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Recomendaciones para la Eutanasia de los Animales de
Experimentación: Parte 2
Grupo de Trabajo: Mrs. Bryony Close (Presidencia), Dr. Keith
Banister, Dr. Vera Baumans, Dr. Eva-Maria Bernoth, Dr. Niall
Bromage, Dr. John Bunyan, Profesor Dr. Wolff Erhardt, Profesor
Paul Flecknell, Dr. Neville Gregory, Profesor Dr. Hansjoachim
Hackbarth, Profesor David Morton & Mr. Clifford Warwick
Envío de correspondencia a: Mrs. B Close, Battleborough Croft, Battleborough Lane,
Brent Knoll, Highbridge, Somerset TA9 4DS, UK
Este documento fue elaborado para la DGXI de la Comisión Europea, para ser utilizado con la Directiva 86/609/EEC del 24 de Noviembre de 1986, relativa a la aproximación de las disposiciones legales, reglamentarias y administrativas de los Estados Miembros respecto a la protección de los animales utilizados para experimentación y otros fines científicos (Nº L358, ISSN 0378-6978). Se refiere especialmente al Artículo 2(1) publicado por la Comisión Europea en Octubre de 1995, que define “el método de sacrificio humanitario” como “ el sacrificio de un animal con el mínimo sufrimiento físico y mental , dependiendo de las especies “.
Esta es la segunda parte del informe del
grupo de trabajo y engloba la Sección 3
del informe, la lista de todas las
referencias citadas en ambas partes y los
detalles de los materiales para formación
La primera parte, que comprende las
Secciones 1 y 2 del informe, junto con
una revisión bibliográfica, se publicó en el
ejemplar de Laboratory Animals de
Octubre de 1996 (30: 293-316).
Se puede disponer de las reimpresiones del
informe en inglés, que combinan ambas
partes, cursando la solicitud a:
Mrs. S E Wolfensohn, Supervisor of
Veterinary Services, University of Oxford,
Veterinary Services, c/o University
Laboratory of Physiology, Parks Road,
Oxford OX1 3PT, UK.
(Tel: +44(0)1865-272545,
Fax: +44(0)1865-272118)
Contenido de la Parte 2
3 Métodos de eutanasia para cada grupo de especies 2
3.1 Peces 2
3.2 Anfibios 6
3.3 Reptiles 8
3.4 Aves 11
3.5 Roedores 15
3.6 Conejos 18
3.7 Carnívoros: perros, gatos y hurones 21
3.8 Grandes mamíferos: cerdos, ovejas, cabras, ganado vacuno, caballos 24
3.9 Primates no humanos 27
3.10 Otros animales no utilizados habitualmente para experimentos 27
Referencias 28
Materiales de entrenamiento para eutanasia 31
2
3 Métodos de eutanasia para cada
grupo de especies
Antes de tener en cuenta esta sección, se debe consultar la Sección 1.
3.1. Peces
Hay más de 20.000 especies de peces con formas de vida enormemente variables, lo que hace muy difícil generalizar sobre métodos de eutanasia. Los métodos que se indican a continuación pretenden ser una guía y el técnico debe valorar cual es el mejor método para las especies que se deban sacrificar o solicitar información a los expertos. Se presenta un resumen en la Tabla 2. Aunque los peces no tengan las mismas vías espinotalámicas que los mamíferos para la percepción del dolor, existen pruebas de que efectivamente sienten el dolor y por este motivo deben ser sacrificados con el mismo cuidado y consideración. Todos los peces son sensibles a los cambios en los parámetros físicos y químicos del agua en la que viven (especialmente la temperatura, los niveles de gases disueltos, la salinidad, el pH, etc.) pero unas especies son mucho más tolerantes que otras a los cambios en alguno de estos parámetros. Por ello, a menos que se conozca la respuesta de las especies, es recomendable realizar la eutanasia en el mismo tipo de agua que sea habitual para la especie. Si hay que utilizar sustancias, se reducirá el nivel de agua para asegurar una sedación rápida, pero no demasiado para no producir angustia antes de añadir el agente. La dosificación es siempre preferible a la inyección ya que esta última implica manipulación del pez y esto le produciría estrés. Puede ser necesario que los peces ayunen entre 24- 48 h antes de la eutanasia química, ya que esto permitirá una absorción más rápida por el intestino y minimizará el riesgo de regurgitación que podría reducir el efecto de las sustancias químicas sobre las láminas de las agallas (Brown 1988). Los tanques que se utilicen deben permitir al técnico observar los peces y reaccionar rápidamente si hay signos de sufrimiento. En general el enfriamiento del agua reduce los procesos metabólicos y locomotores, facilitando así su manipulación, pero resulta esencial tener en cuenta la temperatura habitual del pez y su grado de tolerancia. Es importante señalar también que en los peces de agua salada se forman cristales de hielo dentro de las células antes de que se congele el agua marina, lo que produciría un dolor muy intenso en el pez. En los peces de agua dulce, se producirá antes la
congelación del agua que la formación de cristales internos. Sin embargo, hay que tener presente que el enfriamiento no reduce la capacidad de sentir dolor. La sobreexposición a un anestésico se manifiesta primeramente por el cese de los movimientos respiratorios, seguido de la sobreeextensión espasmódica o ensanchamiento de los opérculos. Al principio, estos procesos se producen cada 15- segundos y después a intervalos más largos. Cuando los intervalos entre espasmos son aproximadamente de 1 minuto, en pocos minutos se producirá la parada cardiaca y la muerte (Tabla 1).
Reconocimiento y confirmación de la muerte
Se puede reconocer la muerte por el cese de la respiración (movimiento opercular) y el cese del latido cardiaco (palpación). Cuando sea posible, se debe confirmar la muerte por destrucción del cerebro.
Larvas
Los peces se pueden clasificar en ovíparos, ovovivíparos o vivíparos, dependiendo de si producen huevos que eclosionan fuera del cuerpo, si los huevos eclosionan dentro del cuerpo o si expulsan individuos jóvenes e independientes (larvas).
