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micro laboratorio practi, Monografías, Ensayos de Microbiología

micro practicas de laboratorio

Tipo: Monografías, Ensayos

2021/2022

Subido el 13/05/2022

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GUIA DE PRÁCTICA CIENCIAS DE LA SALUD
Código de registro: RE-10-LAB-034
Version 4.0
1
UNIVERSIDAD DEL VALLE
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I
PRÁCTICA Nº 1
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:
Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la
salud de los que allí se desempeñan frente a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes
y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterior. En ese entendido la OMS se
dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que
se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en:
Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es
necesario para minimizar riesgos:
El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se
manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.
Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.
Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.
No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.
Protección personal:
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Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

UNIVERSIDAD DEL VALLE

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA Nº 1

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO :

Las medidas de seguridad en laboratorios son un conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la

salud de los que allí se desempeñan frente a los riesgos propios derivados de la actividad, para evitar accidentes

y contaminaciones tanto dentro de su ámbito de trabajo, como hacia el exterior. En ese entendido la OMS se

dio a la tarea de estudiar estos riesgos y clasificar a los laboratorios, para luego dar recomendaciones en lo que

se refiere a normas de bioseguridad. Los laboratorios se clasifican en:

Nuestro laboratorio se encuentra en el grupo de riesgo 1, nivel básico, en este nivel la OMS recomienda que es

necesario para minimizar riesgos:

➢ El Símbolo internacional de peligro biológico debe estar colocado en las puertas de los lugares donde se

manipulen microorganismos que puedan resultar patógenos al humano.

➢ Sólo se podrá entrar a las zonas de trabajo personal autorizado.

➢ Las puertas del laboratorio deben mantenerse cerradas.

➢ No se autoriza la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.

Protección personal:

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

➢ Se usarán en todo momento batas o guardapolvos especiales para el trabajo de laboratorio.

➢ Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que pueden entrañar contacto

directo o accidental con sangre, líquidos corporales y otros materiales potencialmente infecciosos. Una

vez utilizados los guantes, se retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las manos.

➢ El personal y los estudiantes se lavarán las manos después de manipular muestras y antes de salir del

laboratorio.

➢ Se usarán lentes y caretas de seguridad para protección de los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos

y fuentes de radiación ultravioleta artificial.

➢ Está prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio.

➢ Debe usarse calzado cerrado, prohibido entrar con sandalias.

➢ Está prohibido comer, fumar o beber en el laboratorio.

➢ No debe almacenarse comida para consumo humano en el laboratorio.

Procedimientos:

➢ Está estrictamente prohibido pipetear con la boca.

➢ No se colocará ningún material en la boca ni se pasará la lengua por las etiquetas.

➢ Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se reduzca al mínimo la formación de

aerosoles.

➢ Todos los derrames, accidentes y exposiciones reales o potenciales a materiales infecciosos se

comunicarán al supervisor del laboratorio. Se mantendrá un registro escrito de estos accidentes e

incidentes.

➢ Se elaborará y seguirá un procedimiento escrito para la limpieza de todos los derrames.

➢ Los líquidos contaminados deberán descontaminarse (por medios químicos o físicos) antes de eliminarlos

por el colector de saneamiento.

Zonas de trabajo del laboratorio:

➢ El laboratorio se mantendrá ordenado, limpio y libre de materiales no relacionados con el trabajo.

➢ Las superficies de trabajo se descontaminarán después de todo derrame de material potencialmente

peligroso y al final de cada jornada de trabajo.

➢ Todos los materiales, muestras y cultivos contaminados deberán ser descontaminados antes de

eliminarlos o de limpiarlos para volverlos a utilizar.

➢ Las ventanas que puedan abrirse estarán equipadas con rejillas que impidan el paso de artrópodos.

Clasificación de los Residuos:

➢ Desechos generales o comunes son aquellos que no presentan un riesgo adicional para la salud humana

y el ambiente y que no requieren de un manejo especial como papel, cartón, plásticos, restos de alimentos.

➢ Desechos peligrosos o especiales son aquellos que presentan un riesgo para la salud humana y el

ambiente y que requieren de un manejo especial como sangre y hemoderivados, fluidos corporales,

cultivos de agentes infecciosos, vacunas vencidas, cajas de petri, placas de frotis, órganos, tejidos, partes

corporales.

