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LABORATORIO DE MICROSCOPÍA
KAROL MELISSA ACEVEDO PEREZ
Código: 20202140083
RESUMEN
El artículo presenta datos necesarios para realizar buenas prácticas de laboratorio implementando el adecuado uso de los microscopios y la correcta preparación de las muestras a observar, en este caso en un microscopio óptico. Da una leve introducción a la microscopía; y su relación con las buenas prácticas de laboratorio y los resultados de estas.
Palabras clave: Microscopia, Microscopio, Muestra
INTRODUCCIÓN
La microscopía es una técnica que permite observar objetos muy pequeños atreves de un microscopio y obtener una imagen aumentada del mismo. Esta se encarga ocupa de los usos y de las aplicaciones interpretativas de los microscopios.
Las limitaciones para el estudio de las células y tejidos han sido superadas a lo largo del tiempo gracias al desarrollo tecnológico que ha permitido la construcción de instrumentos de laboratorio, tales como el microscopio, el cual permite la observación y obtención de imágenes aumentadas de esos especímenes diminutos, que a simple vista resultan invisibles.
El microscopio ha sido y será el instrumento de mayor utilidad en el estudio de las células y tejidos.
La interrelación de disciplinas ha sido y será siendo necesaria para permitir el diseño de los microscopios y otros instrumentos de
laboratorio empleados para resolver limitaciones en el estudio de las células.
El microscopio electrónico
El microscopio electrónico es un instrumento de gran ayuda dentro de la comunidad científica gracias a su gran poder de aumento, la principal característica de este microscopio es que para la generar imagen de la muestra utiliza haz de electrones en lugar de un haz de luz y esto hace que el máximo aumento sea proporcional a la longitud de onda del medio con el que se observa. A menores longitud de onda mayor resolución.
Funcionamiento
La longitud de onda con la que se mueve un electrón es inversamente proporcional a su velocidad, es significa que si los electrones son acelerados puede obtenerse una longitud
de onda muy corta, el microscopio óptico parte de esta idea para observar las muestras.los electrones impactan con la muestra algunos de ellos son reflejados por la muestra y otros la atraviesan, mediante la detección es posibles reconstruir la imagen de una muestra.
Pates del microscopio electrónico
Fuente de electrones:
En general se utiliza un filamento de tungsteno, este filamento es calentado de modo que la energía de sus átomos y electrones aumenta, los electrones libres son dirigidos hacia la muestra.
Lentes electromagnéticas:
Estas lentes generan campos eléctricos y magnéticos de modo que su interacción con los electrones hace que sus trayectorias diverjan o converjan en un punto.
Cámara de vacío:
La función de la cámara de vacío es evitar que los electrones interactúen con las moléculas del aire, ya que si esto ocurriera no se podrían determinar sus trayectorias.
Detector (pantalla fluorescente):
La pantalla es un dispositivo que recoge la información de los electrones que atraviesan la muestra, para enviarla posteriormente al ordenador de procesado.
Tipos de microscopios electrónicos
Microscopio electrónico de transmisión
El microscopio electrónico de transmisión (TEM) es un instrumento que aprovecha los fenómenos físico-atómicos que se producen cuando un haz de electrones suficientemente acelerado colisiona con una muestra delgada convenientemente preparada. Cuando los electrones colisionan con la muestra, en función de su grosor y del tipo de átomos que la forman, parte de ellos son dispersados selectivamente, es decir, hay una gradación entre los electrones que la atraviesan directamente y los que son totalmente desviados. Todos ellos son conducidos y modulados por unas lentes para formar una imagen final sobre una CCD que puede tener miles de aumentos con una definición inalcanzable para cualquier otro instrumento.
Preparación muestras para TEM:
Muestras Biológicas: o Fijación química de muestras (cacodilato, peróxido de osmio...) y inclusión en resinas.
Tipos de microscopio óptico
Microscopio compuesto
Este utiliza dos o más lentes para obtener la imagen aumentada.
Microscopio monocular
Es aquel que solo tiene un ocular y por lo tanto la muestra se observa con un solo ojo.
Microscopio binocular
Este incluye dos oculares, en estos la imagen proveniente del objetivo se divide en dos mediante un prisma óptico.
Microscopio invertido
En este la luz y el objetivos la opuesta al microscopio convencional, de este modo la muestra es iluminada desde arriba y el objetivo se encuentra debajo de la platina.