Tabla 1 Fases de la pérdida de consciencia,
conducentes a la muerte en peces (según
McFarland y Klontz, 1969)
(VER PG. 33)
Métodos aceptables para peces
inconscientes
Inserción de aguja (Pithing) En peces
pequeños se puede usar este método, consistente en introducir una púa metálica en la parte superior de la cabeza entre los ojos, moviéndola hacia delante y hacia atrás para destruir el cerebro y el extremo proximal de la médula espinal. Este método solamente se debe utilizar en animales inconscientes. Se considera aceptable este método cuando los métodos químicos no son adecuados para el estudio.
Decapitación Ésta es posible en peces pequeños,
pero resulta problemática en peces de mayor tamaño. Sólo debe llevarse a cabo la decapitación de los peces previamente anestesiados o aturdidos, ya que existen algunas dudas acerca de la inmediata pérdida de consciencia. Investigaciones con anguilas, han puesto de manifiesto, que el cerebro todavía estaba en funcionamiento 35 minutos después de la decapitación (Verheijen & Flight 1995) y por ello el cerebro debe ser destruido inmediatamente. Este método es aceptable solamente si no se consideran adecuados otros métodos y bajo las limitaciones antes mencionadas. La sección transversal espinal (corte en el cuello) tampoco es aceptable, excepto con peces insensibles (Flight & Verheijen 1993).
Exanguinación No está considerada como un
método aceptable de eutanasia, ya que es muy lenta y resulta muy difícil localizar las venas, a menos que el animal esté insensible.
Métodos no aceptables para la eutanasia
de peces
Extracción del agua Esto produce angustia y
sufrimiento debido al largo periodo de tiempo que tardan en quedar inconscientes. Este periodo se prolonga considerablemente si se baja la temperatura. No es un método aceptable para la eutanasia de peces (Kestin 1993, Kestin et al. 1991).
Aplastamiento de todo el cuerpo No se
considera un método humanitario de eutanasia.
Aturdimiento eléctrico (electrical stunning)
Si no se utiliza un circuito aislado, podría ser peligroso para el técnico. El aturdimiento eléctrico no funciona con todos los peces (por ejemplo:
anguilas) y utilizado por sí solo no es necesariamente letal (puede que sólo aturda a los peces de mayor tamaño). La corriente alterna estimula la contracción de la musculatura esquelética, cardiaca y lisa, e induce tetania, no anestesia (Summerfelt & Smith 1990). Aunque es utilizado por expertos en las piscifactorías, a menudo para atrapar peces, no se considera aceptable para eutanasia, en condiciones de laboratorio.
Hipotermia La introducción de los peces en un
congelador o en hielo picado, prolonga el periodo de consciencia, y no reduce la capacidad de sentir el dolor. Por este motivo, no se debe utilizar como método de eutanasia.
Hipertermia Cuando se colocan peces en agua
caliente cerrarán fuertemente los opérculos, disponiendo de ese modo de una reserva de oxígeno que prolonga su periodo de consciencia. El agua hirviendo producirá un dolor extremo. Por este motivo este método no debe utilizarse para el sacrificio de peces de ningún tipo.
2-Fenoxietanol Se usa principalmente como
antibiótico pero también se utiliza como agente anestésico. Se necesitan dosis enormes para conseguir la muerte y, además, tiene un largo periodo de inducción. Algunas especies manifiestan hiperactividad previa a la pérdida de consciencia. No se considera aceptable para ser utilizado en la eutanasia de peces.
Dióxido de carbono No es aceptable para la
eutanasia de peces ya que causa actividad intensa previa a la pérdida de consciencia y es de actuación lenta.
Éter dietílico No se debe utilizar debido que
provoca la irritación de las membranas mucosas, así como al peligro que comporta para el técnico.
Secobarbital y amobarbital Ambos tienen la
desventaja de un periodo de inducción demasiado largo.
Uretano Es carcinogénico y por ello
extremadamente peligroso para el técnico.
Hidrato de cloral Posee un largo periodo de
inducción y sólo actúa como sedante.
Alcohol amílico terciario Produce irritación
durante la inducción.
Tribromoetanol Es irritante y posee un periodo
de inducción largo.
Clorbutanol Tiene la desventaja de requerir un
amplio rango de dosis para las distintas especies.
Metil pentinol Produce estrés por parada
respiratoria.
Piridinas Son peligrosas para el técnico.
3.2. Anfibios
Hay muchas especies de anfibios, lo que dificulta generalizar sobre métodos de eutanasia. Se presenta un resumen en la tabla 3. Su piel es fina y está protegida por una cutícula que contiene numerosas glándulas mucosas. La consecuencia de esto es que son generalmente más sensibles a las agresiones físicas y químicas que otros vertebrados. Debido a que los anfibios son poiquilotermos (de sangre fría) y por ello acostumbrados a las fluctuaciones de su temperatura corporal, su sistema nervioso central (SNC) es menos sensible a la hipoxia y a la anoxia. Incluso cuando se interrumpe el riego sanguíneo a los nervios craneales y al cerebro, estos animales
son capaces de responder a estímulos durante algún tiempo. Aunque la decapitación, por sí sola, no produce inconsciencia rápida en las cabezas separadas de los anfibios, la rápida destrucción del cerebro elimina realmente las respuestas que habitualmente se entiende que indican consciencia. Sin embargo, hay un conjunto de respuestas somáticas a los estímulos que se mantienen intactas –movimientos corporales mantenidos mucho tiempo, retirada de las extremidades como respuesta a estímulos de presión aplicados en los dedos, etc., así como un latido cardiaco que sigue en muchos casos durante horas después de la destrucción del cerebro. Esta continuación de la actividad somática se atribuye a:
(1) tolerancia prolongada a la hipoxia y a las condiciones de hipotensión de la médula espinal, nervios periféricos y musculatura (lisa, cardiaca y esquelética) y (2) un grado de integración mucho mayor de las respuestas somáticas a nivel de la médula espinal en lugar de en el cerebro. (UFAW/WSPA 1989)
Tabla 2 Características de los métodos de eutanasia en peces
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
MS-222 (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Benzocaína (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Etomidato (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Metomidato (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Concusión (^) ++ + + ++ - 4 Se debe confirmar la muerte Maceración (^) ++ ++ ++ ++ + 4 Sólo para peces de menos de 2 cm de longitud Quinaldina (^) ++ ++ ++ + ++ 4 Difícil de obtener en Europa Pentobarbital sódico
++ ++ - + ++ 3 Puede ser útil para peces grandes, inyección intraperitoneal Dislocación cervical
++ ++ + ++ - 3 No en peces grandes. Debe ser seguida de destrucción del cerebro Halotano (^) + + ++ ++ ++ 2 Son preferibles otros métodos. Se debe confirmar la muerte
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con peces inconscientes: inserción de aguja, decapitación y exanguinación
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de peces: extracción del agua, aplastamiento de todo el cuerpo, aturdimiento eléctrico, hipotermia, hipertermia, 2-fenoxietanol, dióxido de carbono, éter dietílico, secobarbital, amobarbital, uretano, hidrato de cloral, alcohol amílico terciario, tribromoetanol, clorbutanol, metil pentinol, piridinas.
