo un producto de amplificación utilizando una cantidad de 0,15 ng de ADN fúngico. Si sus resultados muestran un nivel alto de PCR, eso probablemente significa que tiene alguna clase de inflamación en el cuerpo ( 9 ). Diagrama flujo: enzimoinmunenesayo Procedimiento
- Se emplearon placas de 96 pozos de Poliestireno para la sensibilización del antígeno ( 10 ).
- Se dispensó 1 μg/mL del antígeno por pozo en 100 μL de buffer ( 10 ).
- Se incubó por 1 h a 37°C y luego se dejó a 4°C toda la noche ( 10 ).
- Se lavó la placa 3 veces con buffer ( 10 ).
- Las muestras de suero de pacientes fueron añadidas por duplicado en cada pozo ( 10 ).
- Se dejó la placa 10 minutos en oscuridad a temperatura ambiente ( 10 ).
- Las placas fueron incubadas a 37°C por 1 h ( 10 ).
- Finalmente se desarrolló la reacción con 0,4 mg/mL de diclorhidrato de O- fenilendiamina en 0,01 M de buffer de citrato de sodio pH 5,5 ( 10 ).
- Se dejó la placa 10 minutos en oscuridad a temperatura ambiente ( 10 ). Resultados: Las muestras con absorbancias mayores a 0,736, fueron consideradas positivas. Se observa que todos los sueros de pacientes con esporotricosis se encontraron por encima del punto de corte ( 10 ).
Candidiasis (invasora): La candidiasis es una infección causada por especies de Candida (con mayor frecuencia C. albicans ), que se manifiesta con lesiones mucocutáneas, fungemia y, en ocasiones, infecciones localizadas en múltiples sitios. Los síntomas dependen de la localización de la infección e incluyen disfagia, lesiones cutáneas y mucosas, ceguera, síntomas vaginales (prurito, ardor, flujo), fiebre, shock, oliguria, insuficiencia renal y coagulación intravascular diseminada. El diagnóstico se confirma con examen histológico y cultivos de sitios que en condiciones normales son estériles. (1 2 ) Figura 4 : Candidiasis (invasora). Fuente: Zervou, F. N. ( 2017 ). Tipo de candidiasis invasora: La candidiasis del esófago, candidiasis oral, candidiasis bucal, candidiasis oral debido VIH (12). Técnicas de diagnóstico microbiológico para micosis: El diagnostico por métodos convencionales no es fácil ya que depende de factores como el tipo de hospedero, muestra, microorganismo y experticia del personal que realiza las pruebas de laboratorio. (1 2 ) Las condiciones del paciente pueden desfavorecer la obtención de una muestra representativa y por ello, se han creado métodos de no invasivos como la detección de antígenos, anticuerpos y pruebas moleculares. (1 2 ) Las muestras de sangre, lavado broncoalveolar, orina y líquido cefalorraquídeo son fundamentales en el diagnóstico de las infecciones fúngicas invasivas, pulmonares y meníngeas oportunistas. (1 2 ) Diagnostico microbiologico: Examen histológico y cultivo para hongos, hemocultivos, pruebas séricas de beta-glucano, panel T2Candida (12).
Dado que las especies de Candida son comensales, su cultivo del esputo, la boca, la vagina, la orina, las heces o la piel no indica necesariamente una infección invasora y progresiva. También debe identificarse una lesión clínica característica, con evidencias histológicas de invasión tisular (p. ej., levaduras, seudohifas o hifas en las muestras de tejido) y deben excluirse otras causas ( 12 ). La positividad de los cultivos de muestras obtenidas en sitios normalmente estériles, como sangre, líquido cefalorraquídeo, pericardio o líquido pericárdico o biopsias de tejido, ofrece una evidencia contundente que avala la necesidad de terapia sistémica. El beta-glucano sérico es a menudo positivo en pacientes con candidiasis invasiva; por el contrario, un resultado negativo indica baja probabilidad de infección sistémica (1 2 ). El panel T2Candida es un ensayo de resonancia magnética que detecta directamente especies de Candida en muestras de sangre completa en 3 a 5 horas. Es altamente sensible y tiene un excelente valor predictivo negativo (1). También se encuentran disponibles otras pruebas de diagnóstico molecular, que incluyen la espectrometría de masas por ionización por desorción asistida por matriz-ionización-tiempo de vuelo (MALDI-TOF) y ensayos basados en PCR (reacción en cadena de la polimerasa). Se recomienda un examen oftalmológico para comprobar la endoftalmitis en todos los pacientes con candidemia (1 2 ). Fusariosis: Una infección superficial, diseminada y localmente invasiva de las especies patógenas del hongo Fusarium, que a menudo se encuentra en el suelo y en el agua y que se transmite a los humanos principalmente mediante inoculación traumática. Se manifiesta en forma de queratitis, onicomicosis y, con menos frecuencia, peritonitis y celulitis (13). Fusarium solani: Es un hongo cosmopolita y causa infecciones superficiales (queratitis, onicomicosis), localizadas (endoftalmitis, sinusitis) y diseminadas. Es toxigénico. En cultivo es bastante estable, aunque puede sufrir algunas mutaciones hacia formas con micelio aéreo abundante, sin esporodoquias y sin color. En el medio APD el crecimiento es rápido: 30 mm en una semana. La colonia presenta un aspecto liso y algodonoso de color blanco grisáceo, crema, ocre o rosa púrpura. Generalmente el reverso no es coloreado o es de color crema pálido (13). Aspergilosis: Es una infección oportunista causada por la inhalación de esporas del moho Aspergillus; que suelen hallarse en el medio ambiente; las esporas germinan y se desarrollan en hifas, que ingresan en los vasos sanguíneos y, en presencia de enfermedad invasora, ocasionan necrosis hemorrágica e infarto (1 3 ).