Microscopio digital
Este incluye un cámara en lugar del ocular esto permite capturar digitalmente la imagen de la muestra. La imagen digital se puede visualizar en tiempo real en una pantalla o trasmitirla a un ordenador.
Partes de un microscopio óptico
Sistema mecánico
1. Base
Constituye la base del microscopio y su apoyo principal, puede tener distintas formas, siendo las más habituales rectangulares y con forma de Y.
2. Tubo
Tiene forma cilíndrica y por dentro es de color negro para evitar las molestias del reflejo de la luz. Al final del tubo es donde se colocan los oculares.
3. Revolver
Es una pieza giratoria en la que se enroscan los objetivos. Cuando giramos este dispositivo, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo. Se le llama revolver por el ruido que hace el piñón al encajar en un lugar fijo.
4. Brazo
El brazo, en algunos casos conocida por asa, es la pieza de la parte posterior del microscopio. Sujeta al tubo en su parte superior y en la parte inferior se acopla al pie del aparato.
5. Platina
La platina es la pieza metálica plana en la que se coloca la muestra a observar. Tiene un orificio en el eje óptico del tubo que permite que pase el rayo de luz en dirección a la muestra.
La platina puede ser fija o giratoria. Si es giratoria, mediante tornillos puede centrarse o moverse con movimientos circulares.
6. Tornillo macrométrico
El dispositivo enganchado a este tornillo hace que el tubo del microscopio se deslice verticalmente gracias a un sistema de cremallera. Estos movimientos permiten que se enfoque rápidamente la preparación.
7. Tornillo micrométrico
Este mecanismo ayuda a enfocar la muestra con un enfoque exacto y nítido a través del movimiento casi imperceptible de la platina.
Sistema óptico
8. Oculares
Son los sistemas de lentes más cercanos a la mira del observador. Son cilindros huecos en la parte superior del microscopio provistos de lentes convergentes. Dependiendo de si existe uno o dos oculares, los
microscopios pueden ser monoculares o binoculares
9. Objetivos
Son las lentes que se regulan mediante el revólver. Son un sistema de lentes convergentes en las que se pueden acoplar varios objetivos.
Los objetivos llevan su aumento en un lateral y también están distinguidos por un anillo coloreado. Algunos de los objetivos no enfocan la preparación en el aire y necesitan utilizarse con aceite de inmersión.
10. Condensador
Es un sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra en la muestra proporcionando mayor o menor contraste.
Tiene un regulador para ajustar la condensación a través de un tornillo. La localización de este tornillo puede variar dependiendo del modelo de microscopio
11. Fuente de luz
La iluminación está constituida por una lámpara halógena. Dependiendo del tamaño del microscopio puede tener mayor o menor voltaje. Los microscopios pequeños más utilizados en laboratorios tienen un voltaje de 12 V. Esta iluminación se encuentra en la base del microscopio. La luz sale de la bombilla y pasa a un
,. (2012). Manual de microscopia. (12a ed.). DICIONES OMEGA, S.A.; 1st Edición.
Observación punta de raíz de cebolla
La mitosis es el proceso por el cual las células se dividen de forma que el material genético se reparte por igual entre las dos células hijas, y así las dos son genéticamente iguales. En las plantas la mitosis se produce sobre todo en los meristemos, que son los tejidos que permiten el crecimiento de la planta y que se encuentran entre otros lugares, en los extremos de los tallos y las raíces en este caso de la cebolla. En la muestra podemos ver células en diferentes fases o estados de división celular.
Esto observamos:
Observación de capsula bacteriana
Es una capa externa y viscosa de un grosor que oscila entre 100 y 400 Å. Es muy frecuente en las bacterias patógenas porque que facilita la adherencia a los tejidos del hospedador, esta cápsula es rica en polisacáridos y moléculas proteicas.
Esto observamos
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Observacion frotis de mejilla
La superficie bucal está tapizada por la MUCOSA BUCAL, un tapiz de células superpuestas formando varias capas y unidas entre sí formando el EPITELIO PLANO ESTRATIFICADO NO
QUERATINIZADO.
Esto observamos:
BIBLIOGARFIA
(2001). Instrucciones de manejo. Axiostar plus. Microscopio de luz transmitida y Fl.
Echeverría, O., & Nin, V. G.
(2000). Introducción a la
microscopía electrónica aplicada a
las ciencias biológicas (1.a^ ed.).
Fondo de Cultura Económica.
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