➢ Desechos cortopunzantes agujas, hojas de bisturí, hojas de afeitar, objetos de vidrio y cortopunzantes

desechables.

➢ Desechos especiales frascos de antibióticos y sachet de medicamentos

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

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FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA Nº 2

MATERIAL DE LABORATORIO EMPLEADOS EN MICROBIOLOGIA

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO :

El trabajo en un laboratorio de Microbiología es significativamente diferente al de otros laboratorios, requiriendo

de unos cuidados especiales ya que se debe trabajar en condiciones que se evite la contaminación del operario,

de las muestras y del ambiente. Por todo ello es necesario reconocer cada uno de los materiales que son

utilizados en laboratorio de Microbiología y reconocer el uso que se le da en el mismo. Es cierto que muchos

materiales se comparten con otros laboratorios, sin embargo en microbiología se da un uso especial porque el

objetivo es diferente. Ejemplo: el caso de un mechero, que se utiliza para esterilizar.

2 COMPETENCIA (S)

✓ Describe y dibuja el material empleado en las prácticas de microbiología, y la solución de problemas

✓ Reconoce el uso correcto del material y equipo en las prácticas de microbiología, para la solución de

problemas que se presentan en el campo de trabajo del profesional.

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

EQUIPOS y MATERIALES

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad^ Observaciones

1 Portaobjetos 10 pzas

2 Cubreobjetos 10 pzas

3 Tubos de ensayo 10 pzas

4 Tubos de hemolisis 10 pzas

5 Cajas Petri 5 pzas

6 Asas bacteriológicas 4 pzas

7 Frascos Scott de 250 ml 3 pzas

8 Pipetas de 10 ml 2 pzas

9 Frascos lavadores 2 pzas

10 Gradillas 3 pzas

11 Varillas de tinción 2 pzas

12 Goteros 2 pzas

13 Probetas de 100 ml 2 pzas

14 Bastones o varillas de vidrio 2 pzas

15 Espátula de drigalski 2 pzas

16 Pinzas anatómicas punta roma 4 pzas

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

17 Microscopios 6 pzas

EQUIPOS y MATERIALES

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad Observaciones

17 Centrifugadora 1 pzas

18 Autoclave 1 pzas

19 Horno de calor seco 1 pzas

20 Incubadoras 1 pzas

21 Baño de agua o maría 1 pzas

22 Refrigeradores 1 pzas

23 Mechero de alcohol 2 pzas

24 Mechero de gas 4 pzas

25 Balanzas 2 pzas

INSUMOS

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad^ Observaciones

1 Alcohol al 70 % 20 Ml

4. TECNICA O PROCEDIMIENTO.

➢ Trabajo en grupos pequeños

➢ Describiendo los materiales y su aplicacion durante las practicas

5. PERIODO DE DURACION DE LA PRACTICA

Dos periodos de 50 minutos

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

No se aplica

7. CUESTIONARIO

  1. Indique el uso y realice el dibujo que falta de cada uno de los materiales e instrumentos

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

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FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA Nº 3

TINCIÓN DE GRAM

TINCION ZIEHL NEELSEN

1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. -

Debido a que las bacterias y otros microorganismos son muy pequeños, se requieren generalmente

tinciones biológicas para visualizarlos adecuadamente y demostrar el fino detalle de sus estructuras internas

y su morfología. En la coloración de Gram el Cristal Violeta actúa como colorante primario o básico, que se

une a la pared celular bacteriana, luego de un tratamiento con una solución débil de lugol (Mordiente).

Algunas especies bacterianas debido a la naturaleza química de sus paredes celulares poseen la capacidad

de retener el colorante primario o básico (Cristal Violeta), luego de una decoloración con una mezcla de

alcohol y acetona o con alcohol al 95 %. Tales bacterias se denominan Gram positivas. Las bacterias Gram

negativas, debido a su mayor contenido lipídico en su pared celular, pierden la coloración primaria (Cristal

Violeta) cuando son tratadas con el decolorante y por lo tanto deben tomar el colorante secundario o de

contraste que es la Fucsina o Safranina. Las bacterias Gram negativas aparecen de color rosadas o rojas

vistas al microscopio y las bacterias Gram positivas aparecen de color violeta purpúreo.

