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MICROBIOLOGÍA TEMA 11 CATY, Apuntes de Microbiología

Asignatura: Microbiología, Profesor: cati rivas, Carrera: Biología, Universidad: UAM

Tipo: Apuntes

2013/2014

Subido el 15/05/2014

aranchalp
aranchalp 🇪🇸

4.1

(203)

47 documentos

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TEMA 11: MUTACIONES Y SU BASE QUÍMICA
1. Conceptos previos.
Mutación. Cambio hereditario en la secuencia de las bases que constituye el genoma
de la bacteria. No podemos considerar una cepa mutante si el cambio no se pasa a los
individuos de la siguiente generación.
Genotipo: conjunto de genes en un organimso: por ejemplo el gen his.
Fenotipo: propiedades observables del organismo o cepa mutante::
his+ : se expresa
his- : no se expresa
Cepa silvestre/parental/salvaje: es la cepa aislada de la naturaleza, que ne principio no
presenta mutaciones, es decir no es una cepa mutante. La aisla el experimentador de
la naturaleza y trabajo con ella
Cepa mutante: es aquellas poblaciones bacterianas mutantes.
2. Tipos de mutaciones.
No seleccionables: son difícilmente identicables
Seleccionables: Tienen algo que permite la diferenciación de la cepa silvestre , como
por ejemplo la resistencia a antibióticos
3. Detección y rastreo de mutantes:
Rastreo por réplica de placa:
Lo primero que se hace es encontrar un nutriente sin el cual no puedan crecer.
1. Placa con colonias de bacterias, en la que tenemos tanto mutantes como cepas
salvajes, es decir predecimos que hay cepas mutantes y cepas salvajes.
2. Se realiza un réplica en terciopelo que actúa como papel de calco , de manera que
sabemos exactamente donde se encontraban las colonias de bacterias en el primer
cultivo. De manera que en el tercipelo se forman unos circulo con los pequeños
organismos que han caído.
3. En una placa tenemos todos los organimso, tanto mutantes como silvestre:
3.a. Si el cultivo está completo: crecen todos los m.o, tanto mutantes como
silvestres
3.b .Si el cultivo le falta este requerimiento: solamente crecen los silvestres, debido
a que la mutación que poseen los mutantes , les impide crecer en un medio sin
este requerimiento
Auxotrofo: mutante con una necesidad nutricional para el crecimiento
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TEMA 11: MUTACIONES Y SU BASE QUÍMICA

  1. Conceptos previos.
  • Mutación. Cambio hereditario en la secuencia de las bases que constituye el genoma de la bacteria. No podemos considerar una cepa mutante si el cambio no se pasa a los individuos de la siguiente generación.
  • Genotipo: conjunto de genes en un organimso: por ejemplo el gen his.
  • Fenotipo: propiedades observables del organismo o cepa mutante::
    • his+ : se expresa
    • his- : no se expresa
  • Cepa silvestre/parental/salvaje: es la cepa aislada de la naturaleza, que ne principio no presenta mutaciones, es decir no es una cepa mutante. La aisla el experimentador de la naturaleza y trabajo con ella
  • Cepa mutante: es aquellas poblaciones bacterianas mutantes.
  1. Tipos de mutaciones.
  • No seleccionables: son difícilmente identificables
  • Seleccionables: Tienen algo que permite la diferenciación de la cepa silvestre , como por ejemplo la resistencia a antibióticos
  1. Detección y rastreo de mutantes:

Rastreo por réplica de placa:

Lo primero que se hace es encontrar un nutriente sin el cual no puedan crecer.

  1. Placa con colonias de bacterias, en la que tenemos tanto mutantes como cepas salvajes, es decir predecimos que hay cepas mutantes y cepas salvajes.
  2. Se realiza un réplica en terciopelo que actúa como papel de calco , de manera que sabemos exactamente donde se encontraban las colonias de bacterias en el primer cultivo. De manera que en el tercipelo se forman unos circulo con los pequeños organismos que han caído.
  3. En una placa tenemos todos los organimso, tanto mutantes como silvestre:

3.a. Si el cultivo está completo: crecen todos los m.o, tanto mutantes como silvestres

3.b.Si el cultivo le falta este requerimiento: solamente crecen los silvestres, debido a que la mutación que poseen los mutantes , les impide crecer en un medio sin este requerimiento

  • Auxotrofo: mutante con una necesidad nutricional para el crecimiento
  • Prototrofo: progenitor del que deriva el auxotrofo.

Selección negativa.

No favorece el crecimiento del mutante, si no que inhibe el crecimiento de la cepa silvestres debido a la adición de un componente tóxico para la cepa silvestre y que el mutante puede tolerar.

Por ejemplo las histidina y penicilina.

La penicilina mata solo a las células en crecimiento, pero en un medio rico en histidina la cepa mutante no crece, solamente lo hace la cepa silvestre.Por tanto la penicilina mata a la cepa silvestre, que son las poblaciones que han crecido. Tipo de selección negativa que afecta a la cepa salvaje.

Tras esto se vierte histidina en el medio, de manera que la cepa mutante ya puede crecer, son auxótrofos,pues necesitan un nutriente para su crecimiento.

Test de ames:

Se utiliza en medicina para la detección de mutágenos potencialmente cancerígenos.

Lo que se busca en este caso es un aumento en la tasa de reversión de la mutación en las cepas auxotrofas.

Por ejemplo en un medio sin histidina, solo los salvajes crecen, el resto necesitan histidina para su crecimiento son auxotrofos.

Lo que se produce en este caso tras un cierto tiempo es una reversión de la mutación , es decir que la cepa mutante se vuelve salvaje, y puede crecer en medio sin histidina. Denominándose ahora cepa mutante revertiente.

Por ejemplo:

Uso de enzimas hepáticas: agente muy mutagénico.

  • Se impregna la muestra con el agente altamente mutagénico “ activado” en el DISCO DE CELULOSA, + una enzima en medio sin histidina si el agente no es mutagénico.
  • Si el agente es mutagénico, las colonias que no podían crecer en un principio debido a que eran cepas mutante auxotrofas, en ese momento pueden crecer, debido a que se ha producido una reversión, teniendo en ese momento la cepa mutante revertiente.
  1. Bases moleculares de la mutación

Respecto al origen de la mutación.

  • Mutaciones com cambio de sentido: las proteína es diferente por los que hay cambios en la actividad de la misma.
  1. Mutágenos químicos:
  • Análogos a las bases nucleotídicas: es decir producen sustituciones en los pares de bases, son útiles en replicación
  • Agentes intercalantes: acridina y/o bromuro de etidio, se insertan entre dos pares de bases de DNA y las separan, durante la replicación esto causa microinserciones o microdeleciones (mutaciones de cambio de fase).
  • Radiaciones:
  • Ionizantes