EXPERIMENTO 1
SEPARACION DE PROTEINAS ( DIALISIS DEL SUERO ).
Objetivos
1. En base al carácter macromolecular de las proteínas utilizar un método para separarlas
de otros componentes de menor peso molecular.
2. Estudiar el efecto de la fuerza iónica sobre la solubilidad de las proteínas del suero
sanguíneo.
3. Constatar la acción del ácido tricloroacético (TCA) como agente precipitante de las
proteínas.
Método: ( Diálisis del suero sanguíneo utilizando como membrana semipermeable una bolsa
de celofán o colodión ).
Procedimiento:
a) Medir en el interior de una bolsa de celofán, 5 ml de suero sanguíneo y cerrar la bolsa.
b) Colocar la bolsa de celofán en el interior de un beaker conteniendo agua destilada, la misma
que debe ser renovada cada cierto tiempo (20 minutos).
c) Al notar algo de precipitado en el interior de la bolsa, vaciar su contenido a un tubo de
centrifuga y centrifugar por 5 minutos a 2500 r.p.m.
d) Separar el sobrenadante en un tubo de ensayo y añadirle 5 ml de ácido tricloroacético al
10%. Observar lo que sucede.
Trate de disolver el precipitado que quedó en el tubo de centrifuga utilizando agua destilada, de
no ser posible, añada unas gotas de NaCl al 10% y observe si se solubiliza.
INTERROGANTES
1. ¿Por qué es necesario renovar el agua destilada del beaker cada cierto tiempo?
Porque así, puede absorber y sacar más cantidad de soluto, acción que tardaría o no se podría
completar sin la renovación del agua cada 20 minutos.
2. ¿Cuál es el fundamento de la precipitación de las proteínas por el ácido tricloroacético?
Se precipita porque al usar el solvente orgánico como es el ácido tricloroacético, produce
agregados de moléculas proteicas que se precipitan. Sucede ya que el solvente al tener
constante dieléctrica menor que el agua, se incrementan las fuerzas de atracción entre cargas
opuestas y disminuye el grado fe ionización de los radicales de la proteína y por eso disminuye
la solubilidad de esta.
3. ¿Con qué experimento(s) podría Ud. demostrar que las proteínas no difundieron a
través de la bolsa de celofán?
Con la reacción de Biuret, la proteína al ponerse en contacto con un alcalí concentrado, forma
la sustancia que es el Biuret que estando en contacto con solución de sulfato cúprico, tiene un
color morado.