1.1 Fundamento de la coloración de Gram:

Este método divide a las bacterias en dos grupos: Gram positivos y Gram negativas. Al colocar los

agentes como cristal violeta o violeta de genciana y añadirles una solución lugol, se combinan con

algunos componentes de la célula bacteriana que son retenidos por la membrana citoplasmática cuando

se tratan con alcohol acetona; otros, en cambio liberan rápidamente el colorante, por lo que no

aparecerán a la visión microscópica a no ser que se contrasten con algún otro tinte biológico como

safranina o fucsina. Por lo tanto, los microorganismos que conservan el cristal violeta o violeta de

genciana se observan de violeta Gram positivo y los que no lo hacen Gram negativos muestran un color

que corresponde al colorante de contraste de color rosado.

1.2 Integridad de la Pared Bacteriana

Si bien se ha demostrado que la pared no toma el colorante, desempeña un importante papel en el

equilibrio de pasaje y retención del colorante primario (Cristal Violeta). Se ha observado que las células

mutiladas en su pared no se tiñen por el Gram y pese a ser Gram positivas, aparecen como Gram

negativas. La pared intacta constituye una barrera importante para la elusión del colorante por el alcohol.

Las células Gram positivas y Gram negativas acumulan el colorante primario por medio de un eslabón

iónico entre los grupos básicos del colorante y los grupos ácidos de la célula.

1.3 Intervención de los componentes químicos:

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Es muy probable que la composición química y la permeabilidad de la bacteria, intervengan en la

diferenciación del Gram. Los lípidos, polisacáridos, ácidos grasos, nucleoproteínas y ciertos ésteres

fosfóricos intervienen en la coloración. La presencia de mucopéptidos en las Gram positivas y de mayor

cantidad de lípidos en las Gram negativas, podrían ser factores para tener en cuenta. En las Gram

negativas los lípidos serian disueltos en gran parte por el alcohol, facilitando la salida del colorante

primario.

1.4 Importancia de Otros Componentes:

a. Lugol: actúa penetrando en ambos tipos de bacterias, formando un precipitado Cristal Violeta-

Yodo.

b. Alcohol-acetona: es en esta etapa donde realmente tiene lugar la diferenciación. En las Gram

negativas, el alcohol no encuentra obstáculos en las capas bacterianas y disuelve o disocia

el precipitado Cristal Violeta-Yodo, el que puede fácilmente escapar al exterior. Las bacterias

Gram negativas al perder el compuesto Cristal Violeta-Yodo, quedan libres, y pueden tomar

el colorante secundario o de contraste (Fucsina o Safranina) y aparecer de color rosado o

rojo. En las Gram positivas, el alcohol atraviesa con dificultad las capas bacterianas debido a

la deshidratación que produce y reduce los poros de la pared.

c. En consecuencia, la disolución del precipitado Cristal Violeta-Yodo se efectúa lentamente, y

el proceso de arrastre tiene lugar aún con mayor lentitud. Por lo tanto, después de transcurrido

el tiempo usual de decoloración, la mayor parte del precipitado Cristal Violeta-Yodo se queda

en las células y estas pueden observarse en el microscopio de color violeta purpúreo.

1.5 Fundamento de la Tinción de Ziehl Neelsen:

Se sabe que el fenol, que forma parte del colorante, es soluble en los lípidos, los cuales son componentes

sobresalientes de las bacterias ácido alcohol - resistentes, como el bacilo de la tuberculosis. También es soluble

en alcohol y agua, más en lípidos y menos en agua. El fenol con la Fucsina forma el compuesto fenol-color (FC).

Al ponerse este compuesto en presencia del citoplasma bacteriano, el fenol se encuentra en un medio donde

su coeficiente de solubilidad es mayor y, por lo tanto, el compuesto fenol-color se fijará fuertemente y coloreará

de rojo la bacteria. Luego se agrega, el decolorante (ácido y alcohol), los que, debido a una permeabilidad de

la membrana citoplasmática, penetran con dificultad y se encuentran con el compuesto fenol-color. El fenol se

halla entonces frente a dos sustancias en las cuales es soluble, pero, como lo es más en lípidos, la mayor parte

del color quedará en el citoplasma y una pequeña cantidad se perderá por solubilización en ácidos y alcohol. Si

se destruye la integridad de la bacteriana por cualquier método, la bacteria pierde su ácido alcohol - resistencia,

pero no su virulencia.