Debido a razones inciertas, los cultivos pueden ser negativos, incluso aunque se observen claramente hifas en los tejidos. A menudo, la TC y las radiografías subestiman o no advierten la grave destrucción ósea (14). Materiales:
- Procesadores de tejidos, centro modular de inclusión de tejidos.
- Placa fría para el sistema modular de inclusión de tejidos.
- Módulo caliente del centro inclusión de parafina.
- Microtómos / Corte a temperatura ambiente.
- Baño de flotación para cortes de parafina.
- Tinción.
- Soluciones de identificación de muestras.
- Microscopios, cámaras para Microscopio (1 5 ). Procedimiento:
- Obtención de la muestra: Se da incisión y escisión punción.
- Fijación: Fijador más común formol deshidratación y aclaramiento.
- Inclusión: Parafina: mezcla de hidrocarburos sólidos que proporcionan una consistencia firme para hacer cortes sin que se distorsione la imagen del tejido
- Cortes: Material microtomo de 3 y 5 micras baño de flotación.
- Tinción: Sacar la parafina hidratar tinción con hematoxilina y Eosina.
- Montaje: Portaobjeto pineno o resina acrílica.
- Etiquetado: En este paso se realiza la preparación de tal manera que se identifique con precisión de qué material se trata (1 5 ). Observación: Observación microscópica de los aislamientos, mucho más minuciosa en el caso de los hongos filamentosos, que comprenderá el tipo de talo, la morfología de las estructuras vegetativas, la forma de las células conidiógenas, la descripción de las conidias, de las estructuras de reproducción sexual (1 5 ). Resultados: Se considerará un diagnóstico positivo o negativo al patógeno solicitado, de acuerdo a los resultados del análisis detallado en el procedimiento específico elaborado por el laboratorio autorizado. Para aquellos casos que se requiera análisis molecular, se considerará un diagnóstico positivo o negativo, de acuerdo a los resultados obtenidos en una misma reacción y a los productos de PCR observados en una sola corrida de gel (1 5 ).
4.4. Técnicas para identificar micosis sistémicas. Micosis sistémicas: Las micosis sistémicas son infecciones fúngicas cuya puerta de entrada se encuentran los senos paranasales, el pulmón o tubo digestivo. Tienen la capacidad de diseminación hematógena alcanzando en algunos casos afección cutánea secundaria. Las micosis oportunistas son producidas por hongos ubicuos, que incluso forman parte de la flora normal del individuo. Existen 2 variedades de micosis sistémicas (16):
- Las micosis oportunistas (candidiasis sistémica, aspergilosis y mucormicosis sistémica).
- Las respiratorias endémicas (histoplasmosis, blastomicosis, coccidioidomicosis, paracoccidioidomicosis y criptococosis). Técnica de hemocultivo: Es un método diagnóstico de las micosis sistémicas; pero requiere incubación prolongada y posee una sensibilidad global de alrededor del 50% en el caso de la infección producida por levaduras, que en el caso de la aspergilosis invasora no llega al 10%. Para la realización de hemocultivos se suelen obtener varias muestras de sangre a partir de distintas venas para incrementar así la probabilidad de detección de las bacterias u hongos (16). Agar glucosado de Sabouraud (AGS): Es el medio más utilizado para la descripción de las características de la mayoría de los hongos. Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo). En el medio de cultivo, la peptona, la tripteína y la glucosa son los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. Puede ser suplementado con otros agentes selectivos de crecimiento (16). Agar infusión de cerebro corazón: Puede utilizarse como medio enriquecido para facilitar el crecimiento de C. neoformans a partir de muestras estériles como el LCR y el mantenimiento de la fase levaduriforme de algunas micosis sistémicas. Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo microbiano. La infusión de cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona, son la fuente de carbono, nitrógeno, y vitaminas (1 7 ).
