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Asignatura: metodos, Profesor: , Carrera: Biología, Universidad: UCM
Tipo: Ejercicios
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1- ¿Qué volumen (ml) y concentración de hemoglobina (mg/ml) se obtendrá en cada caso del apartado 2.1?
Se van a preparar diluciones 1/2, 1/5 y 1/10 partiendo de una disolución inicial de hemoglobina a 1 mg/ml, siendo el diluyente el tampón fosfato potásico 10 nM, a pH 7, y el volumen total 2 ml.
Para la dilución 1/2 utilizamos 1 ml de la disolución inicial de hemoglobina y 1 ml de fosfato potásico, obteniéndose así 2 ml. La nueva concentración es 1 mg/ml / 2 = 0'5 mg/ml.
Para la dilución 1/5 utilizamos 0'4 de la disolución inicial de hemoglobina y 1'6 ml de fosfato potásico, para obtener los 2 ml. La nueva concentración será 1 mg/ml / 5 = 0'2 mg/ml.
Para la dilución 1/10 utilizamos 0'2 ml de la disolución inicial de hemoglobina y 1'8 ml de fosfato potásico, para obtener los 2 ml. La nueva concentración será 1 mg/ml / 10 = 0'1 mg/ml.
2- Completa la tabla:
3- Representa la recta patrón (Absorbancia/Concentraciones de hemoglobina conocidas) y calcula la concentración de la muestras problemas A y B.
6- Calcular la concentración de proteína de dos muestras problema A y B a partir de la recta de calibrado de la figura adjunta, y los datos mostrados en la tabla. ¿Cuál de las dos muestras está más concentrada?
La concentración de A es 0'4 mg/ml y la concentración de B es 0'2 mg/ml, por lo que la muestra más concentrada será A.
7- Complete la tabla siguiente para preparar las diluciones seriadas indicadas en la misma. La disolución inicial será albúmina de suero bovino (BSA) a una concentración de 10 mg/ ml, y cada tubo debe contener un volumen final de 5 ml.