❖ Capitulo 12 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

2. COMPETENCIA (S). -

✓ Analiza el fundamento de la tinción de Gram – Ziehl Neelsen, para la solución de problemas en el

campo de trabajo del profesional.

✓ Interpreta los resultados de la coloración de Gram, reconociendo la morfología y características

tintoriales de los diferentes microorganismos.

✓ Reconoce la importancia de la tinción de Gram en la práctica médica diaria.

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

 Lavar con agua a chorro débil.

 Bañar la superficie del portaobjetos con alcohol de 95 % o con Alcohol-Acetona por 30 segundos.

 Lavar con agua a chorro débil hasta que la decoloración sea total, es decir que no escurra más

alcohol coloreado.

 Cubrir la preparación con safranina por 1 minuto.

 Lavar con agua a chorro débil.

 Dejar secar.

 Observar al microscopio con lente de inmersión (100X)

Pasos de la tinción Ziehl Nelssen

 Preparar el extendido en un portaobjetos utilizando asa bacteriológica o hisopo.

 Dejar secar al aire.

 Fijar el extendido pasando 3 o 4 veces por la llama de un mechero de alcohol. El calor del

portaobjetos debe ser soportado por las manos del operador.

 Colocar el preparado sobre un soporte de Tinción y cubrir con Fucsina Básica Fenicada.

 Calentar por 3 veces hasta la emisión de vapores blancos sin llegar a la ebullición, con un mechero

de alcohol, o con un hisopo de algodón embebido en alcohol, en el lapso de 5 minutos

 Escurrir el colorante y lavar con chorro fino de agua.

 Cubrir el preparado con Alcohol-ácido al 3 % (decolorante) por 5 minutos o hasta que la preparación

esté completamente decolorada.

 Lavar con chorro fino de agua.

 Recubrir la lámina con la solución de Azul de Metileno por 1 minutos.

 Escurrir el colorante y dejar secar al ambiente

 Observar con lente de inmersión.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

Dos periodos de 50 minutos

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

El estudiante anotara los resultados

7. CUESTIONARIO. -

  1. Complete el siguiente esquema:

PASOS METODO GRAM (+) GRAM (-)

  1. Colorante básico
  2. Mordiente
  3. Decolorante
  4. Colorante de

contraste

  1. Llenar el siguiente cuadro

Género Morfología Gram habitad

Staphylococcus aureus

Streptococcus

pneumoniae

Neisseria meningitidis

Bacillus cereus

Escherichia coli

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Clostridium perfringens

Staphylococus epidermidis

Klebsiella ozaenae

Enterobacter aerogenes

Corynebacterium

diphtheriae

UNIVERSIDAD DEL VALLE

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA Nº 4

OBTENCION DE MUESTRAS

  1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. – La obtención de muestra es el conjunto de procedimientos

destinados a obtener una parte representativa cualitativamente y cuantitativamente a partir de un todo, en

nuestro caso, el paciente, el medio ambiente.

Recomendaciones generales para la recolección de muestras:

  • Solicitud de una orden de laboratorio (nombre, edad, sexo, fecha, muestra, otros)
  • Si el paciente recolectara la muestra las instrucciones deberán ser claras (Mejor si son por

escrito)

  • La muestra deberá ser representativa del proceso infeccioso
  • La recolección deberá relazarse antes de comenzar la terapia antimicrobiana o suspender el

antibiótico 48-72 horas antes de la toma de muestra

  • Cuando se realice cultivo y aislamiento de gérmenes el material deberá recolectarse en

recipientes estériles

  • Una vez recolectada la muestra deberá ser llevada al laboratorio lo más rápido posible
  • Etiquetar correctamente las muestras
  • Toda muestra deberá como si fuera patógena
  • Cuando se realiza cultivo de material deberá conocerse el lugar de donde proviene la muestra:

Zonas corporales que normalmente son estériles (sangre, punción de medula ósea, líquido

cefalorraquídeo, liquido sinovial, liquido pleural, liquido peritoneal, tracto respiratorio inferior,

orina recolectada por punción suprapúbica), Zonas corporales que poseen flora normal

comensal (boca, nariz, tracto respiratorio superior, piel, tracto genital, tracto gastrointestinal,

orina recolectada por micción media, sondas o bolsas recolectoras)