- Cultivos para el aislamiento de H. capsulatum: Los medios de cultivo usualmente utilizados para aislar este hongo son: el agar de infusión de cerebro y corazón con una fuente de sangre más antibióticos y ciclohexamida, y el Sabouraud dextrosa agar más cicloheximida y cloranfenicol (17).
- Hemocultivo por lisis centrifugación: la sangre extraída se pone en contacto con sustancias líticas, como la saponina, que destruyen los eritrocitos y los leucocitos y liberan en el medio las levaduras intracelulares. Actualmente es considerado como el método de elección para el aislamiento de este hongo (18). B) Métodos indirectos o inmunológicos: en los cuales se detectan anticuerpos producidos por el paciente y/o antígenos o moléculas derivados del microorganismo.
- ELISA directa e indirecta para detección de anticuerpos: los métodos inmuno- enzimáticos para la detección de Acs contra H. capsulatum han sido poco utilizados debido a la dificultad para su estandarización y a su difícil interpretación; además, presentan alta reacción cruzada cuando se utilizan sueros de pacientes con otras enfermedades micóticas tales como paracoccidioidomicosis, blastomicosis, aspergilosis, candidiasis y coccidioidomicosis, lo que afecta su sensibilidad y especificidad (18).
- Detección de antígenos: el uso de las técnicas de radioinmunoensayo (RIA) y ELISA y el empleo de Acs policlonales han permitido detectar, la presencia de antígenos de tipo polisacárido en muestras de fluidos corporales como orina, suero, lavados broncoalveolares y líquido cefalorraquídeo (18). Blastomicosis: Es una infección causada por la inhalación del hongo Blastomyces dermatitidis. El hongo se encuentra en la madera en descomposición y el suelo. El hongo ingresa al cuerpo a través de los pulmones, donde comienza la infección. Posteriormente, el hongo se propaga a otras partes del cuerpo. Se diagnostica mediante técnicas como el cultivo del hongo en una muestra de su esputo/flema, del líquido de una articulación infectada o del tejido de una zona infectada (18). Los exámenes de laboratorio incluyen:
- Examen directo: Los hongos pueden detectarse en preparaciones de KOH al 10% o en solución de lugol. El material recolectado (expectoración, lavado bronquial, pus) se coloca entre un porta y cubreobjetos con KOH (18).
- Cultivo: Cuando se siembra la muestra en medios ordinarios de Sabouraud y micosel agar incubados, crecen como un hongo micelial, desarrollándose colonias entre 2 a 4 semanas, vellosas, ligeramente húmedas, de color blanco, y cuando envejecen toman un pigmento café-pardo. En los medios enriquecidos de gelosa sangre y gelosa chocolate incubados se obtiene colonias levaduriformes en 1 a 2 semanas, caracterizadas por ser de aspecto cremoso, limitadas, plegadas, de color blanco amarillento (18).
- Pruebas inmunológicas: El empleo del antígeno intradérmico blastomicina es útil solo en el 30 – 40% de los casos (18).
- Serología: Las pruebas más utilizadas son fijación del complemento e inmunodifusión en gel y ELISA (19). Coccidioidomicosis: Enfermedad pulmonar o diseminada por vía hematógena causada por los hongos Coccidioides (Figura 3). Las personas pueden contraer la coccidioidomicosis mediante la inhalación de esporas en polvo o suelo contaminado. No se contagian la enfermedad, de animales contaminados. Se diagnostica mediante la toma de muestras de sangre, esputo (flema) u otro fluido para averiguar si el hongo está presente. Los métodos que se utilizan son (19):
- Métodos serológicos: Hoy en día, se usan tres métodos serológicos: el inmunoensayo (ELISA) con sensibilidad de 83% para titular IgM o IgG. La FC tiene sensibilidad de 56%, pero desde 1956 ha sido el estándar de oro para medir el nivel de la respuesta IgG. La IMDF cuantitativa debe solicitarse cuando el suero sea anti-complementario (19).
- Prueba de intradermo-reacción con coccidioidina (IDC): La IDC consiste en la inyección intradérmica de 0,1 ml de una dilución de coccidioidina micelial estandarizada. La reacción de induración cutánea se mide a las 48 h, y se le considera positiva cuando el diámetro es 5 mm o más (19). Paracoccidioidomicosis: Es una infección causada por un hongo P. brasiliensis. Se trata de una micosis profunda y sistémica, es considerada una enfermedad endémica. Suele provocar tos, fiebre, sensación de falta de aire y dificultad para respirar, pero puede provocar úlceras, hinchazón de los ganglios linfáticos y, en algunos casos, dolor abdominal. Se diagnostica mediante muestras de biopsias, absceso, y aspirado de ganglio. Los métodos que se utilizan son (20):