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
Decapitación Es aceptable solamente en
anfibios insensibles ya que no se conoce el tiempo que tardan en quedar inconscientes debido a que su sistema nervioso es muy tolerante a la anoxia.
Métodos no aceptables para la eutanasia
de anfibios
Hipotermia Ésta dejara al animal aletargado pero
no reduce el dolor. La congelación no es aceptable, debido a que la formación de cristales dentro de los tejidos corporales es probable que sea extremadamente dolorosa. La congelación puede utilizarse solamente como método para confirmar la muerte después de haber utilizado otro método de eutanasia.
Hipertermia Como método de eutanasia no se
debe arrojar a los anfibios en agua caliente o hirviendo ya que es extremadamente doloroso e inhumano.
Exanguinación Junto con el shock hipovolémico
y la anoxia consiguientes, puede no dejar a los anfibios inconscientes inmediatamente, lo que hace que no sea un método aceptable de eutanasia.
Estrangulamiento Se considera inhumana y no
es aceptable para el sacrificio de anfibios.
Dióxido de carbono Puede causar irritación en la
piel, y la inducción requiere demasiado tiempo, por lo que no se considera un método aceptable de eutanasia.
Éter Es irritante para las membranas mucosas y
debido a que es peligroso para el técnico, no debe ser utilizado para el sacrificio de anfibios.
Cloroformo Es hepatotóxico y carcinogénico y
dado el riesgo que comporta para el personal no debe utilizarse para eutanasia.
Anestésicos inhalatorios volátiles No se
consideran aceptables ya que actúan lentamente y pueden irritar la piel.
Tabla 3 Características de los métodos de eutanasia en anfibios
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
MS-222 (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Benzocaína (^) ++ ++ ++ ++ ++ 5 Aceptable Pentobarbital sódico
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con anfibios inconscientes: inserción de aguja y decapitación
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de anfibios: hipotermia, hipertermia, exanguinación, estrangulación, dióxido de carbono, éter dietílico, cloroformo, anestésicos inhalatorios volátiles, hidrato de cloral, clorhidrato de ketamina, clorbutanol, metil pentinol, 2-fenoxietanol, alcohol amílico terciario, tribromoetanol y uretano
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
Otros agentes no considerados aceptables incluyen: hidrato de cloral, clorhidrato de ketamina, clorbutanol, metilpentinol, 2-fenoxietanol, alcohol amílico terciario, tribromoetanol y uretano.
3.3 Reptiles
Debido a que los reptiles son poiquilotermos (de sangre fría) y por ello acostumbrados a las fluctuaciones de su temperatura corporal, su sistema nervioso central (SNC) es menos sensible a un descenso en la tensión de oxígeno. Incluso cuando se interrumpe el riego sanguíneo a los nervios craneales y al cerebro después de la decapitación, estos animales son capaces de responder a estímulos durante algún tiempo. Aunque la decapitación, por sí sola, no produce inconsciencia rápida en las cabezas separadas de los reptiles (Warwick 1990), la rápida destrucción del cerebro elimina realmente las respuestas que habitualmente se cree que indican consciencia. Sin embargo, hay un conjunto de respuestas somáticas a los estímulos que se mantienen intactas –movimientos corporales mantenidos mucho tiempo, retirada de las extremidades como respuesta a estímulos de presión aplicados en los dedos, etc., así como un latido cardiaco que sigue en muchos casos durante horas después de la destrucción del cerebro. Esta continuación de la actividad somática se atribuye a:
(1) tolerancia prolongada a la hipoxia y a las condiciones de hipotensión de la médula espinal, nervios periféricos y musculatura (lisa, cardiaca y esquelética) y (2) un grado de integración mucho mayor de las respuestas somáticas a nivel de la médula espinal en lugar de en el cerebro. (UFAW/WSPA 1989).
Antes de llevar a cabo la eutanasia es importante utilizar buenas técnicas de inmovilización para asegurar el mínimo estrés. Deben tomarse precauciones especiales cuando se manipulen especies venenosas, como muchos tipos de serpientes, especialmente cuando no están habituadas a ser manipuladas. Para asegurar una inmovilización firme pero no traumática en la manipulación de lagartos y serpientes resulta muy útil utilizar instrumentos almohadillados. El enfriamiento hasta 3-4 °C reducirá los procesos metabólicos y locomotores en la mayoría de los reptiles (esta temperatura puede matar algunas especies tropicales), facilitando de este modo la manipulación previa a la eutanasia. Sin embargo,
hay que tener presente que el enfriamiento no reduce la capacidad de sentir dolor. En tortugas terrestres, de mar y de agua dulce, la retracción de la cabeza y la protección del caparazón pueden dificultar la eutanasia. Para ayudar a exponer la cabeza se pueden colocar las tortugas de tierra en agua tibia poco profunda; las especies marinas grandes se pueden colocar sobre un armazón inclinado 45° con la cabeza arriba, induciendo la extensión del cuello; las especies de caparazón blando se pueden poner sobre su espalda para inducir la extensión del cuello. Para facilitar la manipulación de las especies acuáticas se pueden utilizar guantes de textura rugosa pero no abrasiva. En la inmovilización de cocodrilos el factor clave para la seguridad del técnico, es la inmovilización de las mandíbulas y la cola, que sólo debe ser realizada por expertos (UFAW/WSPA 1989). La tabla 4 contiene un resumen de recomendaciones.
Reconocimiento y confirmación de la muerte
Dado que es difícil determinar en los reptiles cuando están inconscientes o muertos, se recomienda confirmar la muerte por destrucción del cerebro. Frecuentemente, pero no siempre, la falta de reflejo palpebral o de respuesta en la membrana nictitante, excepto en las serpientes que no poseen párpados móviles, implica la falta de consciencia. El rigor mortis y la ausencia prolongada de latido cardiaco y/o circulación son indicadores fiables de la muerte.
Embriones
En el caso de los reptiles hay que considerar dos estadios diferentes: los huevos y los individuos de eclosión reciente. A efectos prácticos, a los reptiles recientemente eclosionados se les puede tratar igual que a los adultos. Como los reptiles nacen como individuos totalmente desarrollados (con la excepción de no ser capaces de reproducirse), el sacrificio de embriones en estadío de huevo se debe realizar de un modo humanitario teniendo en cuenta su potencial desarrollo avanzado. En general los huevos pueden sucumbir a altas y bajas temperaturas, pero algunos pueden resistir la congelación. No se consideran aceptables la hipotermia ni la hipertermia por que no se puede garantizar una muerte humanitaria. El ahogamiento no se considera humanitario ya que produce la muerte por anoxia de un modo lento. Los huevos sin embrión se pueden congelar.
Exanguinación No se considera humanitaria
debido a la tolerancia de los animales a la hipoxia.
Cloroformo Se ha utilizado para el sacrificio de
tortugas inyectándolo en la cavidad peritoneal, aparentemente sin efectos indeseables. Se consideran más aceptables otros métodos debido al trauma potencial en el animal inyectado y al peligro para el técnico. El cloroformo es hepatotóxico y carcinogénico para el técnico.
Tricaína metano sulfonato (MS-222) Se ha
utilizado inyectándolo por vía intramuscular en serpientes y caimanes. Existe poca información sobre lo humanitario de este método y por ello no se considera aceptable.
Los reptiles son capaces de aguantar la respiración durante un periodo de tiempo relativamente largo y por ello los métodos inhalatorios como el éter, halotano, enflurano, isoflurano y metoxiflurano no pueden ser considerados factibles ni humanitarios debido a su lenta inducción. Otros agentes que no se deben utilizar para el sacrificio de reptiles incluyen el CO 2 , agentes bloqueantes neuromusculares, clorhidrato de ketamina (la inducción es demasiado lenta) , hidrato de cloral y procaína.
3.4 Aves
Las aves poseen un sistema respiratorio complejo que consta de pulmones y numerosos sacos aéreos con circulación de aire en un solo sentido. Esto
puede influir en la tasa de absorción de agentes inhalatorios y de ese modo incrementar su eficiencia. Se presenta un resumen de recomendaciones en la tabla 5.
Reconocimiento y confirmación de la muerte
Se pude reconocer la muerte por la ausencia de signos respiratorios, parada cardiaca y ausencia de reflejos en la cabeza (esto es, los reflejos de los nervios craneales mas que los reflejos de la médula espinal). Los reflejos que se deben comprobar deben incluir el pellizco de las barbas o el de parpadeo. Hay que asegurar la muerte por destrucción del cerebro o asegurando el cese del latido cardiaco.
Embriones
Los embriones de ave a partir del estado en el que se ha desarrollado el tubo neural constituyendo un cerebro funcional (>50% de la gestación) se deben destruir humanitariamente ya que pueden ser capaces de percibir dolor desde esa etapa. El método más empleado habitualmente para la destrucción de huevos es enfriarlos o congelarlos. La temperatura que se recomienda es <4 °C durante cuatro horas. Se debe confirmar la muerte por decapitación o algún otro método adecuado. Cuando por necesidad de los estudios el embrión ha quedado expuesto, la decapitación está considerada como un método aceptable de eutanasia, así como una sobredosis de anestésico.
Tabla 4 Características de los métodos de eutanasia en Reptiles
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
Pentobarbital sódico
++ ++ ++ + ++ 5 Aceptable, pero implica manipulación Bala cautiva (^) ++ ++ ++ + + 5 Aceptable para grandes reptiles Concusión (^) + + + ++ + 4 Debe ser seguido de la destrucción del cerebro Disparo (^) ++ ++ ++ - + 4 Sólo es aceptable en condiciones de campo
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con reptiles inconscientes: inserción de aguja y decapitación
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de reptiles: sección de la médula espinal, hipotermia, hipertermia, exanguinación, cloroformo, MS-222, éter, halotano, metoxiflurano, isoflurano, enflurano, dióxido de carbono, agentes bloqueantes neuromusculares, clorhidrato de ketamina, hidrato de cloral y procaína
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
También se consideran métodos humanitarios para el sacrificio de embriones de aves la rotura de las membranas y la maceración (en un macerador diseñado con este fin) (Bandow 1987).
Adultos
Los detalles adicionales sobre los métodos se pueden encontrar en la Sección 2.
Métodos físicos
Dislocación cervical La dislocación cervical, si
se lleva a cabo cerca de la cabeza, produce lesiones en la región inferior del cerebro, lo que produce una pérdida de consciencia rápida y sin dolor. Esta debe estar siempre inmediatamente seguida por la destrucción del cerebro o por la sección de los grandes vasos sanguíneos del cuello. Sin embargo, hay investigaciones que han puesto de manifiesto que los potenciales visuales evocados pueden permanecer hasta 30 segundos después de la dislocación, lo que puede indicar ausencia de insensibilidad (Gregory & Wotton 1990). Por ello, se consideran preferibles otros métodos. Este método no es estéticamente agradable ya que los reflejos se mantienen presentes durante algún tiempo. No debe utilizarse con aves de más de 3 kg o por encima de cierta edad, casos en los que el tirar del cuello rápidamente resulta difícil. Se puede utilizar este método con pollitos de un día siempre que su número se mantenga bajo para evitar errores humanos debidos al cansancio (Jaksch 1981). Se deben inmovilizar las alas de las aves para evitar el aleteo involuntario (Clifford 1984).
Maceración Este método se puede utilizar para
pollitos de hasta 72 horas de vida, utilizando un aparato especial que contiene cuchillas para el sacrificio y cuyo funcionamiento mecánico produce una rotación muy rápida (Comisión de las Comunidades Europeas 1993). Sólo se debe utilizar equipamiento diseñado con este fin y que cumpla los estándares de la Directiva del Consejo 93/119/EC. Las cuchillas deben girar a más de 5.000 r.p.m. Los técnicos deben estar entrenados en la utilización de este equipamiento y también en su mantenimiento para asegurar que funcione correctamente en todo momento. La capacidad y el diseño del aparato deben ser suficientes para asegurar que los animales sean sacrificados inmediatamente, sin posibilidad de que puedan ser lanzados hacia fuera por las cuchillas giratorias. En los aparatos más pequeños hay que dejar caer a los pollitos de uno en uno a través de un conducto especial que reduzca las posibilidades de que sean
lanzados al exterior por las cuchillas, pero los aparatos grandes se han diseñado para poder sacrificar un numero mayor de pollitos simultáneamente, sin el riesgo de ser lanzados hacia fuera. Para algunos técnicos este método puede ser estéticamente desagradable. En ningún caso se deben utilizar aparatos domésticos.
Concusión Se lleva a cabo con un fuerte golpe en
la cabeza y en aves pequeñas (<250 gramos) se puede realizar golpeando la cabeza sobre el canto de una mesa. Aunque no es agradable estéticamente, si se lleva a cabo de modo correcto por una persona entrenada y con experiencia en la técnica, es rápida y humanitaria. Este método puede ser aceptable para cantidades pequeñas de pollitos de un día. A menos que se produzca suficiente lesión en el cerebro dando como resultado la muerte inmediata, debe ser seguida de la destrucción del cerebro.
Microondas Las aves pequeñas se pueden
sacrificar rápida y humanitariamente por las microondas emitidas por aparatos especializados (Zeller et al. 1989). En ningún caso deben utilizarse aparatos de microondas para el hogar. Los técnicos deben recibir entrenamiento especializado en esta técnica para garantizar la dirección precisa del haz de microondas y así una muerte humanitaria. Este método no debe considerarse como un método de eutanasia de rutina.
Aturdimiento eléctrico El aturdimiento eléctrico
se usa habitualmente en los mataderos, pero generalmente no se considera aceptable para ser utilizado en al laboratorio, a menos que se haga con equipamiento especializado, seguridad para el personal y bajo controles legales. El ave debe quedar aturdida antes de que se produzca la parada cardiaca (esto es, que se coloquen los electrodos de tal modo que se afecte primero al cerebro).
Métodos químicos
Agentes inhalatorios
Dióxido de carbono Este método se usa a gran
escala con pollitos de hasta 72 horas (Clifford 1984). Estos pollitos son jóvenes y relativamente insensibles al CO 2 por lo que pueden necesitar dosis mayores que las aves adultas. Hay que colocar a los pollitos durante al menos diez minutos en bolsas no porosas o en contenedores con el 100% de CO 2 utilizando un sistema de alimentación para gases. Resulta preferible utilizar un sistema cerrado que proporciona una inducción más rápida
Exanguinación No es un método aceptable para
el sacrificio de aves debido a que la sangre se coagula fácilmente, produciendo posiblemente una exanguinación incompleta.
Descompresión (creando vacío) Ésta induce
disnea. Después de 20 segundos a 60 mmHg las aves se colapsan. Debido a que no se conoce el tiempo que tardan en quedar inconscientes y a que la descompresión produce la rápida expansión de los gases en los sacos aéreos y en los huesos neumáticos, lo que puede producir dolor, este método no es aceptable en condiciones de laboratorio.
Protóxido de nitrógeno Se necesitan
concentraciones hipóxicas de casi el 100% para que sea eficaz y es de actuación lenta. El animal presenta convulsiones después de perder la consciencia, lo que puede disuadir a algunos técnicos. No es aceptable para la eutanasia de aves.
Éter y Cloroformo No se deben utilizar para el
sacrificio de aves debido al peligro extremo para el técnico y a la irritación de las vías aéreas del ave.
Ciclopropano Es humanitario y produce una
rápida anestesia, pero es inflamable y explosivo con aire. Debido al peligro para el técnico, el ciclopropano no es aceptable para la eutanasia de aves.
Tabla 5 Características de los métodos de eutanasia en aves
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
Pentobarbital sódico
++ ++ + + ++ 5 Aceptable
T-61 (^) ++ ++ + + ++ 4 Requiere práctica: sólo aceptable con aves pequeñas (<250 gramos) Dióxido de carbono
++ ++ ++ ++ + 4 Método aceptable, especialmente para pollitos Halotano, Enflurano, Isoflurano
++ ++ ++ + ++ 4 Aceptable
Maceración
++ ++ ++ ++ - 4 Aceptable para pollitos de hasta 72 horas Dislocación cervical
++ ++ - ++ - 4 Aceptable para aves pequeñas y jóvenes (<250 gramos) si va seguido de la destrucción del cerebro Microondas (^) ++ ++ - ++ + 3 Debe ser utilizado solamente por personal con experiencia. No es un procedimiento de rutina Concusión (^) ++ ++ - ++ - 3 Aceptable para aves por debajo de 250 gramos Monóxido de carbono
- ++ - + 2 Peligroso para el técnico
Aturdimiento eléctrico
- 1 Peligroso para el técnico. Son preferibles otros métodos
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con aves inconscientes: decapitación, inserción de aguja, nitrógeno, cloruro potásico
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de aves: rotura de cuello, descompresión, exanguinación, protóxido de nitrógeno, éter dietílico, cloroformo, ciclopropano, gas cianhídrico, tricloroetileno, metoxiflurano, hidrato de cloral, estricnina, nicotina, sulfato magnésico, ketamina y agentes bloqueantes neuromusculares
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
Gas cianhídrico Éste produce muerte rápida e
irreversible por hipoxia citotóxica, pero también produce excitabilidad y angustia antes de la muerte, lo que lo hace totalmente inaceptable.