MUESTRAS PARA EL ANALISIS BACTERIOLOGICO

Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

Orina chorro medio

previa higiene

Mujeres: limpiar la

zona con agua y jabón, luego

El recipiente donde se

recolecta la muestra deberá ser

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Muestra Preparación del paciente Instrucciones especiales

previa asepsia de la zona con

alcohol yodado

❖ Capitulo 16 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

2. COMPETENCIA (S)

✓ Emplea y describe métodos y técnicas para la obtención adecuada de muestras para el diagnóstico

microbiológico.

✓ Conoce los diferentes medios de transporte y técnicas de envío de muestras al laboratorio

microbiológico.

✓ Realiza una solicitud correcta para el examen microbiológico y su relación con el campo de trabajo del

profesional.

3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

EQUIPOS y MATERIALES

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad^ Observaciones

1 Portaobjetos 15 Pzas

2 Mechero de bunsen 4 Pzas

3 Pinzas metálicas punta roma 5 Pzas

4 Varillas de tinción 2 Pzas

INSUMOS

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad Observaciones

1 Frascos para muestras de orina 5 Pzas

2 Bajalenguas 15 Pzas

3 Hisopos de algodón estériles 15 Pzas

4 Guantes 5 Pares

5 Colorantes de Gram 1 kit

4. TECNICA O PROCEDIMIENTO

Trabajo en grupos 5 estudiantes para la extracción de muestras

Elaboración de una orden de laboratorio para solicitar un examen microbiológico

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

Dos periodos de 50 minutos

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

El estudiante anotara los posibles errores cometidos en la toma de muestra

7. CUESTIONARIO

1.- Llenar el cuadro que muestra son representativas en las siguientes patologías:

Enfermedad Agente etiológico muestra tratamiento

Meningitis neonatal

tuberculosis

Fiebre tifoidea

Amigdalitis

Micosis sistémicas

Infecciones urinarias

otitis

Gonorrea

Sífilis

Disentería bacilar

Chancroide

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

SERVICIOS DE LABORATORIO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA NO. 5

TÉCNICAS DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO Y MOLECULARES

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO

Las técnicas inmunológica se utilizan para detectar, identificar y cuantificar antígenos en muestras clínicas, así

como para evaluar la respuesta humoral frente a la infección y los antecedentes de exposición agentes

infecciosos de un individuo. La especificidad de la interacción antígeno- anticuerpo y la sensibilidad de muchas

de las técnicas inmunológicas las convierten en unas poderosas herramientas de laboratorio

Reacción de Precipitación: Se forma un inmunocomplejo que con el tiempo aumenta de tamaño, volviéndose

insoluble en el medio dando lugar a un precipitado. Estas reacciones de precipitación se pueden llevar a cabo

en dos medios:

Medios Líquidos: En donde el anticuerpo se encuentra en solución. Ej: Reacción de VDRL

Medios Gelosados: Aquí el antígeno o anticuerpo está en un soporte (agar-agar, agarosa, poliacrilamida). Ej:

IDRS (inmunodifusión radial simple, que sirve para cuantificar IgM, IgD, IgG, IgA, IgA s

Reacción de Aglutinación: Aquí el antígeno está en forma de partícula. Puede ser:

Aglutinación directa: El antígeno particulado insoluble es aglutinado por el anticuerpo. Ej: Huddleson y Widal

Aglutinación Indirecta: Aquí se emplean transportadores a los que se adhiere en la superficie el antígeno

particulado insoluble. Esos transportadores pueden ser:

Partículas de Látex: como ejemplo encontramos: Reacción de Proteína C reactiva, factor reumatoideo,

Determinación de Grupo sanguíneo y factor, HCG, etc.

