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Tecnicas de hematologia, fundamento, material, interpretacion y conceptos basicos de la materia. Para practicas de laboratorio.
Tipo: Diapositivas
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COIS01-E 18/10/12 IMPORTADORES EXCLUSIVOS: LAB CENTER DE MEXICO S.A. DE C.V. TEL : 01 (55) 5360-6772 Y 01 800 500 SPIN (7746) www.spinreact.com.mx [email protected]
Determinación cuantitativa del Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (APTT) IVD
Conservar a 2-8ºC
PRINCIPIO DEL MÉTODO Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro cálcico (CaCl 2 ) hasta la formación del coágulo de fibrina 3,4.
SIGNIFICADO CLÍNICO La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca (Factores VIII, IX, XI, XII). Se usa normalmente para la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina 1,2. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
R 1 Activador
Ácido elágico Tampón y conservantes.
R 2 Iniciador
Cloruro cálcico (CaCl 2 ) 0,02M
Opcional
Los reactivos están listos para su uso. R1: Una vez abierto es estable 1 mes a 2-8ºC.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. Después de un almacenamiento prolongado puede aparecer un sedimento amarillo. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. No congelar el reactivo. Indicadores de deterioro de los reactivos:
MATERIAL ADICIONAL
MUESTRAS Plasma obtenido por punción venosa diluido 1/10 en solución de citrato trisódico 3,8%. Mezclar inmediatamente la sangre con el anticoagulante. Evitar la formación de espuma. Centrifugar la muestra a 2500 x g 15 min y transferir el plasma. Usar solo contenedores de vidrio siliconado o plástico. Los plasmas turbios, ictéricos, lipémicos o hemolizados pueden dar resultados erróneos. La muestra es estable 2 horas a temperatura ambiente (15-25ºC) o 28 días si se congela inmediatamente a – 20ºC.
PROCEDIMIENTO El reactivo puede emplearse en técnica manual, mecánica, foto-óptica o con cualquier instrumento apto para detectar la formación del coágulo (Nota
instrucciones del instrumento.
TÉCNICA MANUAL
Plasma citratado (μL) 100 R1 (μL) 100
CÁLCULOS Los valores se pueden expresar en segundos o en tasa de APTT, dividiendo el resultado de la muestra (sec) por el tiempo de reacción del plasma Control (sec).
APTT de plasma normal (pool %) en segundos
APTT del paciente en segundos Tasa de APTT
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: CONTROL NORMAL REF: 1709104 CONTROL PATHOLOGIC REF: 1709106 Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se debe revisar el instrumento, los reactivos o la técnica. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA Se ha realizado un estudio exhaustivo con 250 muestras de una población sana y como resultado se han establecido los valores de referencia siguientes: APTT (segundos) 24 - 36 sec. Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO Sensibilidad frente a la heparina: Heparina conc. (unid/mL) APTT (sec) 0,0 28, 0,1 38, 0,2 50, 0,3 63, 0,4 80, 0,5 98,
Sensibilidad frente a los factores de coagulación: Se considera una adecuada sensibilidad un factor de actividad < 30-40%. Factor % actividad APTT (sec) % Factor VIII APTT (sec) VIII <1% 82,0 100% 32, VIII 20% 44,8 70% 34, IX <1% 83,5 50% 36, IX 20% 40,9 40% 38, XI <1% 134,2 30% 40, XI 20% 47,8 20% 44, XII <1% >200 10% 50, XII 20% 36,2 5% 56, Prekallikrein <1% 69,5 1% 68, <1% 83, Estos valores deben ser usados solo como referencia. Cada laboratorio debe establecer sus propio índice de sensibilidad a los factores individuales.
INTERFERENCIAS No usar como anticoagulante oxalato sódico, EDTA o heparina. Anticonceptivos orales, estrógenos o embarazo pueden influir en los resultados. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en su determinación 5,6.
NOTAS
BIBLIOGRAFIA
PRESENTACION Ref: 1709201 R1: 5 x 4 mL R2: 5 x 4 mL
Cont.