Otros agentes que no se deben utilizar incluyen metoxiflurano, tricloroetileno, hidrato de cloral, estricnina, nicotina, sulfato magnésico, ketamina como agente único y agentes bloqueantes neuromusculares.
3.5 Roedores
Los roedores son los animales más habitualmente utilizados con fines experimentales e incluyen ratones, ratas, hámsters, cobayas, gerbillos, musarañas y lirones. Se presenta un resumen de recomendaciones en la tabla 6.
Reconocimiento y confirmación de la
muerte
El cese de la respiración y del latido cardiaco y la ausencia de reflejos son buenos indicadores de la muerte irreversible en roedores. La muerte se puede confirmar por exanguinación o extracción del corazón, evisceración, congelación rápida o decapitación. El personal debe ser entrenado para reconocer y asegurar la muerte cuando sacrifique roedores.
Embriones
El momento en que se ha desarrollado el tubo neural, constituyendo un cerebro funcional (hacia el 60% de la gestación), debe tomarse como punto a partir del cual, el feto puede percibir dolor y por ello, debe ser sacrificado humanitariamente. Hay una gran variación en el grado de desarrollo en el momento del nacimiento de los diversos roedores. Los ratones y las ratas son totalmente dependientes al nacer y tienen muy pocas capas de desarrollo neuronal en la corteza cerebral, mientras que los cobayos están totalmente desarrollados y ya son independientes en el momento del nacimiento. Si se extrae un feto de una madre anestesiada, estando también insensible, se puede sacrificar por decapitación o extracción del corazón. Sin embargo, cuando se vaya a extraer un feto, se debe administrar a la madre una cantidad de anestésico mayor y se debe mantener durante más tiempo para asegurar que el anestésico ha cruzado la placenta. En muchos casos los anestésicos inhalatorios no anestesian a los fetos. Los fetos por debajo de 4 gramos que no estén anestesiados antes de extraerlos de la madre, se pueden sacrificar por
enfriamiento rápido en nitrógeno líquido.
Neonatos
Son roedores recién nacidos de hasta 10 días de edad. Pueden reaccionar a los estímulos dolorosos más como embriones que como adultos. Se pueden sacrificar por decapitación o concusión. Se puede considerar la hipotermia (Phifer & Terry 1986). No se recomienda el dióxido de carbono ya que los neonatos son más resistentes, incrementándose el tiempo que tardan en quedar inconscientes. Son necesarias nuevas investigaciones para valorar qué métodos son los más humanitarios.
Adultos
Se pueden encontrar detalles adicionales sobre los métodos en la Sección 2.
Métodos físicos
Cuando se lleven a cabo métodos físicos para el sacrificio de roedores, se debe considerar una cuidadosa manipulación e inmovilización del animal antes del sacrificio. Es preferible una mínima manipulación e inmovilización. Se puede reducir el temor y la ansiedad del animal con sedación previa o si son manipulados por personas conocidas.
Concusión Es un método rápido y humanitario
para el aturdimiento de roedores siempre que lo realicen técnicos experimentados y seguros. Sólo se debe utilizar con roedores de menos de 1 kg. Por encima de este peso se requiere una habilidad considerable y a veces una gran fuerza para realizarlo de manera eficaz. Se debe confirmar siempre la muerte.
Dislocación cervical Es un método de sacrificio
humanitario y usado habitualmente para la mayoría de los roedores pequeños (por debajo de 150 gramos (Marshall et al. 1994)) ya que causa grandes lesiones al tronco encefálico produciendo inconsciencia inmediata y muerte. Es más difícil con hámsters y cobayas debido a sus cuellos cortos, con músculos más fuertes y a los pliegues de la piel que cubre cuello y omóplatos. En ratones y ratas se sitúan pulgar e índice a cada lado del cuello junto a la base del cráneo o, de modo alternativo, se presiona una varilla junto a la base del cráneo y en ese momento con la otra mano, se tira rápidamente de la base de la cola o de los miembros posteriores, produciendo la separación entre las vértebras cervicales y el cráneo. Los roedores más grandes y las ratas de más edad deben ser sedados o aturdidos
T-61 El T-61 actúa rápidamente pero tiene que ser
inyectado por vía intravenosa muy lentamente, lo que no es siempre fácil en roedores. No se debe inyectar por ninguna otra vía en estas especies. Puede ser necesaria la sedación previa para ayudar a la inmovilización durante la inyección. El personal debe estar bien entrenado en las técnicas de inyección intravenosa.
Métodos aceptables con roedores
inconscientes
Congelación rápida Sólo puede ser utilizada una
vez que el roedor (>4 gramos) está totalmente inconsciente.
Exanguinación Puede ser utilizada una vez que el
roedor está inconsciente.
Embolia gaseosa Sólo puede ser utilizada con
roedores inconscientes ya que puede ser dolorosa.
Cloruro potásico Es cardiotóxico y produce
jadeo, vocalizaciones, espasmos musculares y ataques convulsivos lo que lo hace inaceptable para muchos técnicos. Puede utilizarse una vez que el animal esté totalmente anestesiado.
Etanol Ha sido utilizado inyectado
intraperitonealmente al 70% (Lord 1989). Sin embargo, Wallgren & Barry III (1970) establecieron que es irritante por encima del 10%, lo que hace que sea inaceptable para eutanasia a menos que el roedor esté inconsciente.
Tabla 6 Características de los métodos de eutanasia en roedores
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
Halotano, enflurano, isoflurano
++ ++ ++ + ++ 5 Aceptable
Pentobarbital sódico
++ ++ + + ++ 5 Aceptable
Concusión (^) ++ ++ + ++ - 4 Aceptable para roedores por debajo de 1 kg. Se debe confirmar la muerte por el cese de la circulación Dislocación cervical
++ ++ + ++ - 4 Aceptable para roedores por debajo de 150 gramos. Se debe confirmar la muerte por el cese de la circulación T-61 (^) ++ ++ - + ++ 4 Sólo debe inyectarse por vía intravenosa Dióxido de carbono
- ++ ++ ++ ++ 4 Método aceptable a concentración
70% Microondas (^) ++ ++ - ++ + 3 Debe ser utilizado solamente por personal con experiencia. No es un procedimiento de rutina Decapitación (^) + + + ++ - 2 Son preferibles otros métodos Monóxido de carbono
- ++ 2 Peligroso para el técnico
Congelación rápida
- ++ ++ + 1 Solamente para pequeños neonatos (<4 gramos)
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con roedores inconscientes: congelación rápida, exanguinación, embolia gaseosa, cloruro potásico, etanol
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de roedores: hipotermia, descompresión, asfixia, ahogamiento, nitrógeno, protóxido de nitrógeno, ciclopropano, éter dietílico, cloroformo, metoxiflurano, gas cianhídrico, tricloroetileno, estricnina, nicotina, hidrato de cloral, sulfato magnésico y agentes bloqueantes neuromusculares
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
Métodos no aceptables para la eutanasia
de roedores
Hipotermia Bajo ninguna circunstancia se
sacrificarán roedores poniéndolos en un congelador. La congelación sólo puede utilizarse como método para asegurar la muerte.
Nitrógeno Éste mata los roedores por hipoxia
haciéndolo inaceptable ya que tarda más que otros agentes para conseguir la inconsciencia. Las ratas exhiben signos de pánico y angustia antes de la inconsciencia (Hornett & Haynes 1984).
Protóxido de nitrógeno Éste mata por anoxia, es
lento y los roedores muestran signos de mayor actividad antes de la muerte, indicando un grado de ansiedad que lo hace inaceptable como método de eutanasia.
Ciclopropano Es un agente humanitario y rápido
para el sacrificio de roedores pero es extremadamente peligroso para el técnico y por ello no se considera aceptable.
Éter y cloroformo No se deben utilizar bajo
ninguna circunstancia para el sacrificio de roedores. Ambos son extremadamente peligrosos para el técnico y el éter produce irritación de las vías aéreas al ser inhalado.
Los siguientes métodos no deben ser usados para sacrificio de roedores: descompresión, asfixia, ahogamiento, tricloroetileno, metoxiflurano, gas cianhídrico, estricnina, nicotina, hidrato de cloral, sulfato magnésico, fármacos curariformes y agentes bloqueantes neuromusculares.
3.6. Conejos
Se presenta un resumen de recomendaciones en la Tabla 7.
Reconocimiento y confirmación de la
muerte
El cese de la respiración, del latido cardiaco y la ausencia de reflejos son buenos indicadores de la muerte irreversible en conejos. Se debe confirmar la muerte por exanguinación o extracción del corazón, evisceración o decapitación. Se debe entrenar al personal para reconocer y asegurar la muerte cuando sacrifique conejos.
Embriones
El momento en que el tubo neural se ha desarrollado constituyendo un cerebro funcional (hacia el 60% de la gestación) se debe tomar como punto a partir del cual el feto puede percibir el dolor y por ello debe ser sacrificado humanitariamente. Si se extrae un feto insensible de una madre anestesiada se puede sacrificar por decapitación o extracción del corazón. Sin embargo, cuando hay que extraer fetos, se debe administrar a la madre una cantidad mayor de anestésico y mantenerlo por más tiempo para asegurar que éste atraviese la placenta. En muchas ocasiones los anestésicos inhalatorios no anestesian a los fetos. Cuando se sacrifica a la madre, aquellos fetos que no se extraen morirán por anoxia y no es necesario ningún método adicional para asegurar la muerte de los fetos.
Neonatos
Son los conejos recién nacidos de hasta diez días de edad. Pueden reaccionar a los estímulos dolorosos más como embriones que como adultos. Pueden ser sacrificados por decapitación y concusión. Son necesarias nuevas investigaciones para valorar qué métodos son los más humanitarios.
Adultos
Se pueden obtener detalles adicionales sobre los métodos en la Sección 2.
Métodos físicos
Cuando se utilicen métodos físicos para el sacrificio de conejos se debe considerar una manipulación e inmovilización cuidadosas del animal antes del sacrificio. Es preferible la mínima manipulación e inmovilización. El temor y la ansiedad del animal se pueden reducir con sedación previa o manipulación por personas conocidas.
Concusión Es un método rápido y humanitario
para aturdir conejos siempre que sea llevada a cabo por técnicos experimentados y seguros. Ésta implica golpear la base de la cabeza en la parte superior del cuello en la región occipital. Se debe confirmar siempre la muerte por el cese de la circulación.
Pentobarbital sódico Inyectado por vía
intravenosa, el pentobarbital sódico actúa rápida y humanitariamente en el sacrificio de conejos. Es el agente más aceptable para eutanasia. El pentobarbital sódico puede producir irritación del peritoneo, lo que puede evitarse diluyéndolo.
T-61 El T-61 actúa rápida y humanitariamente
pero sólo puede ser inyectado lentamente por vía intravenosa. No debe ser nunca inyectado por ninguna otra vía. Se puede considerar la sedación previa para ayudar en la inmovilización durante la
inyección. Se debe entrenar bien al personal en las técnicas de inyección intravenosa. El personal debe tener un cuidado extremo cuando utilice este agente.
Métodos aceptables con conejos
inconscientes
Exanguinación Puede ser utilizado para el
sacrificio de conejos una vez estén totalmente inconscientes.
Nitrógeno Los conejos mueren por hipoxia y por
Tabla 7 Características de los métodos de eutanasia en conejos
Agente Rapidez Eficacia
Facilidad de uso
Seguridad del técnico Valoración estética
Valoración general (1-5) Observaciones
Pentobarbital sódico
++ ++ + + ++ 5 Aceptable
T-61 (^) ++ ++ - + ++ 4 Aceptable. Sólo por vía intravenosa Dislocación cervical
++ ++ - ++ - 4 Aceptable para conejos de menos de 1 kg. Sedación previa a la dislocación. Se debe confirmar la muerte por el cese de la circulación Bala cautiva (^) ++ ++ - + + 4 Requiere habilidad. Se debe confirmar la muerte por otro método Concusión (^) ++ + - ++ - 3 Se requiere experiencia. Se debe asegurar la muerte por otro método Aturdimiento eléctrico
++ + ++ - + 3 Se debe confirmar la muerte por otro método Microondas (^) ++ ++ - ++ + 3 Se debe utilizar por personal experimentado solamente con conejos pequeños. No es un procedimiento de rutina Decapitación (^) + + + ++ - 2 Aceptable para conejos por debajo de 1 kg, si no se dispone de otros métodos Halotano, enflurano, isoflurano
++ ++ ++ + - 2 Los conejos muestran signos de angustia
Dióxido de carbono
- ++ ++ + 1 Los conejos grandes manifiestan angustia Monóxido de carbono
- ++ - ++ 1 Peligroso para el técnico
Congelación rápida
- ++ ++ + 1 Solamente para fetos por debajo de 4 gramos. Son preferibles otros métodos
Los siguientes métodos sólo pueden utilizarse con conejos inconscientes: exanguinación, nitrógeno, cloruro potásico y embolia gaseosa
Los siguientes métodos no hay que usarlos para sacrificio de conejos: hipotermia, descompresión, asfixia, ahogamiento, protóxido de nitrógeno, ciclopropano, éter dietílico, cloroformo, tricloroetileno, gas cianhídrico, metoxiflurano, hidrato de cloral, estricnina, nicotina, sulfato magnésico, ácido cianhídrico, clorhidrato de ketamina y agentes bloqueantes neuromusculares
Rapidez : ++ muy rápido, + rápido, - lento. Eficacia : ++ muy eficaz, + eficaz, - no es efectivo. Facilidad de uso : ++ fácil de utilizar, + requiere práctica, - requiere entrenamiento de especialización. Seguridad para el técnico : ++ sin riesgo, + riesgo pequeño, - peligroso. Valoración estética : ++ estéticamente bueno, + aceptable para la mayoría, - inaceptable para muchos. Valoración general : de 1 a 5, siendo el 5 el más recomendable
ello no se considera aceptable para la eutanasia de conejos, a menos que estén inconscientes.
Cloruro potásico Es cardiotóxico y produce
jadeo, vocalizaciones, espasmos musculares y ataques convulsivos que lo hacen inaceptable para muchos técnicos. Sólo puede ser utilizado una vez que el animal esté totalmente anestesiado.
Embolia gaseosa La inyección intravenosa de
aire, a razón de 5-50 ml/kg, produce la muerte rápidamente, pero como se acompaña de convulsiones, opistotonos, dilatación pupilar y vocalizaciones, no es un método aceptable a menos que el conejo esté totalmente inconsciente.
Métodos no aceptables para la eutanasia
de conejos
Hipotermia Bajo ninguna circunstancia se deben
sacrificar conejos poniéndolos en un congelador.
Protóxido de nitrógeno Produce la muerte por
anoxia, actúa lentamente, y los conejos muestran signos de mayor actividad antes de la muerte, indicando un grado de ansiedad. Por ello no se considera un método aceptable.
Metoxiflurano Tarda demasiado tiempo en
actuar, con grandes posibilidades de recuperación.
Ciclopropano Puede ser un método de eutanasia
humanitario y rápido, pero es muy peligroso para el técnico y por ello no se considera aceptable para uso general.
Éter y cloroformo No se deben utilizar bajo
ninguna circunstancia para la eutanasia de conejos. Ambos son peligrosos para el técnico y el éter produce irritación de las vías respiratorias al ser inhalado.
Clorhidrato de ketamina La inyección
intravenosa produce contracciones tónicas, acompañadas de vocalizaciones, siendo por ello inaceptable para la eutanasia de conejos.
Otros agentes que no deben ser utilizados para el sacrificio de conejos incluyen descompresión, asfixia, ahogamiento, tricloroetileno, gas cianhídrico, ácido cianhídrico, estricnina, nicotina, hidrato de cloral, sulfato magnésico y agentes bloqueantes neuromusculares.
3.7 Carnívoros - perros, gatos, hurones
Se presenta un resumen de recomendaciones en la Tabla 8.
Reconocimiento y confirmación de la
muerte
El cese de la respiración, del latido cardiaco y la pérdida de reflejos son buenos indicadores de la muerte en carnívoros. Se debe confirmar la muerte por exanguinación. Se debe entrenar al personal para reconocer y asegurar la muerte cuando sacrifique perros, gatos, hurones u otros carnívoros.
Embriones
El momento en que el tubo neural se ha desarrollado constituyendo un cerebro funcional se debe tomar como el punto a partir del cual el feto puede percibir dolor (30% de la gestación) y por ello deben ser sacrificados humanitariamente. Si se extrae un feto insensible de una madre anestesiada puede ser sacrificado por decapitación o extracción del corazón. Sin embargo, cuando se vayan a extraer fetos se debe administrar a la madre una cantidad mayor de anestésico y mantenerlo por más tiempo para asegurar que el anestésico atraviesa la placenta. En muchos casos los anestésicos inhalatorios no anestesian a los fetos.
Neonatos
Los neonatos de carnívoros, en general deben tratarse como adultos. El método preferible es el pentobarbital sódico, pero se pueden considerar el CO (^) 2, la dislocación cervical y la concusión (Hall
- (ver Sección 2). Se debe entrenar bien a los técnicos en las técnicas físicas para asegurar que las lleven a cabo correcta y humanitariamente. Inmediatamente después de la concusión o de la dislocación cervical se debe exanguinar a los animales.
Adultos
Se dan detalles adicionales sobre los métodos en la Sección 2.
Métodos físicos
En general no se recomienda el uso de los métodos físicos de eutanasia en carnívoros. Sin embargo,