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad^ Observaciones

1 Jeringas 10 Pzas

2 Lancetas 20 Pzas

3 Guantes 5 Pares

4 Algodón 100 g

5 Reactivo de widal 1 Kit

6 Reactivo de grupo sanguíneo 1 Kit

5. TECNICA O PROCEDIMIENTO

  • Se formaran grupos pequeños
  • Determinación de Grupo y Factor
  • Determinación de la prueba de widal

5. TIEMPO DE DURACION DE LA PRÁCTICA

Dos periodos de 50 minutos

6. MEDICION, CALCULOS Y GRAFICOS

El estudiante elabora un cuadro comparativo de los grupos sanguíneos

7. CUESTIONARIO

  1. Realice un cuadro con las pruebas serológicas y moleculares
  2. En qué consiste y la utilidad del inmunoblot o Western Blot.
  3. Explique el fundamento de la Reacción de polimerasa en cadena y sus aplicaciones.
  4. Cite la diferencia entre las pruebas de PCR y PCR latex.

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

SERVICIOS DE LABORATORIO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA I

PRÁCTICA NO. 6

ESTERILIZACIÓN - DESINFECCION

1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO:

ESTERILIZACIÓN : Es un proceso por el que se eliminan todas las formas de vida microbiana (Microorganismos

patógenos y no patógenos), incluso las esporas bacterianas, se logra por medios físicos y químicos (Óxido de

Etileno).

DESINFECCIÓN: Es un proceso por el que se destruyen microorganismos patógenos, pero no siempre todos

los microorganismos y esporas, se logra mediante métodos químicos sobre superficies u objeto inanimados (

mobiliario, equipamiento, instrumental)y métodos quimicos.

ASEPSIA : Significa ausencia o privación de todos los gérmenes patógenos o no.

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Controles Físicos: Son los más simples y menos precisos. Ej: Termómetro, Manómetro, Reloj.

Controles Químicos: Son más precisos. Son cintas que cambian de color con la correcta esterilización.

Controles Biológicos: Son los más exactos, pero lleva más tiempo realizarlos. Son bolsas selladas que

contienen microorganismos. Estas bolsas se colocan juntamente con el material a esterilizar, y luego de

finalizado el proceso de esterilización se cultivan.

METODO DE DESINFECCION

FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA DESINFECCION

 Los factores que intervienen en la desinfección son:

 La Temperatura

 El tipo de microorganismo

 La concentración del Antiséptico o Desinfectante

 La presencia de Materia Orgánica

 El Tiempo

 El pH

 La Naturaleza de la superficie a desinfectar

LAVADO DE MANOS

Lavado Higiénico: Es el que se realiza diariamente de forma casera, disminuye la flora transitoria (flora que se

adquiere por contacto con objetos contaminados). Se realiza con agua y jabón.

Lavado Antiséptico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en

piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica, cepillo y agua. Solo se cepillan las manos.

Alto nivel

Nivel intermedio

Bajo nivel

Código de registro: RE- 10 - LAB- 034 Version 4.

Lavado Quirúrgico: Elimina la flora transitoria y disminuye la flora residente (flora que habita normalmente en

piel). Se emplea solución jabonosa antiséptica, cepillo y agua. Se cepilla el antebrazo y el codo.

❖ Capitulo 3 Murray, P. Rosenthal, K. Pfaller, M.,(2017). Microbiología Médica. Ed Elsevier, 8 va

2. COMPETENCIA(S)

✓ Identifica las características de desinfección, asepsia y antisepsia, que se presentan en el campo

de trabajo del profesional

✓ Realiza asepsia de las manos por medio del lavado y cepillado usando técnicas adecuadas.

✓ Realiza la limpieza y preparación de la piel o lugar en el cual se desea realizar una toma de muestra

bacteriológica o un procedimiento quirúrgico básico, en la solucion de casos clinicos

✓ Identifica las características de esterilización, métodos físicos como calor seco, calor húmedo y su

uso en el campo de trabajo profesional

3. MATERIAL, REACTIVOS

EQUIPOS y MATERIALES

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes) Unidad^ Observaciones

1 Autoclave 1 Pzas

2 Mecheros bunsen 4 Pzas

3 Cajas Petri 20 Pzas

4 Pipetas de 10 ml 3 Pzas

5 Tubos de hemolisis 10 Pzas

6 Guantes para caliente 1 Par

INSUMOS

Ítem DENOMINACIÓN

Cantidad

por grupo

estudiantes)

Unidad Observaciones

1 Papel madera o sabana 2 pliegues

2 Hilo de caña 2 Metros

3 Alcohol al 70 % 20 Ml

4 Algodón 50 Gramos

5 Fosforo 1 pza

4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO